Órgão Cultura e Whole Mount Imunofluorescência Coloração de rato Wolff Dutos

O objetivo geral deste método de cultura de órgãos e imunofluorescência de montagem inteira é visualizar e entender melhor o processo de enrolamento e desenvolvimento por indução de Wolff. Este método ajudará a responder a questões-chave no campo da biologia do desenvolvimento sobre os mecanismos envolvidos no desenvolvimento da forma, estrutura e função dos órgãos. As principais vantagens dessa técnica são que ela imita sistemas in vivo e fornece informações mais precisas do que estudos de cultura de células que carecem de fatores de nicho.

Antes do meio-dia do dia 15 pós-concepção, coloque uma rata grávida em decúbito dorsal em papel absorvente e borrife o lado ventral do abdômen com etanol a 70%. Usando uma pinça, levante a pele abdominal inferior do lado ventral do animal e use uma tesoura cirúrgica para fazer uma incisão lateral que se estende da abertura urogenital até a caixa torácica. Segure a bexiga urinária com a pinça logo acima do colo do útero e faça uma incisão no útero.