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Definição da atividade de chaperona regulada por redox de Hsp33 e mapeamento de alterações confor...
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Defining Hsp33’s Redox-regulated Chaperone Activity and Mapping Conformational Changes on Hsp33 Using Hydrogen-deuterium Exchange Mass Spectrometry

Definição da atividade de chaperona regulada por redox de Hsp33 e mapeamento de alterações conformacionais em Hsp33 usando espectrometria de massa de troca de hidrogênio-deutério

Full Text
9,222 Views
10:24 min
June 7, 2018

DOI: 10.3791/57806-v

Rosi Fassler*1, Nufar Edinger*1, Oded Rimon1, Dana Reichmann1

1Department of Biological Chemistry, The Alexander Silberman Institute of Life Sciences, Safra Campus Givat Ram,The Hebrew University of Jerusalem

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Dentre as mais adversas condições de stress que organismos encontram durante seu ciclo de vida envolve o acúmulo de oxidantes. Durante o estresse oxidativo, células dependem fortemente de chaperones moleculares. Aqui, apresentamos os métodos usados para investigar redox-regulado antiatividade agregação, bem como para acompanhar mudanças estruturais que regulam a função de acompanhante usando HDX-MS.

O fluxo de trabalho apresentado aqui pode ajudar a ampliar nossa compreensão do papel celular das chaperonas durante condições de estresse oxidativo. Especificamente, pode ajudar a entender como as chaperonas impedem a agregação de proteínas durante as condições de desdobramento. Para essas duas costas, técnicas diferentes fornecem informações sobre a atividade de acompanhantes segregados por bandeiras.

Também pode ser usado para estudar outras proteínas para interação, como interações sociais enzimáticas e dinâmica de proteínas. A demonstração visual desse método é fundamental, pois envolve o uso de diferentes instrumentos que podem ser desafiadores para novos usuários. Primeiro, gire uma amostra de proteína previamente descongelada para remover agregados.

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Bioquímica edição 136 acompanhantes acompanhante redox-regulado Hsp33 ATP independente acompanhante agregação de proteínas intercâmbio de hidrogênio-deutério HDX-MS cinética de agregação de proteínas e análise oxidação de proteínas e redução.

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