Name: Um método para produção de proteína recombinante em células de inseto mCD1d. (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-12-10T22:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 41 s
Description: Aprenda a produzir proteína recombinante mCD1d em células de inseto High Five usando baculovírus. Este método permite gerar tetrâmeros essenciais para estudos de células NKT em imunologia.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

I. Descongele as células Pegue o frasco frozen de TN5 células, e descongele-o em banho-maria a 37 ° C. Adicionar 5ml de inseto médio Express (Invitrogen, catálogo número 10.486), em 25 centímetros frasco TC 2. Note-se que cinco expresso vem sem Glutamina; precisa adicionar 10ml de strep caneta 100X glutamina ou glutamina sozinha para uma mídia lt. Adicionar TN5 células dentro dele e incubar por 30 minutos em 27 ° C incubadora. Então, aspirado o meio com DMSO delicadamente, sem perturbar as células acoplado na parte inferior do balão. Adicionar 5 ml de meio fresco. II. Crescendo e expandindo as células Monitorar as células a cada dia. Quando frasco é quase 70% confluentes, trazer as células em suspensão batendo o frasco em ambos os lados e transferência das células para 175 centímetros 2 frasco, adicionando 21 ml de meio de expressar insetos e 5 ml de cultura de células. Cada frasco T175 deve ter em torno de 25-30ml meio como um volume final. Dividir frasco confluentes (aproximadamente 1.000 mil / ml conc.) 04/01 ou 05/01, conforme necessário. Não deixe que as células cresçam demais. Contar o número de passagens que você dividir as células. Não crescem mais de 30 número de passagem, pois pode causar envelhecimento das células resultantes lise celular. Quando você alcançar o volume desejado na concentração de 1 milhões / ml, infectar as células. Eu geralmente crescem até 2 a 2,5 litros, o que geralmente eleva a setenta dois frascos de 175 centímetros e aprox. 25 a 30ml frasco / ou cinco frascos contendo 1 litro Erlenmeyer e aprox. 400ml e 500 ml em cada frasco Nota: Você pode crescer tanto em células T-175 frasco de selo de ficha ou frasco Erlenmeyer Corning. Células cultivadas em frascos Erlenmeyer é mais rápido e mais fácil. III. A titulação do vírus pelo método de diluição Ponto Final <ol><li> Placa de 3000-5000 células por poço em chapa plana inferior de 96 poços em 200ul de Express médio SFM cinco. Vamos resolver as células a 27 ° C por pelo menos 30 minutos. </li><li> Fazer diluição em série de ações de baculovírus. Se deve fazer 10/01 diluição em uma linha de 96 placa de fundo bem U, usando 250ul por poço. Diluições são feitas em meio expresso SFM Five. </li><li> Usando uma pipeta multicanal, transferir um montante fixo (geralmente 20 ul) de diferentes diluições para as células. </li><li> Cultura a 27 ° C por 7 dias. Para evitar a evaporação das linhas de ponta, enrole as bordas da placa com parafilme. </li><li> Após 7 dias, verifique a placa e determinar qual a diluição do vírus dá uma infecção de 50% - metade dos poços nesta concentração de vírus são infectados). Em seguida, use uma fórmula para calcular o título, que se expressa na UFP / ml (UFP placa-unidades formadoras). A fórmula é encontrada na maioria dos manuais de baculovírus. </li></ol> IV. Infectar as células É muito importante saber o título exato do vírus. Adicionar a quantidade necessária de vírus. Para a preparação de viral das células deve estar infectado multiplicidade de infecção (MOI) não superior a 1 (1pfu para 1High Cinco celular) Superior MOI leva à produção de mutações virais. Para a produção de proteínas, a quantidade usual é MO1 5-10. Exemplo: A título de baculovírus mCD1d = 1X108 UFP / ml Adicionar MOI = 1 (para amplificar o vírus) = 20x10 ^ 6 células / frasco / 1X10 ^ 8 UFP / ml = 200 ul / frasco MOI = 5 a 10 (para a produção de proteína) = 1ml a 2ml Para 20x10 ^ 6 células / frasco No 4 º dia após a infecção, olhe para as células infectadas. Eles devem ser individual, flutuantes, salsichas inchado e formando. Os sobrenadantes V. Recuperar Tomar a média de frascos infectados, e transferir para 250ml azul garrafas cap Falcon Spinning. Eles podem ser autoclavados e reutilizados. Preencher as garrafas uniformemente e centrifugar as células em Sorvall GSA rotor em 200 rpm, 20 minutos, 4 ° C. Recolher o sobrenadante e prossiga para posterior purificação. VI. Purificação de antígeno recombinante mCD1d <ol><li> Diálise e concentração em tampão fosfato de sódio 150mm (pH 7,4) </li><li> Por Cromatografia Agarose Ni-NTA, eluir a proteína mCD1d + B2M com 150mm de fosfato de sódio 200 mM Immidazole </li><li> Executar coluna Dessalinização utilizando 20mM Tris Hcl PH8 buffer para se livrar de Immidazole </li><li> Executar cromatografia de troca aniônica utilizando coluna MonoQ para eliminar os contaminantes restantes. </li><li> Concentrar para 1mg/ml utilizando YM concentrador de 30 (Millipore) </li><li> Bira biotynlation enzimática de mCD1d acordo com o protocolo do fabricante (avidez) </li><li> A biotina livre é eliminado por S200 coluna (Chromatograpy exclusão de tamanho), utilizando tampão fosfato salino (PBS), pH7.4. Uma média de 2-3 mg de proteína biotynlated poderia ser obtido a partir de 2 litros de sobrenadante </li><li> Produção de a-GalCer CD1d tetrâmero. </li></ol> Para carregar CD1d molécula com um GalCer, solúvel biotynlated CD1d-b2m é incubada overnight em temperatura ambiente com três vezes o excesso molar de uma GalCer, dissolvido em 0,5% Tween -20 em PBS, Cloreto de Sódio O.9%. Tetrâmeros são geradas pela mistura de um-GalCer monômeros carregados CD1d com 4 vezes o excesso molar de PE - estreptavidina conjugados e incubar por 4 horas à temperatura ambiente. Armazenar a 48 ° C.

<ol><li>Benlagha, K., Weiss, A., Beavis, A., Teyton, L., Bendelac, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+identification+of+glycolipipd+antigen-specific+T+cells+using+fluorecent+CD1d+tetramers%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">In vivo identification of glycolipipd antigen-specific T cells using fluorecent CD1d tetramers.</a> J. Exp. Med. 191, 1895-1903 (2000).</li>
<li>Kinjo, Y., Wu, D., Kim, G., Xing, G. W., Poles, M. A., Ho, D. D., Tsuji, M., Kawahara, K., Wong, C. H., Kronenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recognition+of+bacterial+glycosphingolipids+by+natural+killer+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Recognition of bacterial glycosphingolipids by natural killer T cells.</a> Nature. 434, 520-525 (2005).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Binding+and+antigen+presentation+of+ceramide-containing+glycolipids+by+soluble+mouse+and+human+CD1d+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Binding and antigen presentation of ceramide-containing glycolipids by soluble mouse and human CD1d molecules.</a> J. Exp. Med. 190, 1069-1080 (1999).</li>
<li>Porcelli, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CD1+family%3A+A+third+lineage+of+antigen-+presenting+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Immunol%22%5BJournal%5D)">The CD1 family: A third lineage of antigen- presenting molecules.</a> Adv. Immunol. 59, 1-98 (1995).</li>
<li>Sidobre, S., Kronemberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD1+tetramers%3A+A+powerful+tool+for+the+analysis+of+glycolipid-reactive+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">CD1 tetramers: A powerful tool for the analysis of glycolipid-reactive T cells.</a> J. Immunol. 169, 1340-1348 (2002).</li>
</ol>

Neste procedimento, é mostrado como iniciar, crescer, infectar células de inseto e como título do baculovírus uso dessas células. Os aspectos mais importantes deste processo são a manutenção de células e de saber o título exato de baculovírus. Depois de ter gerado CD1 tetrâmeros, que pode ser usado como uma poderosa ferramenta para análise de células T glicolipídeo reativa. Sistemas de baculovírus também são amplamente utilizados para a produção de proteínas recombinantes, incluindo tetrâmeros de MHC classe II de modo que este procedimento ...

<table><tbody><tr><td>Express Five SFM</td><td> Meio Livre de Soro</td><td>Invitrogen</td><td>10486025</td><td></td></tr><tr><td>High Five TM</td><td> Células de Inseto</td><td>Invitrogen</td><td>B855-02</td><td></td></tr><tr><td>Glutamina Pen strep</td><td>Antibióticos</td><td>Invitrogen</td><td>10378-016</td><td></td></tr><tr><td>Frasco TC de 25 cm²</td><td> Plástico</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-126-28</td><td></td></tr><tr><td>Frascos TC de 175 cm²</td><td> Frasco com vedação</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-126-8</td><td></td></tr><tr><td>Frascos de Erlenmeyer</td><td> Frasco para Cultura Celular</td><td>Fisher Scientific</td><td>07 200 672</td><td></td></tr><tr><td>Concentrador YM 30</td><td>30.000 MWCO</td><td>EMD Millipore</td><td>UFC 903096</td><td></td></tr><tr><td>Equipamento FPLC</td><td></td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Enzima e Tampão BrA</td><td> Kit de Biotinilação</td><td>Avidity</td><td>BIRA500</td><td></td></tr><tr><td>Coluna de Agarose Ni-NTA</td><td>Coluna para Purificação de Proteínas com Etiqueta His</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Coluna de Dessalinização</td><td> Para Remover o Sal da Proteína</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Coluna MonoQ</td><td>Cromatografia de Troca Iônica Aniônica</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Coluna S200</td><td> Cromatografia de Exclusão por Tamanho</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>alpha-Galcer</td><td> Glicolipídio</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Estreptavidina-PE</td><td> Para Conjugação de Proteína</td><td>Molecular Probes, Life Technologies</td><td>S-866</td><td></td></tr></tbody></table>

um método para produção de proteína recombinante em células de inseto mcd1d.

A Method For Production of Recombinant mCD1d Protein in Insect Cells.

CD1 proteínas constituem uma terceira classe de moléculas apresentadoras de antígenos. Eles são glicoproteínas de superfície celular, expressos em aproximadamente 50 kDa glicosilada cadeias pesadas que são não covalentemente associados com beta2-microglobulina. Eles se ligam lipídios ao invés de peptídeos. Embora sua estrutura confirma a semelhança das proteínas CD1 ao MHC de classe I e moléculas de classe II apresentando antígeno, o sulco mCD1d é relativamente estreita, profunda e altamente hidrofóbico e tem dois bolsos de ligação em vez dos vários bolsos rasos descrito para o clássico MHC- codificados moléculas apresentadoras de antígenos. Com base em suas seqüências de aminoácidos, como um sulco hydrobphobic fornece um ambiente ideal para a ligação de antígenos lipídicos. A Natural Killer T (NKT) usar suas células TCR a reconhecer glycolipids vinculado ou apresentados por CD1d. Células T reativas a lipídeos apresentado por CD1 estiveram envolvidos na proteção contra doenças auto-imunes e infecciosas e na rejeição do tumor. Assim, a capacidade de identificar, purificar e controlar a resposta do CD1-reativa de células NKT é de grande importância. A geração de tetrâmeros de alfa galactosyl ceramida (a-GalCer) com CD1d tem uma visão significativa sobre a biologia das células NKT. Tetrâmeros construído a partir de outras moléculas CD1 também têm sido gerados e estes novos reagentes têm expandido o conhecimento das funções das células lipídicas reativa T, com uso potencial no monitoramento da resposta ao lipídica baseado em vacinas e no diagnóstico de doenças auto-imunes e outras tratamentos.

Um método para preparar células de insetos e infectá-las com baculovírus com a finalidade de produção de recombinantes proteinand mCD1d gerando tetrâmeros mCD1d.

Um método para produção de proteína recombinante em células de inseto mCD1d.

As proteínas CD1 constituem uma terceira classe de moléculas apresentadoras de antígenos. Elas são glicoproteínas de superfície celular, expressas como glicosiladas de aproximadamente 50 kDa...

Olá, sou Ashra Corona do laboratório do Dr. Mitch Kronenberg, do Departamento de Imunologia do Desenvolvimento do La Jolla Institute for Allergy and Immunology. Hoje vou mostrar como preparar células de inseto High Five e infectá-las com VIR com o objetivo de gerar tetrameros de MA CD 1D. Os tetrameros de CD 1D são utilizados pelo nosso laboratório e por outros para o reconhecimento de células NKT.O sistema VIR é amplamente utilizado para produzir proteínas recombinantes, incluindo os tremores da classe MS C tipo dois TE. Assim, o procedimento que será apresentado possui uma aplicabilidade muito mais ampla. Este procedimento envolve a iniciação e o cultivo de células de inseto High Five, infecção das células com reovírus carregando o cDNA do CD1D, colheita do sobrenadante por centrifugação após quatro dias de infecção, lise e concentração da proteína em tampão de fosfato de sódio 150 milimolar, pH 7,4, purificação da proteína de CD1D de camundongo por afinidade com níquel e troca iônica pelo método Romme, concentração da proteína CD1G de camundongo até 1 mg/mL utilizando concentrador YM30, onde ocorre a biotinilação enzimática do CD1D de camundongo pelo protocolo AVID D e a eliminação da biotina livre por coluna S200.E, finalmente, a produção de géis alfa de CD 1D Tet. Embora todo o procedimento envolva todas essas etapas, hoje vamos apenas mostrar como manipular essas células e infectá-las com vírus, com o objetivo de gerar mais tremores de CD 1D. Vamos começar.Primeiramente, gostaria de mostrar como cultivar as células de inseto TN-5, a linhagem High Five originada de células ovarianas do inseto traça-da-couve. Elas são utilizadas neste protocolo porque crescem em meio livre de soro, são adaptáveis ao cultivo em suspensão e produzem altos níveis de proteína recombinante em cinco ml de meio Insect Express em frascos de cultura de tecidos de 25 centímetros quadrados. Observe que o meio Express Five não contém glutamina.Portanto, precisamos adicionar 10 ml de um estoque de glutamina a cem vezes, ou apenas glutamina, em um litro de meio. Agora, vou pegar o tubo congelado de células de inseto High Five, descongelar imediatamente em banho-maria a 37 graus Celsius, adicionar as células de inseto High Five ao frasco e incubar por 30 minutos em incubadora a 27 graus Celsius. Em seguida, aspirar o meio para remover o meio contendo DMSO suavemente, sem perturbar as células aderidas ao fundo do frasco.Agora precisamos adicionar cinco ml de meio fresco ao frasco após o descongelamento; agora precisamos expandir as células antes da infecção com vírus. Monitore as células diariamente quando o frasco estiver quase com 70% de confluência. Coloque as células em suspensão batendo no frasco em ambos os lados.Transfira as células para um frasco quadrado de 75 centímetros adicionando 25 ml de meio expresso para insetos e cinco ml de frasco de divisão de cultura celular. Divida na proporção de um para quatro ou um para cinco, conforme necessário. Não permita que as células excedam o crescimento; conte o número de passagens em que você dividiu as células.Não ultrapasse o número de passagem 30, pois isso pode causar envelhecimento celular resultando em lise celular. As células precisam ser repicadas a cada dois dias. Se repicarmos, a proporção é de um para cinco.Quando atingir o volume desejado na concentração de 1 milhão de células por mL para infectar as células, normalmente cultivo até dois litros, o que geralmente corresponde a frascos de 71 a 75 cm², com aproximadamente 25 mL por frasco, ou quatro frascos ER de um litro, com cerca de 500 mL por frasco. O crescimento celular em frascos ER é muito mais rápido: adicione 100 mL de cultura e 400 mL de meio SFM Express Five e cultive em agitador a 125 rpm e 27 graus Celsius até atingir 1 milhão de células por mL no volume desejado. Antes de infectar as células, gostaria de mostrar como titular o vírus belo, o que faremos a seguir. Para titular o vírus, plaque de 3.000 a 5.000 células por poço.Bem em uma placa de 96 poços com fundo plano em 200 microlitros de meio SFM Insect Express 5. Deixe as células sedimentarem a 27 graus Celsius por pelo menos 30 minutos. Prepare a diluição seriada do estoque de Avius.Deve-se realizar uma diluição em série em uma placa de 96 poços. Placa inferior usando 250 microlitros por poço. As diluições são feitas em meio SFM expresso cinco.Utilizando uma pipeta multicanal, transfira uma quantidade fixa, geralmente 20 microlitros de diferentes diluições, para as culturas celulares no incubador a 27 graus Celsius por sete dias para evitar a evaporação das fileiras das bordas. Envolva as bordas da placa com filme após sete dias. Verifique a placa e determine qual diluição do vírus produz 50% de infecção.Em seguida, utilize uma fórmula para calcular o título, que é expresso em PFU por ml. A fórmula é apresentada na maioria dos manuais de vírus belo. Após o tingimento, o vírus, uma quantidade necessária de vírus para infectar as células para a produção de proteína, a multiplicidade de infecção deve estar entre cinco e 10.Por exemplo, se o título do vírus belo de camundongo CD 1D for de cem milhões de unidades formadoras de placa por ml e tivermos 20 milhões de células por frasco, precisamos adicionar de um ml a dois ml do vírus belo para infectar as células. As células devem ser infectadas por quatro dias. No quarto dia após a infecção, as células devem estar destacadas, flutuando, inchadas e formando agregados semelhantes a salsichas.Agora é hora de recuperar o sobrenadante. Retire o meio do frasco infectado e transfira para frascos cónicos de 250 ml com tampa azul para centrífuga. Eles podem ser autoclavados e reutilizados.Encha os frascos uniformemente e envie-os para centrifugar as células com rotor GSA a 2000 RPM, durante 20 minutos a quatro graus Celsius. Colete o sobrenadante e prossiga com a purificação adicional. Acabei de mostrar como iniciar, cultivar e infectar as células de inseto High Five e titular o vírus baculoviral.Usando essas células, os aspectos mais importantes deste procedimento são como manter as células e como determinar o título exato dos baus. Uma vez que você tenha gerado os tremores de CD 1D, eles podem ser usados como uma ferramenta poderosa para análise de células T reativas a glicolipídios. Este procedimento para manipulação e tingimento do vírus balo pode ser utilizado também para muitas outras proteínas recombinantes.É isso aí. Obrigado por assistir e boa sorte com seus experimentos.

a-method-for-production-of-recombinant-mcd1d-protein-in-insect-cells

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Na era pós-genômica humana, a disponibilidade de proteínas recombinantes em conformações nativas é crucial para a investigação estrutural, funcional e terapêutico e desenvolvimento. Aqui, nós descrevemos um-teste e em grande escala sistema de expressão de proteínas em células humanas embrionárias de rim 293T que podem ser utilizados para produzir uma variedade de proteínas recombinantes.

A Plataforma de expressão adequada e geral para a produção de proteínas secretadas a partir de células humanas

Complexos proteína de catalisar as funções celulares importantes. Caracterização estrutural e funcional detalhada de muitos complexos essenciais exige a produção recombinante. MultiBac é um sistema de células de baculovirus / insecto particularmente adaptado para a expressão de proteínas eucarióticas e seus complexos. MultiBac foi implementado como uma plataforma de acesso aberto, e procedimentos operacionais padrão desenvolvidos para maximizar a sua utilidade.

A Plataforma de Produção de Proteína Complexo MultiBac no EMBL

Aqui, nós utilizamos a transdução retroviral e transfecção concatemeric para criar uma linha celular que possa expressar os componentes de um vector lentiviral (LV) na ausência de tetraciclina. Este LV codifica GFP e é pseudotipado com glicoproteína, SVGmu, que é específico para um receptor em células dendríticas.

Uma linha de células Tetraciclina-regulado Produz Vetores Lentivirus alta titulação que visam especificamente as células dendríticas

Kindlins são fundamentais para a adesão celular através de integrinas mas os estudos deles foram prejudicados pela dificuldade encontrada em expressá-las de forma recombinante em hospedeiros bacterianos. Descrevemos aqui métodos para a sua produção eficiente em células de insecto infectadas com baculovírus.

Produção eficiente e Purificação de recombinante murino Kindlin-3 a partir de células de insetos de Estudos biofísicos

Neste estudo, a expressão de uma proteína recombinante humana alvo em diferentes plataformas de produção foi comparada. Focamos em culturas tradicionais baseadas em fermentadores e em plantas, descrevendo a configuração de cada sistema e destacando, com base nos resultados relatados, os limites e vantagens inerentes a cada plataforma.

Uma análise comparativa de Expressão de proteínas recombinantes em Diferentes biofábricas: bactérias, células de insectos e Sistemas de Plantas

sistemas de expressão em células de insecto Nonlytic são pouco utilizados para a produção, o tráfico celular / localização, e a análise funcional da proteína recombinante. Aqui, nós descrevemos métodos para gerar vectores de express e subsequente expressão da proteína transiente em linhas de células de lepidópteros disponíveis comercialmente. A co-localizao de aquaporinas de Bemisia tabaci com proteínas marcadoras fluorescentes subcelulares também é apresentada.

Expressão transitória e Celular Localização de proteínas recombinantes em células de cultura de insectos

Nós relatamos usando uma artificial intrônicas pequeno RNA expressão estratégia para desenvolver um recombinante com defeito não Aedes aegypti densovirus (AaeDV) na vivo sistema de entrega. Um procedimento detalhado para a construção, embalagens e análise quantitativa dos vetores rAaeDV tão bem quanto a infecção larval é descrito.

Uso de um Mosquito recombinante Densovirus como um vetor de entrega do Gene para a análise funcional de Genes em larvas do Mosquito

Este protocolo descreve um calor induzida por choque proteína expressão (sistema pDHsp/V5-His/sf9 célula), que pode ser usado para expressar proteínas estranhas ou avaliando a atividade anti-apoptotic de potenciais proteínas estranhas e seus truncado amino ácidos em células de inseto.

Expressão transiente de estrangeiros Genes em células de inseto (sf9) para o ensaio funcional da proteína

Aqui, apresentamos um protocolo para produzir casa voar carboxylesterase proteínas em vitro com um sistema de expressão baculovirus mediada por células de inseto e mais tarde funcionalmente caracterizar seus papéis em metabolisante permetrina, desse modo, conferindo piretroide resistência por estudos baseados em células MTT ensaio e in vitro metabólica.

Caracterização funcional de Carboxylesterases em casa resistente a inseticida moscas, Musca Domestica

Aqui, apresentamos os protocolos para utilizando o inseto sistema expressão da proteína celular e baculovirus para produzir grandes quantidades de proteínas vegetais secretada por cristalização de proteínas. Um vetor de expressão de baculovirus foi modificado com GP67 ou inseto hemolin peptídeo sinal planta secreção na expressão de proteínas nas células de inseto.

Modificar vetores de expressão de Baculovirus para produzir secretado proteínas vegetais em células de inseto

O sistema vetorial de expressão baculovírus (BEVS) é uma plataforma robusta para triagem de expressão e produção de metiltransferases de arginina proteica (PRMTs) a serem utilizadas para estudos bioquímicos, biofísicos e estruturais. Quantidades de miligrama de material podem ser produzidas para a maioria dos PRMTs e outras proteínas de interesse que requerem uma plataforma de expressão eucariótica.

Produção de Proteínas PRMT Recombinantes utilizando o Sistema Vetorial de Expressão baculovírus

Aprenda a produzir proteína recombinante mCD1d em células de inseto High Five usando baculovírus. Este método permite gerar tetrâmeros essenciais para estudos de células NKT em imunologia.

Um método para produção de proteína recombinante em células de inseto mCD1d.

Explorar mais vídeos