Estimulação do nervo cavernoso e gravação de pressão Intracavernous em um rato

Os objetivos gerais deste método são descrever uma técnica cirúrgica simplificada de canulação da cruz peniana para registro da pressão intracavernosa e a dissecção e isolamento do nervo cavernoso para eletroestimulação. Este protocolo experimental pode ser usado para estudar a fisiopatologia da disfunção erétil e testar novas terapias. A principal vantagem dessa técnica é que ela é reprodutível, rápida e confiável.

Ele abordou e eliminou as principais armadilhas descritas neste tutorial. Embora esse método possa fornecer informações sobre a disfunção erétil, o isolamento do complexo de eletrodos nervosos com cola de silicone biocompatível é aplicável à eletroestimulação de qualquer nervo periférico, permitindo testes fisiológicos de outros órgãos. Para iniciar este procedimento, após anestesiar o animal, raspe a metade inferior do abdômen e do períneo.

Esfregue o animal com álcool 70% e iodopovidona três vezes alternadamente. Depois disso, coloque o rato em uma almofada cirúrgica aquecida em decúbito dorsal. Aplique pomada nos olhos e mantenha o rato anestesiado através de um cone nasal com 2,5% de isoflurano.

Em seguida, execute todo o procedimento cirúrgico sob um microscópio cirúrgico em uma cortina. Em seguida, faça uma incisão na pele de um centímetro cinco mililitros lateral à linha média, começando no nível da base do pênis e estendendo-se para baixo. Use um cotonete para separar cuidadosamente a fáscia lateral ao escroto.

Depois de dissecar a fáscia, use um par de afastadores para puxar as bordas da pele e o testículo e localize a tuberosidade isquiática usando palpação com um cotonete. Dissecar através do tecido adiposo medialmente até que o músculo isquiocavernoso fique visível. Use uma pinça para separar o músculo longitudinalmente e expor a túnica albugínea.

A túnica albugínea aparecerá como uma estrutura branca brilhante. Após a calibração das configurações do sistema, insira o tubo através da pele do períneo, certificando-se de que ele corra paralelo à cruz peniana. Em seguida, deixe a linha no lugar e mantenha a incisão úmida com solução salina.

Neste procedimento, faça uma incisão abdominal na linha média inferior de dois centímetros através da pele. Crie uma incisão correspondente através da fáscia ao longo da linha alba para expor a bexiga e a próstata. Use os retratores para obter uma boa exposição.

Em seguida, use cotonetes com ponta de algodão para separar a próstata do tecido adiposo. Ajuste os afastadores e complete a dissecção até obter uma visualização clara do MPG e NC correndo na face dorsal lateral da próstata. Depois de localizar o GPM e o NC, faça uma incisão cuidadosa na fáscia que cobre o nervo de dois a cinco milímetros distais ao GPM.

Em seguida, espalhe o tecido em cada lado do nervo e embaixo dele para liberar uma porção de quatro milímetros de comprimento e, em seguida, deslize uma sutura sob o nervo. Eleve ligeiramente o nervo com a ajuda da sutura para facilitar a colocação dos ganchos do eletrodo bipolar ao redor do nervo. Deixe um assistente misturar a cola de silicone de dois componentes com a ponta de uma agulha de insulina por cinco segundos.

Seque o nervo e aplique a cola na área ao redor dos ganchos e do nervo. Mantenha o nervo elevado puxando levemente o eletrodo por aproximadamente um minuto para permitir que a cola seque. Em seguida, remova os retratores, exceto os retratores do lado direito, para evitar qualquer puxão ou torção do eletrodo.

Em seguida, molhe os órgãos expostos com solução salina e coloque gaze embebida em solução salina sobre a incisão. Neste procedimento, restaurar a visualização da túnica albugínea usando afastadores. Certifique-se de não prender os afastadores ao músculo isquiocavernoso, pois isso distorcerá a cruz.

Em seguida, conecte a agulha ao tubo PE50 e lave o tubo com solução salina heparinizada antes de introduzi-lo na túnica albugínea. Mantenha a túnica albugínea esticada e segure o músculo sobrejacente distal até o ponto de inserção com a mão dominante. Em seguida, segure a agulha em sua mão não dominante e introduza-a no corpo cavernoso.

Lave a linha para confirmar o posicionamento correto nos corpos cavernosos sem vazamento. A inserção da agulha no corpo cavernoso para registro de pressão constitui uma etapa crítica. Ao implantar a agulha na cruz, é importante que a cruz seja esticada e a agulha seja implantada paralelamente ao seu curso.

Lave o tubo e pressione o crus para testar a linha. Certifique-se de que não haja vazamentos. Depois disso, prenda o tubo à mesa com fita adesiva para evitar puxar acidentalmente a linha.

Em seguida, remova os retratores. Defina os parâmetros em um estimulador e aplique a estimulação por 50 segundos com um mínimo de um minuto de descanso entre as estimulações. Esta figura mostra uma primeira resposta diminuída com uma estimulação de 50 milímetros de mercúrio, que é seguida pela segunda e terceira estimulação de 66 milímetros de mercúrio.

Em seguida, as medições subsequentes foram registradas no nível normal de 73 milímetros de mercúrio. E aqui é mostrada a estabilidade dos resultados usando este protocolo com 10 estímulos consecutivos entre 75 e 78 milímetros de mercúrio. Esta figura mostra as doses efetivas de anestesia na pressão intracavernosa.

Observou-se uma resposta diminuída e mais flutuante ao aumento do isoflurano em comparação com a resposta estável em 2% nas duas primeiras e nas três últimas estimulações. O traço azul na parte superior mostra a pressão arterial principal constante. Esta figura mostra o efeito do tipo de anestesia na pressão intracavernosa.

As estimulações iniciais realizadas sob anestesia com isoflurano mostraram um aumento de pressão de 80 milímetros de mercúrio. Uma vez que o fentanil midazolam foi administrado, houve um aumento na resposta a 110 milímetros de mercúrio. Esta figura demonstra o efeito da administração de oxigênio através do cone nasal.

A interrupção da administração de oxigênio através do cone nasal resultou em uma redução significativa no aumento da pressão cavernosa com a estimulação do nervo cavernoso. Não foi observado efeito sobre a pressão arterial principal. Uma vez dominado e se executado corretamente, este procedimento pode ser concluído em 30 minutos.

Ao realizar as estimulações, é importante lembrar que tanto o tipo quanto o nível de anestesia e oxigenação têm um grande impacto na pressão intracavernosa. Após este procedimento, diferentes agentes podem ser testados para responder a perguntas relacionadas à fisiopatologia da disfunção erétil e introdução de novos tratamentos. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma compreensão completa de como realizar a estimulação do nervo da cânula, incluindo o isolamento do eletrocomplexo nervoso com cola de vedação e registro da pressão intracavernosa após dissecção minimamente invasiva e canulação das partes cavernosas.