Medição de ativa e passiva domesticidade separadamente em ratos

Este método pode avaliar o nível de mansidão em cada camundongo, e os dados serão muito úteis para estudos futuros de mansidão, como mapeamento genético de genes relacionados à mansidão. A principal vantagem dessa técnica é que ela pode avaliar dois componentes principais da mansidão: mansidão ativa e passiva, separadamente, usando esse método. Demonstrando o procedimento estarão o Sr. Hiromichi Nagayama, um estudante de pós-graduação, e a Sra. Motoko Nihei, uma técnica do meu laboratório.

Para começar, ligue a câmera digital e inicie a gravação. Em seguida, use uma pinça grande para pegar suavemente o rato pela cauda. Transfira o mouse de sua gaiola inicial para o centro do aparelho de campo aberto.

Depois de iniciar o cronômetro, coloque a mão no canto inferior esquerdo do aparelho. Com a palma da mão voltada para cima, mexa os dedos, lenta e firmemente. Lentamente, mova a mão em direção ao mouse e pare a 10 centímetros de distância da lateral do corpo do mouse.

Mantenha essa distância se o mouse tentar se afastar. Se o mouse se aproximar da mão, mantenha a mão na mesma posição e continue a mover os dedos lenta e firmemente. Remova o mouse com a mão livre se ele tentar subir no braço.

Após um minuto, conclua o teste. Depois de posicionar o mouse no aparelho, coloque a mão esquerda no aparelho. Em seguida, mova lenta e firmemente a mão em direção ao mouse e toque suavemente no mouse com as pontas dos dedos.

Continue a tocar o mouse com as pontas dos dedos até que ele se afaste. Quando o mouse tentar interromper o contato, siga-o com a mão e reinicie o contato. Concluir o ensaio após um minuto.

Imediatamente após a conclusão do teste anterior, use uma pinça grande para levantar o mouse pela cauda e coloque-o suavemente na palma da mão esquerda. Acaricie o mouse suavemente com o polegar esquerdo, até que ele saia da mão. Em seguida, coloque o mouse de volta na palma da mão com a pinça.

Após a terceira tentativa, pare a gravação de vídeo e pese o mouse. Depois de retornar o camundongo à sua gaiola de origem, registre a quantidade de fezes e urina deixadas no campo aberto do aparelho. Em seguida, limpe o aparelho e as luvas com uma toalha de papel embebida em desinfetante de iodóforo 0.2% e limpe o aparelho com a toalha de papel seca.

Depois de atribuir chaves para cada índice de comportamento, inicie o software tanaMove. Em seguida, arraste e solte o arquivo de vídeo a ser analisado na janela. Confirme se o arquivo está carregado e se as informações no arquivo de dados.

csv está correta. Clique no botão Pronto e insira as chaves atribuídas para cada índice de comportamento na janela subsequente. Em seguida, clique no botão Reproduzir para iniciar o arquivo de vídeo e Pare para pausá-lo.

Pressione A quando o mouse for observado indo em direção ou se aproximando da mão. Pressione R quando o mouse for observado se locomovendo sem se dirigir à mão durante o Teste de Tameness Ativo. Pressione e segure W quando o som do timer for ouvido em 60 segundos para marcar o fim do Teste de Tameness Ativo.

Quando a mão esquerda entrar no quadro, inicie a análise para o Teste de Domesticação Passiva. Pressione A quando o mouse for observado indo em direção à mão e R quando o mouse for observado viajando sem ir em direção à mão. Em seguida, pressione e segure W quando o som do timer for ouvido em 60 segundos.

Inicie a análise de domesticação passiva quando a mão esquerda for observada entrando no quadro. Enquanto o vídeo é reproduzido, pressione A quando o mouse for observado se aproximando da mão e R quando o mouse for observado se movendo sem ir em direção à mão. Mais uma vez, pressione W quando o cronômetro for ouvido em 60 segundos.

Depois disso, pressione T toda vez que o mouse permanecer na mão durante o teste. Após o término do teste, clique em Parar. Em seguida, clique no botão Voltar para ativar uma nova janela e insira um novo nome de arquivo para a entrada de dados CSV.

Em seguida, clique no botão Pronto e insira as chaves apropriadas na nova janela. Em seguida, clique no botão Reproduzir para reiniciar o vídeo e iniciar a análise do Teste de Mansidão Ativa. Enquanto o vídeo é reproduzido, pressione T sempre que o mouse entrar em contato com o manipulador voluntariamente.

Quando o cronômetro soar em 60 segundos, pressione e segure W.Durante o Teste de Dominabilidade Passiva, pressione T quando o mouse permitir que o manipulador toque seu corpo. Em seguida, pressione e segure W quando o cronômetro soar após 60 segundos. Depois disso, clique no botão Parar e, em seguida, no botão Voltar antes de inserir um nome de arquivo para a saída de dados CSV.

Em seguida, clique no botão Pronto para ativar uma nova janela para inserir as teclas atribuídas. Em seguida, clique em Reproduzir para iniciar o Teste de Mansidão Ativo. Quando o mouse for observado pulando, pressione J.Em seguida, pressione W quando o cronômetro soar após 60 segundos.

Clique no botão Parar para interromper a observação do vídeo e o cronômetro soará novamente em 60 segundos. Em seguida, clique no botão Voltar e insira um nome de arquivo para a saída de dados CSV. Em seguida, salve todos os arquivos de dados brutos na pasta que contém os dois arquivos suplementares.

Abra o arquivo de dois suplementares e clique no botão Resumir. Por fim, salve os resultados como um arquivo separado para análises posteriores. Usando reprodução seletiva, camundongos com alto nível de domesticação ativa foram produzidos.

Os camundongos dos grupos de reprodução seletiva pontuaram mais alto no Teste de Dominância Ativa, exibindo durações mais longas de contato com a mão humana do que os camundongos controle. Os camundongos dos dois grupos não diferiram significativamente no rumo, locomoção ou duração do salto. No entanto, os camundongos selecionados obtiveram pontuação mais alta no Teste de Mansidão Passiva.

Além disso, os camundongos selecionados permaneceram na mão humana por muito mais tempo do que os camundongos de controle no teste de permanência na mão. Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de evitar o manuseio dos camundongos até realizar o teste de mansidão, pois a experiência de manuseio pode afetar significativamente a mansidão de cada camundongo.