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DOI: 10.3791/55438-v
Chin Siang Ong1,2, Takuma Fukunishi1, Andrew Nashed1, Adriana Blazeski3, Huaitao Zhang1, Samantha Hardy1, Deborah DiSilvestre2, Luca Vricella1, John Conte1, Leslie Tung3, Gordon Tomaselli2, Narutoshi Hibino1
1Division of Cardiac Surgery,Johns Hopkins Hospital, 2Division of Cardiology,Johns Hopkins Hospital, 3Department of Biomedical Engineering,Johns Hopkins University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Este protocolo descreve a bioprinção 3D do tecido cardíaco sem o uso de biomateriais. Os remendos cardíacos bioprinted 3D apresentam integração mecânica de esferóides componentes e são altamente promissores na regeneração do tecido cardíaco e como modelos 3D de doenças cardíacas.
O objetivo deste vídeo é demonstrar a bioimpressão 3D do tecido cardíaco sem o uso de biomateriais, usando apenas células. Em primeiro lugar, cardiomiócitos, células endoteliais e fibroblastos são isolados, contados e misturados nas proporções celulares desejadas. Eles são então distribuídos usando uma pipeta multicanal e para poços individuais em placas de 96 poços de fixação ultrabaixa.
As células nas placas de 96 poços são incubadas por três dias, após três dias, formam esferóides que batem espontaneamente. A microscopia confocal revela a expressão de conexões em 43, que é marcada com fluorescência em verde em cardiomiócitos positivos para troponina T, que são marcados com fluorescência em vermelho distante dentro dos esferoides. As placas de 96 poços contendo os esferoides são então carregadas na bio-impressora 3D.
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