Um novo método para induzir um comportamento parecido com depressão em ratos

O objetivo geral deste modelo é estabelecer o contágio da depressão em ratos. Esse método pode ajudar a responder a questões-chave no campo comportamental, como mecanismo de ação, prevenção, contenção e tratamento da depressão contagiosa. A principal vantagem dessa técnica é que este é um novo modelo para estabelecer a depressão contagiosa.

As implicações dessa técnica se estendem à terapia da depressão porque, no momento, não existe um formato existente para estudar a depressão contagiosa. Para o procedimento experimental, selecione ratos Sprague Dawley machos sem patologia evidente, cada um pesando entre 300 e 350 gramas. Alojar três ratos por gaiola com ração e água disponíveis ad libitum.

Deixe um mínimo de duas semanas de adaptação em um ciclo de luz e escuridão de 12 horas. Antes do início do experimento, teste todos os ratos quanto à presença de comportamentos depressivos usando um teste de preferência por sacarose de três dias. Para fazer isso, coloque os ratos em gaiolas individuais na mesma sala que o alojamento durante o ciclo escuro.

Coloque um frasco de 100 mililitros de solução de sacarose a 1% em cada gaiola por 24 horas e permita a adaptação. Após 24 horas, retire as garrafas e prive os ratos de comida e água por 12 horas. Após 12 horas, coloque dois frascos, um contendo 100 mililitros de solução de sacarose a 1% e o outro 100 mililitros de água da torneira em cada gaiola por quatro horas.

Após quatro horas, registre o volume em mililitros sobre a solução de sacarose e a água consumidas e calcule a preferência de afinidade com a sacarose, conforme mostrado. Elimine os ratos que testam positivo para depressão e, em seguida, elimine os ratos que foram alojados nas mesmas gaiolas que os ratos deprimidos. Se necessário, exclua ratos adicionais aleatoriamente para criar os grupos finais.

Marque os ratos usando adesivos numerados. Para induzir a depressão, sujeite os 60 ratos do grupo exposto ao estresse crônico imprevisível a dois dos sete estressores a seguir. Em uma ordem aleatória por cinco semanas consecutivas, use um estressor durante o dia e outro à noite.

Aloje os ratos em grupos maiores, colocando seis ratos em vez dos três habituais por gaiola por 18 horas. Coloque os ratos em uma gaiola inclinada 45 graus ao longo do eixo vertical por três horas. A comida priva os ratos por 18 horas.

Prive os ratos de água por 18 horas, expondo-os a garrafas de água vazias após uma hora. Coloque os ratos em uma gaiola com cama molhada por oito horas durante o ciclo noturno. Exponha os ratos à iluminação contínua por 24 horas em um ciclo reverso claro-escuro duas vezes por semana.

Coloque os ratos em um ambiente quente a 40 graus Celsius por cinco minutos durante o ciclo noturno. Após a exposição aos dois estressores escolhidos, confirme o desenvolvimento da depressão realizando o teste de preferência por sacarose. Primeiro, coloque dois ratos expostos ao CUS por gaiola em 30 gaiolas diferentes.

Em seguida, adicione um rato do grupo de contágio da depressão a cada gaiola contendo dois ratos expostos ao CUS e permita a coabitação por cinco semanas em condições padrão. Após cinco semanas de coabitação, submeta todos os grupos aos testes de preferência por sacarose, campo aberto e nado forçado. Limpe o aparelho com álcool a 5% antes da introdução de cada animal.

Coloque o rato no canto do campo aberto de frente para a parede. Grave o comportamento do rato com uma câmera de vídeo por cinco minutos. Analise os registros posteriores da distância total de viagem, velocidade na parte central do campo e tempo gasto na parte central do campo.

Para habituação, coloque o rato em um cilindro de vidro contendo água em temperatura ambiente para uma sessão de natação de 15 minutos. Retire o rato do cilindro, seque com papel toalha e coloque em uma gaiola quente por 15 minutos antes de devolver o rato à gaiola doméstica. No dia seguinte, grave uma sessão de natação de cinco minutos e analise as gravações de imobilidade, escalada e defecação.

Depois de expor ratos a cinco semanas de CUS para indução de depressão e, em seguida, expor ratos saudáveis aos ratos expostos ao CUS por mais cinco semanas, ambos os conjuntos de ratos exibiram comportamentos depressivos no final, conforme mostrado pela preferência reduzida pela sacarose. No teste de campo aberto, os ratos nos grupos de contágio exposto ao CUS e à depressão diminuíram as distâncias totais de viagem e diminuíram as velocidades médias em comparação com o grupo controle. O tempo gasto no centro do campo aberto pelos ratos do grupo controle nos dois grupos experimentais não foi significativamente diferente.

Tanto os ratos expostos ao CUS quanto os de contágio por depressão mostraram imobilidade estendida após o teste de nado forçado. No entanto, um tempo de inatividade significativamente prolongado foi registrado apenas no grupo exposto ao USC quando comparado com o grupo controle. Em outro parâmetro investigado do teste de nado forçado, o tempo de escalada, ambos os grupos de ratos expostos ao CUS e depressão por contágio exibiram propriedades de escalada altamente limitadas quando comparados ao grupo controle.

A avaliação da taxa de defecação resultou no registro de grandes quantidades de fezes para ambos os grupos experimentais em comparação com o controle. Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de planejar com antecedência a rotação aleatória de estressores durante o modelo de estresse crônico imprevisível devido à sua alta demanda de trabalho manual. Após este procedimento, outros testes como labirinto em cruz elevado ou teste de espelho podem ser realizados para investigar melhor as mudanças comportamentais após a depressão.