Medição de temperatura de corpo do mouse usando o termômetro infravermelho durante passiva anafilaxia sistêmica e avaliação de alergia alimentar

Essa metodologia ajuda a abordar questões-chave no campo da alergia e da imunologia, especificamente aquelas que se referem a fenótipos que podem estar associados a mudanças de temperatura corporal. As principais vantagens dessa técnica são que ela é barata, não invasiva e não requer anestesia. As implicações desta técnica permitem aos pesquisadores reduzir o estresse e a dor dos camundongos durante a medição da temperatura, eliminando os efeitos da anestesia e/ou visualizar fenótipos comportamentais.

Para medir a temperatura do corpo do camundongo após a anestesia, confirme a sedação por taxa respiratória ou imobilidade e segure o rato pela nuca com um dedo indicador e polegar e a cauda com um dedo mindinho. Enquanto segura o mouse paralela à superfície do banco de laboratório, coloque um sensor de termômetro infravermelho abaixo do abdômen inferior com a superfície plana externa do termômetro de dois a cinco milímetros de distância da superfície do abdômen entre os dois mamilos superiores. Em seguida, pressione o gatilho do termômetro para medir a temperatura do animal, tomando o cuidado de manter o rato e o termômetro estável.

Para medir a temperatura do corpo do rato sem anestésico, pegue o rato no meio da cauda e exponha o abdômen. Deixe o mouse segurar em uma superfície de borda reta com suas prevassões e segure o gatilho para medir a temperatura. Alternativamente, deixe o mouse segurar a borda superior reta do termômetro e fazer com que o mouse se sente na superfície plana externa do termômetro com seu abdômen logo acima do sensor infravermelho durante a medição da temperatura.

Para uma sensibilização de anafilaxia sistêmica passiva use uma seringa de um mililitro equipada com uma agulha de calibre 26 para injetar 200 microliters de anti-Dinitrophenol recém-preparado, ou DNP, IgE em PBS, no peritônio de cada animal receptor apenas lateral para a linha média entre os mamilos mais inferiores e o segundo mais inferiores. 24 horas após a injeção, meça a temperatura corporal de cada animal receptor como demonstrado, e carregue uma seringa de um mililitro equipada com uma agulha de calibre 30 com 100 microliters de albumina de soro humano DNP recém-preparada. Para induzir a anafilaxia sistêmica passiva, insira a agulha no lado medial do olho em um ângulo raso visando atrás do olho, e injete todo o volume da solução intravenosamente no seio venoso retro-orbital.

Em seguida, coloque o mouse sozinho em uma gaiola de recuperação com monitoramento até a recumbência total, e meça a temperatura e a atividade do corpo a cada 10 minutos durante 70 minutos. Camundongos sensibilizados pelo IgE demonstram uma queda de temperatura máxima de três graus Celsius em 20 minutos, enquanto os camundongos de controle pbs exibem uma queda máxima de 1,1 graus Celsius no mesmo período de tempo após o desafio. Observações comportamentais também podem ser realizadas em animais não anestesiados para avaliar a relação entre as quedas de temperatura observadas e a atividade do camundongo.

Neste desafio representativo de alergia alimentar ao camundongo, o grupo controle da PBS demonstrou uma queda significativa de temperatura 10 minutos após o desafio em comparação com o grupo tratado inibidor de 2CA. A avaliação dos escores de atividade e quedas de temperatura desse desafio de alergia alimentar revelou uma correlação estatisticamente significativa entre os dois conjuntos de dados. Após este procedimento, outros experimentos envolvendo medidas de temperatura corporal do rato podem ser realizados para responder a perguntas adicionais sobre fenótipos comportamentais que estão associados à mudança de temperatura corporal.