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Avaliação da homeostase Dopaminergic em camundongos pelo uso de análise de cromatografia líquida ...
Avaliação da homeostase Dopaminergic em camundongos pelo uso de análise de cromatografia líquida ...
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JoVE Journal Neuroscience
Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

Avaliação da homeostase Dopaminergic em camundongos pelo uso de análise de cromatografia líquida de alta performance e captação da dopamina Synaptosomal

Full Text
13,052 Views
11:26 min
September 21, 2017

DOI: 10.3791/56093-v

Kathrine L. Jensen1, Annika H. Runegaard1, Pia Weikop2, Ulrik Gether1, Mattias Rickhag1

1Molecular Neuropharmacology and Genetics Laboratory, Lundbeck Foundation Center for Biomembranes in Nanomedicine, Department of Neuroscience and Pharmacology, Faculty of Health and Medical Sciences,University of Copenhagen, 2Laboratory of Neuropsychiatry, Psychiatric Center Copenhagen and Department of Neuroscience and Pharmacology,University of Copenhagen

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents two techniques to investigate dopamine homeostasis in mice: the assessment of dopamine transporter function through synaptosomal dopamine uptake and the analysis of dopamine levels in striatal tissue using high-performance liquid chromatography (HPLC). These methods allow for the evaluation of dopamine tissue content and transporter functionality, especially after in-vivo manipulations.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Dopamine Transporter Function
  • High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)

Background

  • Dopamine plays a crucial role in various neural functions.
  • The dopamine transporter is critical for dopamine reuptake and homeostasis.
  • Understanding dopamine dynamics can provide insights into neurological disorders.
  • HPLC is a reliable method for quantifying neurotransmitter levels.

Purpose of Study

  • To provide protocols for assessing dopamine transporter function.
  • To measure dopamine content in the striatum of mice.
  • To facilitate the understanding of dopamine homeostasis post-manipulation.

Methods Used

  • The study utilizes synaptosomal preparations and HPLC for analysis.
  • Mice serve as the biological model, particularly focusing on their striatal tissue.
  • The protocols can be executed following chemogenetic manipulations or drug treatments.
  • Detailed steps are provided for brain dissection, tissue preparation, and analysis.

Main Results

  • Both methods enable robust measurement of dopamine levels and transporter activity.
  • The study provides insights into the parameters of dopamine homeostasis in a controlled setting.

Conclusions

  • The protocols established in this study enhance the understanding of dopamine transport dynamics.
  • They enable researchers to assess the impact of various manipulations on dopamine neurotransmission.

Frequently Asked Questions

What advantages does synaptosomal preparation offer?
Synaptosomal preparation allows for the isolation of synaptic terminals, providing a focused assessment of neurotransmitter dynamics without interference from other cell components.
How are dopamine levels measured in the study?
Dopamine levels are quantified using high-performance liquid chromatography (HPLC), which allows for precise analysis of neurotransmitter concentrations in tissue samples.
What interventions can affect dopamine homeostasis?
The methods implemented can be applied following chemogenetic manipulations, drug treatments, or behavioral training, influencing dopamine transporter function and levels.
What is the role of the dopamine transporter?
The dopamine transporter regulates dopamine signaling by reabsorbing dopamine from the synaptic cleft, thus playing a crucial role in maintaining neurotransmitter homeostasis.
How can this study's methods be adapted?
The techniques can be adapted for various experimental manipulations and different neuronal pathways, facilitating broader applications in neuroscience research.

Absorção de dopamina synaptosomal e ferramentas experimentais de cromatografia líquida de alto desempenho análise representam para investigar a homeostase de dopamina em camundongos avaliando-se a função do transportador de dopamina e níveis de dopamina no tecido striatal, respectivamente. Aqui nós apresentamos protocolos para medir o teor de tecido de dopamina e avaliar a funcionalidade do transportador de dopamina.

Estamos introduzindo duas técnicas neste protocolo. O objetivo do primeiro é avaliar a função do transportador de dopamina medindo a captação de dopamina a partir de preparações sinaptossômicas. A segunda é para avaliar os níveis de dopamina no tecido por análise de HPLC.

Esses métodos fornecem parâmetros importantes da homeostase da dopamina, demonstrando como medir o conteúdo do tecido de dopamina e avaliar a funcionalidade do transportador de dopamina em camundongos. A principal vantagem dessas técnicas é que elas podem ser realizadas após manipulações in vivo, como manipulações quimiogenéticas, tratamentos medicamentosos in vivo ou treinamento comportamental dos animais. Demonstrando o procedimento de HPLC estará Pia Weikop, Professora Associada do Laboratório de Neuropsiquiatria.

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Neurociência edição 127 Striatum dopamina cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) captação de dopamina synaptosomal sinaptossomas homeostase de dopamina transportador de dopamina

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