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DOI: 10.3791/57322-v
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Este protocolo permite que o leitor a analisar a formação de biofilme induzida por sais biliares em patógenos entéricos, usando uma abordagem multifacetada para capturar a natureza dinâmica dos biofilmes bacterianos avaliando aderência, formação de matriz extracelular de substâncias poliméricas, e dispersão.
O objetivo geral deste protocolo de formação e avaliação de biofilme é determinar a capacidade dos patógenos bacterianos entéricos de formar um biofilme, especialmente em condições que imitam o trânsito gastrointestinal e a exposição a sais biliares. Os métodos podem ajudar a responder a questões-chave no campo da patogênese bacteriana, como a capacidade dos patógenos entéricos de sobreviver às duras condições de sais biliares do trato gastrointestinal. A principal vantagem das técnicas é que os resultados combinados dos três ensaios suportam a caracterização aprofundada da formação de biofilme em resposta à exposição a sais biliares para cada patógeno.
Primeiro tivemos a ideia dos métodos combinados, dada a necessidade de quantificar totalmente a formação de biofilme induzida por sais biliares em Shigella flexneri. Geralmente, os indivíduos novos neste método terão dificuldades porque aspectos do ensaio podem limitar a reprodutibilidade. Portanto, preste atenção às etapas críticas, para garantir a reprodutibilidade.
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