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Célula única Microfluidic análise de Bacillus subtilis
Célula única Microfluidic análise de Bacillus subtilis
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JoVE Journal Biology
Single-cell Microfluidic Analysis of Bacillus subtilis

Célula única Microfluidic análise de Bacillus subtilis

Full Text
12,684 Views
10:37 min
January 26, 2018

DOI: 10.3791/56901-v

Matthew T. Cabeen1, Richard Losick2

1Department of Microbiology and Molecular Genetics,Oklahoma State University, 2Department of Molecular and Cellular Biology,Harvard University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Apresentamos um método de análise microfluidic de linhagens de células bacterianas individuais usando Bacillus subtilis como exemplo. O método supera deficiências dos métodos tradicionais de análise em microbiologia, permitindo a observação de centenas de gerações de células sob condições de crescimento firmemente controlável e uniforme.

O objetivo geral desta configuração experimental microfluídica é permitir a observação de longo prazo de células bacterianas individuais sob condições ambientais constantes e altamente controladas. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da fisiologia bacteriana, como quais são os padrões de resposta de longo prazo de células individuais ao estresse ou como um fenótipo heterogêneo em uma população varia com o tempo. A principal vantagem dessa técnica é que podemos observar linhagens celulares individuais por dezenas ou mesmo centenas de gerações, sob condições ambientais constantes, uniformes e altamente controladas.

Depois de preparar o polímero PDMS de acordo com o protocolo de texto, coloque um mestre de silicone em um pedaço de folha de alumínio intacta em uma placa de Petri de poliestireno. Despeje a mistura PDMS desgaseificada sobre o mestre a uma profundidade de aproximadamente cinco milímetros. Em seguida, desgaseifique o prato por pelo menos 10 minutos.

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