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JoVE Journal Cancer Research
Evaporation-reducing Culture Condition Increases the Reproducibility of Multicellular Spheroid Formation in Microtiter Plates

A evaporação de redução de Cultura condição aumenta a reprodutibilidade da Formação multicelular esferoidal em placas de microtitulação

Full Text
7,371 Views
11:24 min
March 7, 2017

DOI: 10.3791/55403-v

Viswanath Das1, Tomáš Fürst1, Soňa Gurská1, Petr Džubák1, Marián Hajdúch1

1Institute of Molecular and Translational Medicine,Palacky University in Olomouc

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

A perda irregular do meio de placas de microtitulação afecta a reprodutibilidade de formação de esferóides de tumor multicelular uniforme. A melhoria das condições de cultura de forma a reduzir a perda significativa vai melhorar a reprodutibilidade de formação de esferóides e os resultados de ensaios baseados em esferóides utilizando a técnica de sobreposição de líquido.

O objetivo geral deste procedimento é melhorar a escalabilidade e a reprodutibilidade da formação uniforme de esferoides usando uma técnica de sobreposição líquida em placas de 384 poços. A principal vantagem desta técnica é que ela reduz a reoperação excessiva do meio de várias placas e, assim, melhora a reprodutibilidade da formação de esferoides. Desenvolvemos e validamos o método de cultura de esferoides 3D para testes de triagem de artrópodes em nosso laboratório e nosso estudo foi avaliar qual é o efeito de borda nas placas das culturas multicelulares.

Hoje vou demonstrar o procedimento junto com Sona, um pôster do laboratório. Comece este procedimento pesando zero vírgula sete cinco gramas de agarose de baixo ponto de fusão e adicione-o a 100 mililitros de meio mccoy's 5a com ou sem vermelho de fenol e sem soro. Aqueça a solução no micro-ondas e agite a cada um ou dois minutos para dissolver completamente a agarose.

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