Geração de Integração-livres induzidas células-tronco pluripotentes a partir de células mononucleares de sangue periférico humano Usando epissï¿½ica Vectors

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1 de janeiro de 2017

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Wei Wen¹ , Jian-Ping Zhang¹ , Wanqiu Chen² , Cameron Arakaki² , Xiaolan Li¹^,² , David Baylink² , Gary D. Botimer³ , Jing Xu¹ , Weiping Yuan¹ , Tao Cheng¹^,⁴^,⁵^,⁶^,⁷ , Xiao-Bing Zhang¹^,²

¹State Key Laboratory of Experimental Hematology, Institute of Hematology and Blood Disease Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ²Division of Regenerative Medicine, Department of Medicine, Loma Linda University, ³Department of Orthopaedic Surgery, Loma Linda University, ⁴Center for Stem Cell Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences, ⁵Department of Stem Cell & Regenerative Medicine, Peking Union Medical College, ⁶Collaborative Innovation Center for Cancer Medicine, ⁷Tianjin Key Laboratory of Blood Cell Therapy and Technology

Este protocolo descreve um método detalhado para a geração eficiente de iPSCs livres de integração a partir de células sanguíneas periféricas adultas humanas. Com o uso de quatro vetores epissómicos baseados em oriP/EBNA para expressar os fatores de reprogramação, KLF4, MYC, BCL-XL ou OCT4 e SOX2, milhares de colônias de iPSC podem ser obtidas a partir de 1 mL de sangue periférico.