Ensaio da atividade de DNA polimerase usando infravermelho fluorescente etiquetado DNA visualizado pela electroforese do Gel do acrilamido

O objetivo geral deste procedimento é analisar a atividade da DNA polimerase em um único nível de nucleotídeo. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da DNA polimerase, como quais etapas específicas da síntese de DNA são limitadas por modificações no DNA. A principal vantagem desta técnica é que você pode observar alterações de nucleotídeo único, permitindo a observação precisa da atividade da polimerase.

Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de planejar com antecedência. Muitas das etapas são sensíveis ao tempo. Para iniciar este procedimento, primeiro prepare os tampões, a mistura duplex de DNA e a diluição de proteínas, conforme descrito no protocolo de texto.