Name: Um novo método para induzir um comportamento parecido com depressão em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-22T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 57 s
Description: Aprenda a induzir comportamentos depressivos em ratos Sprague Dawley através de coabitação com animais expostos a estresse crônico imprevisível. Este modelo inovador permite estudar mecanismos de transmissão da depressão.

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Os autores reconhecem com gratidão Dr. R. Bilyar, residente, departamento de urologia, Soroka Medical Center, por sua ajuda em laboratório, bem como a análise de vídeo. O apoio de Shira Ovadia, diretor da unidade de recursos Animal, é reconhecido também com gratidão. Muitos graças a r. Alir e para os funcionários da unidade de cuidados críticos, Soroka Medical Center pelo apoio e discussões úteis.

O procedimento a seguir foi realizado de acordo com as recomendações da declaração de Helsínquia e Tóquio e as orientações para o uso de animais experimentais da Comunidade Europeia. Os experimentos também foram aprovados pelo Comitê de cuidado Animal na Universidade Ben-Gurion do Negev.
1. ratos se preparando para o procedimento Experimental
Nota: Para o procedimento experimental, selecionados ratos Sprague-Dawley masculinos com nenhuma patologia evidente, cada um pesando entre 300 e 350 g.
<ol><li>Casa de três ratos por gaiola, com chow e água ad libitum, disponível e permitir pelo menos duas semanas de adaptação, alternando entre 12 h de luz e 12 horas de escuridão.</li>
	<li>Antes do início do experimento, todos os ratos para a presença de comportamentos depressivos, como usando um 3 dias de teste teste de preferência de sacarose (consulte a etapa 4).
</li>
	<li>Ratos de excluir que são percebidos exibir comportamentos como depressiva e aqueles que estão alojados em gaiolas mesmas como tal ratos, a fim de evitar a eventual propagação da depressão de ratos afetados antes do experimento começou em primeiro lugar, eliminam ratos que testam positivo para depressão; em seguida, elimine ratos que estão alojados em gaiolas mesmas como os ratos deprimidos.</li>
	<li>Se necessário, exclua ratos adicionais ao acaso para criar grupos de finais de 60 ratos para as experiências de depressão, 30 ratos para o grupo contágio e 30 ratsforthe grupo de controle.</li>
	<li>Marca de ratos (usando adesivos numerados), durante os procedimentos experimentais. Temporariamente transferir ratos para gaiolas única durante os experimentos (na mesma sala e ciclo escuro de CUS, sacarose e testes de campo aberto e em um quarto diferente e ciclo escuro para o teste de natação forçada e dentre os estressores (consulte 2.1.7)) e devolvê-los para o IV original grupos sociais no final.</li>
</ol>2. o procedimento para a indução de depressão em ratos
Nota: A fim de induzir depressão, submeta os 60 ratos no grupo de CUS-expostos a várias manipulações de CUS por cinco semanas20.
<ol><li>Expor os ratos diariamente para qualquer 2 dos seguintes 7 estressores, em uma ordem aleatória; para um fator de estresse durante o dia e para o outro à noite, durante 5 semanas consecutivas.<ol>
<li>Abrigar os ratos em grupos (seis ratos, em vez dos três habituais, por gaiola para 18 h);</li>
		<li>Coloque os ratos em uma gaiola inclinada (45° ao longo do eixo vertical para 3h);</li>
		<li>Privar os ratos de alimentos (18 h);</li>
		<li>Privar os ratos d'água (18 h) e expô-las a garrafas vazias de água imediatamente após um período de privação aguda de água (1 h);</li>
		<li>Coloque os ratos em uma gaiola de roupa de cama molhada (com 300 mL de água derramada no fundamento) para 8h (ciclo de noite);</li>
		<li>Expor os ratos a iluminação contínua (24h) e reverteu o ciclo claro/escuro (12 h), duas vezes por semana;</li>
		<li>Coloque os ratos em um ambiente quente (40° C, 5 min - ciclo de noite), com outro aparelho utilizado para aumentar o calor.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Confirmar o desenvolvimento de depressão, realizando uma teste de preferência de sacarose (consulte a etapa 4). Nota: O protocolo pode ser pausado após cada uma das etapas acima. Além disso, se qualquer comportamento aberrante é indicado por qualquer rato, em seguida, elimine o rato e qualquer outro rato que pode ter sido afetado pelo rato errático.</li>
</ol>3. o procedimento para o estabelecimento de depressão-contágio em ratos ingênuo
<ol><li>Estabelece 30 grupos sociais com ratos de CUS-expostos (60) e depressão-contágio (30):<ol>
<li>Casa dois CUS-expostos ratos por gaiola em 30 gaiolas diferentes.</li>
		<li>Adicione um rato do grupo contágio-depressão de cada gaiola contendo dois CUS - expostos ratos.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Permitem a coabitação por 5 semanas , em condições normais, com comida e água disponível ad libitum.</li>
	<li>Após 5 semanas de coabitação, assunto de todos os grupos para a preferência de sacarose, campo aberto e testes do nado forçado na ordem mostrada na Figura 1.</li>
</ol>4. a preferência de sacarose teste21
<ol><li>Durante o ciclo escuro, coloque os ratos em gaiolas individuais na mesma sala que a habitação.</li>
	<li>Coloque uma garrafa de 100 mL de solução de sacarose 1% (p/v) em cada gaiola para 24h e permitir a adaptação.</li>
	<li>Remover as garrafas e privar os ratos de comida e água para 12h.</li>
	<li>Coloque dois frascos, um contendo 100 mL de solução de sacarose (1%, p/v) e o outro, 100 mL de água da torneira, em cada gaiola para 4 h.</li>
	<li>Registrar o volume (em mL) da solução de sacarose consumida e água e calcular a afinidade com a preferência de sacarose como segue: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57137/57137eq1.jpg">
</li>
</ol>5. o teste de campo aberto
Nota: O teste de campo aberto padrão é comumente usado para avaliar locomotoras, exploratórios e ansiedade, como comportamentos e respostas comportamentais à novidade em animais de laboratório22, 23. Este teste também foi mostrado para analisar comportamentos depressivos24. O teste de campo aberto examina dois parâmetros opostos; medo dos roedores para a luz brilhante que brilha no centro do campo, contra sua vontade expressiva no sentido de novidade. Quando ansioso, roedores tendem a evitar a descoberta e ficamos quietos por paredes (thigmotaxis). Essa ansiedade é determinada pelo grau de evitar o campo central bem iluminado. O campo aberto, consistindo de uma caixa de acrílico rijos preta (120 × 60cm × 60 cm), é dividido em parte central (25%) e o resto da caixa (75%). Este teste tem lugar na mesma sala que a habitação durante o ciclo escuro. Uma câmera de vídeo, suspendida a cerca de 200 cm acima do campo, é usada para gravar o teste de campo aberto22, 23.
<ol><li>Limpe o aparelho com 5% de álcool antes da introdução de cada animal. Coloque o rato no canto do campo aberto, virado para a parede.</li>
	<li>Registre o comportamento do rato com uma câmera de vídeo por 5 min.</li>
	<li>Analisar pós-gravações dos seguintes parâmetros: distância total da viagem, a velocidade na parte central do campo e tempo gasto na parte central do campo.</li>
</ol>6. o teste de natação forçada
Nota: O princípio do teste de natação forçada é baseada no fato de que quando ratos são forçados a nadar em um espaço confinado, eles eventualmente desistir e permanecer imóveis, ocasionalmente, movendo seus corpos para evitar afogamento21, 23. Devido a enormidade do aparelho já montado, este teste foi realizado na sala diferente durante o ciclo escuro.
<ol><li>Para habituação, coloque o rato em um cilindro de vidro (40 cm de profundidade, 40 cm de diâmetro e 100 cm de altura) contendo água à temperatura ambiente, para uma sessão de natação de 15min.</li>
	<li>Remover o rato do cilindro, seco com toalhas de papel e coloque em uma gaiola quente por 15 min.</li>
	<li>O rato de retorno à sua casa gaiola (original); Nota: O protocolo pode ser pausado aqui. Além disso, se qualquer rato durante este teste está se afogando, retirá-lo imediatamente.</li>
	<li>No dia seguinte, filmar uma sessão de natação 5min e analisar pós-gravações dos seguintes parâmetros: imobilidade, escalada e defecação.</li>
</ol>

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<li>Lenze, E. J., Mulsant, B. H., Shear, M. K., Alexopoulos, G. S., Frank, E., Reynolds, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comorbidity+of+depression+and+anxiety+disorders+in+later+life%5BTitle%5D)+AND+%22Depress+Anxiety%22%5BJournal%5D)">Comorbidity of depression and anxiety disorders in later life.</a> Depress Anxiety. 14 (2), 86-93 (2001).</li>
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</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

De acordo com os resultados obtidos com a aplicação do presente protocolo, ratos saudáveis, como os seres humanos, foram afectados negativamente pela ratos deprimidos quando alojados juntos durante um período prolongado. Os contágio deprimidos ratos foram afetados por suas contrapartes já deprimidos após cinco semanas de coabitação, que estabelece um modelo de depressão-contágio de animais distintos pela primeira vez. Um estudo anterior com porcos também havia sugerido estatutos emocionais compartilhados entre porcos dep...

Testes efectuados nos últimos tempos têm sugerido que as doenças psiquiátricas poderiam ser facilmente se espalhar para indivíduos saudáveis através de de contágio1. Neste caso, ele é denominado o contágio social e é transmitido através de afeto, atitude ou comportamento. Isso requer apenas um indivíduo deprimido para interagir com um ou mais indivíduos saudáveis, facilitando a partilha de emoções. Relações sociais são, portanto, um componente muito importante do humor, como eles definem a transferência de emoções de um indivíduo para outro, por meio de mimetismo e "contágio emocional". Prazos para o contágio tenha efeito variar2, inevitavelmente, dependendo da gravidade da emoção e a força de resistência do destinatário.
As consequências significativas de contágio emocional garantiram que estudos feitos no passado principalmente focada nos aspectos negativos. O resultado dos efeitos negativos assegurada a depressão de contágio recebido enorme atenção, com estudos mostrando que a depressão de contágio aumenta a probabilidade de famílias e amigos de um indivíduo deprimido, exibindo comportamentos depressivos3 , 4 , 5 , 6.
Há razões pessoais e econômicas para combater a depressão. Comumente causa morbidade; e sua incidência de vida é entre 13,3 e 17,1% no Estados Unidos7. Os arquivos da Organização Mundial de saúde mostram que a depressão é a quarta na lista de doenças globais com enormes encargos, ocorrendo em pessoas de todos os sexos, idades, origens sociais e é igualmente capaz de causar problemas de saúde, impactando a capacidade de interagir com os outros8,9,10,11e causando excesso deficiência12,13. 850.000 vidas são estimadas para ser perdido ao suicídio depressivo cada ano14. Os pacientes são tipicamente prescritos medicamentos antidepressivos ou aconselhados a se submeter a terapia cognitivo-comportamental. Estes treatmentshelp, cerca de 60-80% dos pacientes. No entanto, lidar com a doença ainda constitui um grande problema; tratamento não está disponível para todos os pacientes deprimidos. Para aqueles que recebem tratamento, alguns sofrem efeitos colaterais, enquanto outros mal conformidade com diretrizes15. O número de pacientes resistentes ao tratamento é até cerca de 40%14. Com a depressão, a economia sofreu frequentemente sob a forma de tratamento caro, uma diminuição na força de trabalho e antecipadas16. Uma perda anual estimada de US $ 44 bilhões nos Estados Unidos é causada por depressão, respondendo por quase metade perda de produtividade17 do país. Tratamento caro requer atenção médica cuidadosa, que incorre em uma variedade de aumento dos custos médico e exige antecipação de resultados indesejáveis, bem como resposta pobre ao tratamento18.
Não tendo deparar com um modelo animal já comprovado para estudar o mecanismo de depressão-contágio, prevenção e tratamento, este protocolo animal hipotético foi usado pela primeira vez. Isso sugere que, através de coabitação com CUS-expostos ratos, ratos saudáveis tendem a expressar comportamentos depressivos. O principal objetivo deste experimento foi estabelecer um procedimento de laboratório que destaque a transferência da depressão, através de contágio, de ratos expostos CUS para saudáveis. Em seguida, os resultados foram avaliados para determinar se a depressão-contágio limitou-se apenas aos sintomas depressivos, ou se foi relacionada a outros transtornos do humor, tais como ansiedade. O objetivo do experimento é para se aproximar para melhor compreender o mecanismo de depressão-contágio na corrida para desenvolver novas abordagens terapêuticas19.

<table><tbody><tr><td>Gaiolas para ratos</td><td>Techniplast</td><td>2000P</td><td>Alojamento convencional para roedores. Foi usado para abrigar ratos durante todo o experimento</td></tr><tr><td>Água</td> <td>-</td><td></td> <td>Água da torneira comum usada durante o experimento em diferentes estágios</td></tr><tr><td>Purina Chow</td><td>Purina</td><td>5001</td><td>Ração de laboratório para roedores administrada a ratos, camundongos e hamster é uma nutrição de ciclo de vida que tem sido usada em pesquisas biomédicas por mais de 5 décadas. Fornecido a ratos ad libitum neste experimento</td></tr><tr><td>Garrafas</td><td>Techniplast</td><td>ACBT0262SU</td><td>garrafas de 150 ml cheias de 100 ml de água e 100 ml de solução de sacarose a 1% (p / v)</td></tr><tr><td>Caixa de perspex sem brilho preto</td> <td>-</td><td></td> <td>(120 cm e vezes; 60 cm e vezes; 60 cm), dividido em uma zona central de 25% e a zona de borda circundante</td></tr><tr><td>Câmera de vídeo</td><td>Canon</td><td>-</td><td>Câmera de vídeo digital para gravação de alta definição do comportamento do rato sob teste de campo aberto</td></tr><tr><td>Álcool</td><td>Farmácia</td> <td>-</td> <td>99% de álcool farmacêutico diluído a 5% e usado para lceaning a caixa de teste de campo aberto antes da introdução de cada rato</td></tr><tr><td>Cilindro de vidro</td> <td>-</td><td></td> <td>100 cm de altura, 40 cm de diâmetro e 40 cm de profundidade usado para realizar o teste de natação forçada</td></tr><tr><td>Toalhas de papel</td><td>Farmácia</td><td>-</td><td>Toalhas secas usadas para manter os ratos secos depois de mergulhá-los na água</td></tr><tr><td>Marcadores em negrito</td> <td>-</td><td></td> <td>Marcadores comuns em negrito usados para rotular ratos</td></tr></tbody></table>

um novo método para induzir um comportamento parecido com depressão em ratos

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

Contagiosa, a depressão é um fenômeno que ainda está para ser totalmente reconhecida e isto decorre de material insuficiente sobre o assunto. No momento, não há nenhum formato existente para estudar o mecanismo de ação, prevenção, contenção e tratamento da depressão contagiosa. O propósito deste estudo, portanto, era estabelecer o primeiro modelo animal de depressão contagiosa.
Comportamentos depressivos ratos saudáveis podem contrair e se exposto a ratos deprimidos. Depressão é induzida em ratos, submetendo-os a várias manipulações de estresse crônico imprevisível (CUS) durante 5 semanas, conforme descrito no protocolo. Um teste de preferência bem sucedida sacarose confirmou o desenvolvimento de depressão nos ratos. Os ratos expostos CUS então estavam presos com ratos ingênuo do grupo contágio (1 ingênuo rato/2 deprimido ratos em uma gaiola) para um adicional de 5 semanas. 30 grupos sociais foram criados a partir da combinação de CUS-expostos ratos e ratos ingênuos.
Este protocolo proposto depressão-contágio em animais consiste principalmente em ratos expostos CUS e saudáveis em coabitação por 5 semanas. Para garantir que este método funciona, uma série de testes são realizados - primeiro, o teste de preferência de sacarose após indução de depressão com ratos, em seguida, a preferência de sacarose, teste, ao lado do campo aberto e testes de natação forçada no final do período de coabitação. Durante todo o experimento, ratos são dadas etiquetas e sempre são retornados para suas gaiolas após cada teste.
Algumas limitações para este método são as fracas diferenças registadas entre o experimental e controlar grupos no teste de preferência a sacarose e o resultado traumático irreversível do teste de natação forçada. Estes podem ser vale a pena considerar para adequação antes de qualquer aplicação futura do protocolo. No entanto, após o experimento, ratos ingênuos desenvolveram depressão contágio após 5 semanas de partilha a mesma jaula com os ratos de CUS-expostos.

o teste de preferência de sacarose: Depois expondo ratos de 5 semanas de CUS para indução de depressão e então subsequentemente expondo ratos saudáveis aos ratos expostos CUS 5 semanas, os dois conjuntos de ratos exibido depressiva, como behaviorsat o final do experimento (Figura 2). A evidência desse comportamento foi vista na preferência reduzida para sacarose pelos ratos deprimidos, depois CUS (65 ± 2,8%, p &lt; 0,001, Figura 2), quando compa...

Este protocolo descreve um novo modelo pelo qual ratos saudáveis podem contrair depressão durante um determinado tempo periodthrough contágio pela exposição a crônica imprevisível salientou ratos (CUS).

Um novo método para induzir um comportamento parecido com depressão em ratos

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

O objetivo geral deste modelo é estabelecer o contágio da depressão em ratos. Esse método pode ajudar a responder a questões-chave no campo comportamental, como mecanismo de ação, prevenção, contenção e tratamento da depressão contagiosa. A principal vantagem dessa técnica é que este é um novo modelo para estabelecer a depressão contagiosa.As implicações dessa técnica se estendem à terapia da depressão porque, no momento, não existe um formato existente para estudar a depressão contagiosa. Para o procedimento experimental, selecione ratos Sprague Dawley machos sem patologia evidente, cada um pesando entre 300 e 350 gramas. Alojar três ratos por gaiola com ração e água disponíveis ad libitum.Deixe um mínimo de duas semanas de adaptação em um ciclo de luz e escuridão de 12 horas. Antes do início do experimento, teste todos os ratos quanto à presença de comportamentos depressivos usando um teste de preferência por sacarose de três dias. Para fazer isso, coloque os ratos em gaiolas individuais na mesma sala que o alojamento durante o ciclo escuro.Coloque um frasco de 100 mililitros de solução de sacarose a 1% em cada gaiola por 24 horas e permita a adaptação. Após 24 horas, retire as g

a-new-method-for-inducing-a-depression-like-behavior-in-rats

Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

Este vídeo demonstra o método de indução de estresse crônico em um camundongo por meio de imobilização repetida, levando à liberação de corticosterona e redução da atividade do receptor de glutamato nos neurônios, o que resulta em comportamento semelhante à depressão.

Induzindo comportamento semelhante à depressão em um camundongo por meio do estresse de imobilização

Fonte: Rich, M. T., et al. Usando optogenética para reverter a neuroplasticidade e inibir a busca de cocaína em ratos. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra o uso da optogenética para induzir depressão de longo prazo (LTD) nas sinapses do núcleo geniculado medial para a amígdala lateral (MGN-LA), enfraquecendo o comportamento de busca de narcóticos induzido por sugestão em um modelo de rato. O rato, implantado cirurgicamente com fibras ópticas e transduzido viralmente para expressar canais...

Indução optogenética de depressão de longo prazo para suprimir o comportamento de busca de narcóticos em ratos

Este protocolo descreve o teste de nado forçado, que é usado para o estudo do comportamento depressivo em roedores. Este procedimento envolve colocar um animal em um recipiente cheio de água que eventualmente levará à exibição de comportamento de imobilidade, que é considerado um reflexo do desespero comportamental.

O Teste de Natação Forçada como um modelo de Depressive-like Comportamento

Aqui nós apresentamos o protocolo imprevisíveis stress leve crônica em ratos. Este protocolo induz um fenótipo de depressivo, como a longo prazo e permite avaliar a eficácia dos antidepressivos putativos em reverter os défices de depressiva como comportamentais e neuromolecular.

O protocolo de estresse suave crônico imprevisível para induzir Anhedonia em ratos

Aqui nós apresentamos um protocolo para induzir a depressão do borne-curso nos ratos obstruindo a artéria cerebral média através da artéria carotídea interna. Utilizamos o teste de nadada forçada de Porsolt e o teste de preferência de sacarose para confirmar e avaliar o humor depressivo induzido.

Uma técnica de oclusão da artéria cerebral média para induzir A depressão pós-AVC em ratos

Este artigo fornece um protocolo simplificado e estandardizado para a indução do comportamento depressivo-como em ratos cronicamente imobilizados usando um restringidor. Além disso, explicam-se comportamentos e técnicas fisiológicas para verificar a indução da depressão.

Um protocolo de estresse de imobilização crônica para induzir o comportamento semelhante à depressão em camundongos

Apresentado aqui é um protocolo para estudar o comportamento anedônico e depressão em ratos. Combina dois métodos comportamentais bem estabelecidos, a preferência por sacarose e testes de hipofagia induzidos por novidades, com um sistema automatizado de monitoramento de consumo alimentar e líquido, para investigar indiretamente o comportamento dos roedores usando parâmetros substitutos.

Preferência por sacarose e testes de hipofagia induzidos por novidades em ratos usando um sistema automatizado de monitoramento da ingestão de alimentos

Este protocolo descreve um método de examinar a hierarquia social em um modelo de rato. Os ratos realizam uma complexa tarefa de mergulho por comida na qual formam uma hierarquia distinta de acordo com sua vontade de mergulhar debaixo d'água e nadar para obter uma pelota de comida. Este método é utilizado para compreender a tomada de decisão e as relações sociais entre animais altamente sociais em pequenos grupos.

Uma complexa tarefa de mergulho por comida para investigar organização social e interações em ratos

Este artigo aborda os procedimentos para induzir respostas ao estresse usando o estresse de contenção física em camundongos e ratos. Considerações adicionais que devem ser observadas ao selecionar e usar o estresse de contenção em modelos de roedores são discutidas.

Contenção para induzir estresse em camundongos e ratos

Este artigo apresenta um protocolo para a indução de um modelo único de transtorno bipolar em ratos que captura tanto o comportamento semelhante à mania quanto o depressivo.

Desenvolvendo um modelo de rato para transtorno bipolar

Aqui, apresentamos um protocolo de teste de preferência olfativa que permite a avaliação de vieses olfativos negativos em relação a estímulos de odor apetitivos e aversivos em modelos de depressão em camundongos.

Um teste de preferência olfativa para medir vieses hedônicos olfativos em modelos de depressão em camundongos

Aprenda a induzir comportamentos depressivos em ratos Sprague Dawley através de coabitação com animais expostos a estresse crônico imprevisível. Este modelo inovador permite estudar mecanismos de transmissão da depressão.

Um novo método para induzir um comportamento parecido com depressão em ratos

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