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DOI: 10.3791/57936-v
Ofir Klein1, Amit Roded1, Koret Hirschberg2, Mitsunori Fukuda3, Stephen J. Galli4, Ronit Sagi-Eisenberg1
1Department of Cell and Developmental Biology, Sackler Faculty of Medicine,Tel Aviv University, 2Department of Pathology, Sackler Faculty of Medicine,Tel Aviv University, 3Laboratory of Membrane Trafficking Mechanisms, Department of Developmental Biology and Neurosciences, Graduate School of Life Sciences,Tohoku University, 4Departments of Pathology and of Microbiology and Immunology and Sean N. Parker Center for Allergy and Asthma Research, School of Medicine,Stanford University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aqui detalhamos um método para a imagem latente de célula viva de exocitose regulada. Este método utiliza FITC-dextrano, que acumula em organelas lisossoma-relacionados, como repórter. Este método simples também permite distinguir entre diferentes modos de exocitose regulada em células que são difíceis de manipular geneticamente.
Este método pode ajudar a responder a questões-chave na pesquisa de exocitose regulada, permitindo que os pesquisadores distingam entre os diferentes modos de exocitose na célula viva. A principal vantagem dessa técnica é que ela é simples e requer perturbação mínima nas células. Embora esse método possa fornecer informações sobre a exocitose de mastócitos, ele também pode ser aplicado a outras células secretoras, como neutrófilos e eosinófilos.
Para começar, prepare uma solução estoque de tampão de Tyrode 20x de acordo com o protocolo de texto. Em seguida, misture três miligramas de pó de FITC-dextrano com três mililitros de meio de cultura. Filtrar o FITC-dextan dissolvido com uma seringa de acetato de celulose.
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