Name: Estenose Atrial Esquerdo induzida Arterialization venoso pulmonar e hipertensão pulmonar do grupo 2 no rato (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: Aprenda a técnica cirúrgica de estenose atrial esquerda em ratos para estudar hipertensão pulmonar do grupo 2. Este modelo induz arterialização venosa pulmonar e fornece insights sobre mecanismos fisiopatológicos.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Os autores reconhecem a sociedade Mitacs-Japão para a promoção da ciência (JSPS) programa de verão. Ping Yu Xiong foi suportado pelo financiamento do programa de Verão de Mitacs-JSPS para visitar o Jikei University School of Medicine. Dr. Minamisawa é suportado em parte pelo Ministério da educação, cultura, esportes, ciência e tecnologia do Japão (S.M.), o programa de MEXT-Supported para a Fundação de pesquisa estratégica em particular as universidades (S.M.), o veículo de corrida comemorativa Fundação (S.M.) e The Jikei University Graduate pesquisa fundo (S.M.) com apoio financeiro para este projeto. Dr. Archer é suportado em parte pelos E.U. National Institutes of Health (NIH) bolsas NIH 1R01HL113003-01A1 (fevereiro) e NIH 2R01HL071115-08 (fevereiro), a Fundação do Canadá para a inovação, Tier 1 Canadá cadeira de pesquisa em dinâmica mitocondrial e Translational Medicina (fevereiro), a Fundação William J. Henderson, a canadense rede Vascular e unidade cardiopulmonar da Rainha (QCPU).
Os autores reconhecem o Sr. Tadashi Kokubo, chefe de serviços fotográficos do centro de informações acadêmicas no Jikei University School of Medicine, para filmar o vídeo.

O protocolo experimental de LAS foi aprovado pelo Jikei University escola de medicina Animal conta Comité e a pesquisa universitária e o Comitê de ética (protocolo #2015-118).
1. pré-operatório preparação
<ol><li>Depois de chegar à instalação de animais, fornecem ratos Sprague Dawley masculinos de 5 semanas entre 150 a 200 g com 1 semana se adaptar à sua nova casa antes da operação.</li>
	<li>Preparar os seguintes equipamentos antes da cirurgia em autoclave: 1) é um pequeno animal respirador 2) uma máquina de anestésica, 3) um kit de intubação (composto por um par de pinças pinça hemostática, abaixador de língua e um angiocatheter de 18g), instrumentos 4) cirúrgicos (que incluem um par de pinças curvas, um par de pinças reta, um condutor de agulha, um afastador de tórax, um par de tesouras, uma sutura de monofilamento de 5-0, um aplicador de clip, clipes de médio-grande e um tubo de 23 G).</li>
	<li>Tenho estéril cotonetes e gaze pronto para lidar com sangramento.</li>
	<li>Use uma almofada de aquecimento para manter a temperatura do corpo animal em torno de 37 ° C durante a cirurgia.</li>
</ol>2. anestesia e intubação endotraqueal
<ol><li>Anestesia o rato em uma câmara de indução com 5% de isoflurano misturado com o ar do quarto de 2 L/min.</li>
	<li>Antes da intubação, raspar os pelos do peito do rato com um barbeador cabelo e aplicar o creme depilatório para remover pelos finos.</li>
	<li>Verifica o reflexo de pedal para confirmar o sucesso anestesia antes da intubação.</li>
	<li>Ligar os dentes da frente com uma sequência de caracteres e fixar a sequência com dois pinos.</li>
	<li>Abra a boca do rato com o fórceps hemostático e insira o abaixador de língua na boca.</li>
	<li>Levante o abaixador de língua para visualizar as cordas vocais. Nota: É útil brilhar uma luz forte sobre a região da cabeça do rato para ajudar a visualizar as cordas vocais.</li>
	<li>Inserir o angiocatheter de 18 G como um tubo endotraqueal na traqueia e em seguida, rapidamente, se conectar o cateter para o respirador.</li>
	<li>Defina o volume corrente de 10 µ l por grama, com uma frequência respiratória de 100 respirações por minuto.</li>
	<li>Manter a anestesia com isoflurano 2% misturado com o ar do quarto de 2 L/min.</li>
</ol>3. preparação do local cirúrgico
<ol><li>Prepare o local cirúrgico com a alternância de esfoliantes de clorexidina e álcool x3.</li>
	<li>Dar a buprenorfina 0,01 mg/kg por via subcutânea.</li>
	<li>Cobrir o rato com um pano estéril.</li>
	<li>Verifica o reflexo de pedal para confirmar uma intubação bem sucedida e a manutenção da anestesia.</li>
</ol>4. esquerdo estenose Atrial cirurgia
<ol><li>Marca o local da incisão de 2 cm abaixo da axila esquerda do rato com uma regra.</li>
	<li>Faça um cm 2 deixou a incisão de parede lateral no peito com uma tesoura.</li>
	<li>Separe os músculos intercostais entre a quarta e a quinta costela, usando o reto e a pinça curvada, até entrar na cavidade do peito.</li>
	<li>Inserir o afastador de tórax na cavidade torácica. Continue a usar a pinça de reta e curva para separar o músculo intercostal para obter uma visualização directa do Timo e o coração.</li>
	<li>Levante o Timo com um par de pinças reta. Remova o Timo cobrindo o coração com um par de tesouras. Evite cortar ou picar em quaisquer vasos sanguíneos.</li>
	<li>Passe cuidadosamente uma sutura de monofilamento de 5-0 através da superfície do ventrículo esquerdo, logo abaixo do apêndice atrial esquerdo. Evite passar a agulha através das artérias coronárias principais.</li>
	<li>Após a sutura está no lugar e não há nenhum sangramento significativo, um nó solto.</li>
	<li>Puxe o fio de sutura e para frente para levantar o coração fora do peito.</li>
	<li>Uma vez que o coração é levantado fora do peito, aplica rapidamente um clipe de médio-grande para o átrio esquerdo, logo acima da válvula mitral. Nota: O clipe é meio fechado, com a ponta do clipe beliscar o átrio esquerdo, causando estenose atrial esquerdo.</li>
	<li>Rapidamente colocar o coração no peito. Certifique-se de coração não é fora do peito por mais de 30 s.</li>
	<li>Remova a sutura de estadia usada para levantar o coração.</li>
	<li>Feche o peito com uma sutura de monofilamento de 5-0, usando um padrão simples interrompido.</li>
	<li>Inserir um tubo de 23 G, ligado a uma seringa de 10 mL no peito e em seguida, prosseguir com um fecho no peito parede músculo e pele com suturas interrompidas simples.</li>
	<li>Tirar qualquer ar, sangue e derrame pleural através do tubo inserido no peito, usando a seringa de 10 cc anexado e, puxe o tubo.</li>
	<li>Feche a camada de pele com uma sutura de monofilamento de 5-0, usando um padrão simples interrompido.</li>
	<li>Dar a buprenorfina 0,01 mg/kg por via subcutânea.</li>
	<li>Desligue o isoflurano.</li>
	<li>Desligar o respirador após observa-se respiração espontânea.</li>
	<li>Mantenha o rato intubado e deixe-o recuperar na rampa de aquecimento até que acorde.</li>
	<li>Com segurança os tubos o rato depois de um ou mais dos seguintes sinais são observados: o rato começa a se mover seus quatro membros, recupera seu braço endireitante reflex, recupera a sua ânsia de vômito ou exibe da micção espontânea.</li>
</ol>5. no pós-operatório cuidados
<ol><li>Cada 8-12 h, dar buprenorfina 0,01 mg/kg por via subcutânea. Carprofeno 5 mg/kg é dada por via subcutânea em uma base diária, para 2 dias e, em seguida, conforme necessário, se o rato não está se movendo bem e parece que está a sofrer.</li>
	<li>Dê 5 mL de solução salina por via subcutânea logo após a cirurgia, como o rato pode ter dificuldade em beber da torneira de água, imediatamente no pós-operatório.</li>
</ol>6. confirmação do sucesso da estenose Atrial Esquerdo com ecocardiografia
<ol><li>Execute uma ecocardiografia transtorácica 2 semanas após a cirurgia para determinar a velocidade de entrada de LV.</li>
	<li>Anestesia o rato seguindo as etapas descritas na seção 1.</li>
	<li>Após a indução da anestesia, manter a anestesia, usando um cone de nariz com 2% de isoflurano misturado com o ar do quarto de 2 L/min.</li>
	<li>Raspar a parede do peito do rato com um barbeador cabelo e usar creme depilatório para remover os pelos restantes.</li>
	<li>Coloque a sonda de ultra-som no ápice do coração, que é em torno do quinto espaço intercostal no lado esquerdo do peito. Deslocar a sonda nesta região até à obtenção de uma boa visão de quatro câmaras.</li>
	<li>Medir a velocidade de entrada de LV usando o modo de onda pulsada Doppler logo acima do anel da válvula mitral.</li>
	<li>Uma velocidade de influxo de LV superior a 2,0 m/s é necessária para o desenvolvimento de hipertensão pulmonar moderada na cirurgia de 8-10 semanas pós-LAS.</li>
</ol>7. operação sham
<ol><li>Exceto para aplicar o clipe (etapa 4.9), execute todas as etapas acima para criar ratos idade-combinada, operação de controle (SOC).</li>
</ol>

<ol><li>McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cor+Triatriatum+as+a+Problem+of+Adult+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease.</a> Circulation. 31, 263-272 (1965).</li>
<li>Strange, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension%3A+prevalence+and+mortality+in+the+Armadale+echocardiography+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort.</a> Heart. 98 (24), 1805-1811 (2012).</li>
<li>Moreira, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Pulmonary+Hypertension+in+the+General+Population%3A+The+Rotterdam+Study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Pulmonary Hypertension in the General Population: The Rotterdam Study.</a> PLoS ONE. 10 (6), e0130072(2015).</li>
<li>Wijeratne, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+Incidence+and+Prevalence+of+World+Health+Organization+Groups+1+to+4+Pulmonary+Hypertension%3A+A+Population-Based+Cohort+Study+in+Ontario%2C+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Cardiovascular+Quality+and+Outcomes%22%5BJournal%5D)">Increasing Incidence and Prevalence of World Health Organization Groups 1 to 4 Pulmonary Hypertension: A Population-Based Cohort Study in Ontario, Canada.</a> Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 11 (2), (2018).</li>
<li>Briongos Figuero, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+persistent+pulmonary+hypertension+after+mitral+valve+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+and+Vessels%22%5BJournal%5D)">Predictors of persistent pulmonary hypertension after mitral valve replacement.</a> Heart and Vessels. 31 (7), 1091-1099 (2016).</li>
<li>Jiang, B. H., Tardif, J. C., Shi, Y., Dupuis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bosentan+does+not+improve+pulmonary+hypertension+and+lung+remodeling+in+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Society%22%5BJournal%5D)">Bosentan does not improve pulmonary hypertension and lung remodeling in heart failure.</a> European Respiratory Society. 37 (3), 578-586 (2011).</li>
<li>Dayeh, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+validation+of+pulmonary+hypertension+due+to+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic validation of pulmonary hypertension due to heart failure with reduced ejection fraction in mice.</a> Scientific Reports. 8, (2018).</li>
<li>Yin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+preserves+lung+endothelial+function+and+prevents+pulmonary+vascular+remodeling+in+a+rat+model+of+diastolic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure.</a> Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+and+Mechanism+of+Atorvastatin+on+Pulmonary+Hypertension+Due+to+Left+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">The Effects and Mechanism of Atorvastatin on Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease.</a> PLoS ONE. 11 (7), e0157171-e0157171 (2016).</li>
<li>Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+veins+in+the+normal+lung+and+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), L725-L736 (2013).</li>
<li>Fujimoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension due to left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1742-1753 (2017).</li>
<li>Katz, M. G., Fargnoli, A. S., Hajjar, R. J., Hadri, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+arising+from+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension arising from left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 281-282 (2018).</li>
<li>Alsoufi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Not+a+Cinderella+story%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Not a Cinderella story.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 282-284 (2018).</li>
<li>Kato, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+vein+stenosis+and+the+pathophysiology+of+%26%2334%3Bupstream%26%2334%3B+pulmonary+veins%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary vein stenosis and the pathophysiology of &#34;upstream&#34; pulmonary veins.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (1), 245-253 (2014).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

O rato-LAS é um modelo de PH de romance grupo 2 que já recebeu um interesse substancial de pesquisadores no campo12,13. Comparando com os dois modelos de grupo 2 existentes, nomeadamente a veia pulmonar estenose (PVS) modelo14, usando leitões e a supracoronary da aorta bandas (SAB) rato modelo8,9,10, o modelo do rato de LAS tem vários vantagens. C...

O objetivo deste artigo é demonstrar o procedimento passo a passo de como realizar a cirurgia de LAS em ratos. Cirurgicamente induzido LAS estreitamente imita MS e cor triatriatum em seres humanos, que envolvem a criação de uma obstrução mecânica no átrio esquerdo1. Obstrução da afluência de (LV) ventricular esquerda muitas vezes faz com que uma congestão da circulação venosa pulmonar, e os pacientes desenvolvem gradualmente o PH. A Organização Mundial de saúde classifica o PH devido a doenças do coração esquerdas no grupo 2, que é o grupo mais prevalente de PH2,3,4. O diagnóstico de PH em pacientes com doenças do coração esquerdos é associado com um maior do que um aumento de sete vezes na mortalidade padronizada de 1 ano4. Atualmente, não há nenhuma terapia aprovada para o grupo 2 PH além de tratamento à base deixou de doenças do coração (por exemplo, cirurgicamente, substituindo a válvula mitral estenóticas). No entanto, nem eficaz da válvula mitral substituição não resolver PH totalmente em até a metade dos pacientes com MS5. Este PH persistente é devido adverso pulmonar vascular remodelação, que é mal compreendido. Portanto, modelos animais são importantes para melhorar a nossa compreensão dos mecanismos moleculares subjacentes de adversos remodelamento vascular pulmonar no grupo 2 PH.
Existem alguns modelos animais do grupo 2 pH arterial coronariana ligadura6,7 e transversal da aorta faixas8,9,10 em roedores são os mais usados modelos animais do grupo 2 PH. A grande desvantagem destes modelos é o envolvimento de LV, que faz com que o resultado dos estudos de PH do grupo 2 difíceis de interpretar. Em contraste, a LV permanece intacta no modelo de LAS. Além disso, o modelo de LAS é clinicamente relevante, porque resulta na evolução lenta e progressiva do PH durante um período de 10 semanas11. Em humanos, MS é considerada significativa se a velocidade de fluxo Doppler transmitral for superior a 2,0 m/s11, e também utilizamos este número como um disco de corte para determinar se a cirurgia de LAS produziu estenose significativa. Além disso, embora o modelo de LAS gera PH ligeira ou moderada, ele demonstra alterações histológicas características, semelhantes em pacientes humanos, nomeadamente o desenvolvimento de arterialization venoso intrapulmonar11. O modelo do rato de LAS é um modelo de PH clinicamente relevante grupo 2 com função preservada de LV e romance. É apropriado para o estudo da fisiopatologia de remodelamento vascular pulmonar persistente, identificando alvos moleculares e testes de novas terapias para o grupo 2 PH.

<table><tbody><tr><td>5-0 Sutura de Prolene</td><td>Johnson & Johnson - Ethicon</td><td>8725H</td><td>Sutura de polipropileno com tecnologia HEMO-SEAL</td></tr><tr><td>Máquina de anestesia</td><td>Wakenyaku Co., Ltd.</td><td>BRTK-100A</td><td>Bomba de ar e máquina de anestesia</td></tr><tr><td>Fio-guia de angiocateter</td><td>Fio-guia de</td> 10 cm feito por <td></td> ele mesmo <td>colado a uma seringa de 1 cc&nbsp;</td></tr><tr><td>Afastador de tórax</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>F-2</td><td></td></tr><tr><td>Tubo torácico 23G</td><td>Seringa de</td><td>10 cc de fabricação própria presa a uma agulha 23G mais tubo de plástico</td>Pinça curva Natsume Seisakusho Co., Ltd.<td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>A-14</td><td></td></tr><tr><td>Almofada de aquecimento</td><td>Vivaria</td><td>MP-916-NV</td><td>Mantenha a temperatura corporal a 37 graus Celsius</td></tr><tr><td>Horizon Ligating Clips</td><td>Teleflex</td><td>REF 003200</td><td>Tamanho Médio-Grande</td></tr><tr><td>Horizon Manual-Load Ligating Clip Applier Para Tamanho Médio-Grande Horizon</td><td>Teleflex</td><td>REF 337085</td><td>Clips de Ligadura Anglada, (20cm)</td></tr><tr><td>Porta-agulha</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>MC-40</td><td></td></tr><tr><td>Respirador para roedores</td><td>CWE Inc</td><td>SAR-830 / P</td><td>Tesoura para ventilador para pequenos animais</td></tr><tr><td></td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>B-12</td><td>Tesoura reta idealmente com pontas redondas</td></tr><tr><td>Pinça reta</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>A-7</td><td></td></tr><tr><td>Abaixador de língua</td><td>Uchida Yoko Co., Ltd.</td><td>8-615-2417</td><td>Use a extremidade larga</td></tr></tbody></table>

estenose atrial esquerdo induzida arterialization venoso pulmonar e hipertensão pulmonar do grupo 2 no rato

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

Desconhece-se o mecanismo de arterialization de venosa pulmonar induzida por estenose mitral e hipertensão pulmonar do grupo 2 (PH). Não há nenhum modelo de roedor do grupo 2 de PH, devido à estenose mitral (MS), para facilitar a investigação dos mecanismos da doença e possíveis estratégias terapêuticas. Apresentamos um modelo do rato de romance de pulmonar venosa induzida por congestão pulmonar venosa arterialization e grupo 2 PH causada por estenose atrial esquerdo (LAS). LAS é conseguida pela constrição do átrio esquerdo usando um clipe de titânio semi-cerrados. Após a cirurgia de LAS, um rato modelo com uma velocidade de fluxo transmitral maior que ou igual a 2,0 m/s na ecocardiografia se desenvolve gradualmente arterialization venoso pulmonar e grupo 2 PH ao longo de um período de 8 a 10 semanas. Neste protocolo, nós fornecemos o procedimento passo a passo de como realizar a cirurgia de LAS. O modelo de rato de LAS apresentado imita MS em humanos e é útil para estudar o mecanismo molecular subjacente de arterialization venosa pulmonar e para a avaliação pré-clínica de terapias para o grupo 2 PH.

A eficácia da LAS é confirmada usando a Ecocardiografia, 2 semanas de pós-operatório. Ratos com uma velocidade de influxo de LV superior a 2,0 m/s, medidos com uma visão de quatro câmaras, são considerados desenvolveram estenose significativa (Figura 1) e confiantemente desenvolver PH moderado e a arterialization venosa pulmonar 8-10 semanas pós-LAS cirurgia.
Cirurgia pós-LAS de dez semanas, os rato...

Estenose atrial esquerdo (LAS) é uma nova técnica cirúrgica para estudar os mecanismos subjacentes arterialization venoso pulmonar e hipertensão pulmonar do grupo 2 (PH). Aqui, apresentamos um protocolo para contrair o átrio esquerdo usando um clipe de titânio para causar arterialization venoso pulmonar e moderar o PH em um rato.

Estenose Atrial Esquerdo induzida Arterialization venoso pulmonar e hipertensão pulmonar do grupo 2 no rato

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Obrigado por assistir nossos vídeos. Sou Susumu Minamisawa, da Escola de Medicina da Universidade Jikei, em Tóquio, Japão. Nossa oportunidade de hipertensão pulmonar animal devido a doença cardíaca de rato que é classificada como hipertensão pulmonar do Grupo Dois.A Organização Mundial da Saúde classifica a hipertensão pulmonar em cinco grupos. O rato de estenose atrial esquerda é um grupo modelo animal dois hipertensão pulmonar que é a forma mais prevalente de hipertensão pulmonar e atualmente não há terapias aprovadas para este grupo de hipertensão pulmonar. Nestes vídeos estamos demonstrando o passo a passo de como realizar a cirurgia de estenose atrial esquerda em rato.A estenose atrial criada cirurgicamente imita estenose mitral em humano. Quando o usamos para estudar a possibilidade e sob o grupo dois hipertensão pulmonar. Vamos começar.Prepare o seguinte equipamento antes da cirurgia, um pequeno respirador animal e uma máquina anestésico. Um kit de incubação compõe um par de fórceps hemostat, um depressor de língua e um angio-cateter de 18 bitolas. Os instrumentos cirúrgicos incluem um par de fórceps curvos, um par de fórceps retos, um driver de agulha, um retrátil torácico, um par de tesouras, uma sutura monofilamento 5-0, um aplicador de clipe, um clipe médio grande e um tubo torácico calibre 23.Anestesiar o rato em uma câmara de indução com 5% de isoflurane misturado com dois metros por minuto de ar da sala. Antes da intubação raspar o cabelo do peito. Aplique creme de depilação para remover cabelos finos não removidos pela máquina de barbear.Enganche os dentes da frente com uma corda e fixe as cordas nos pinos. Depois que a corda for presa, abra a boca com as fórceps hemostat e insira o depressor da língua na boca. Levante o depressor da língua para visualizar a corda vocal.Insira o angio-cateter de 18 bitolas como tubo endotraqueal na traqueia e, em seguida, conecte rapidamente o cateter ao respirador. Ajuste o volume da maré para 10 microliter por grama com uma taxa respiratória de 100 respirações por minuto. Mantenha a anestesia com 2% de isoflurane misturado com dois metros por minuto de ar da sala.Esterilize o local cirúrgico com esfoliantes alternados de clorexidina e álcool. Dê a Buprenorfina 01 miligramas por quilograma subcutâneamente. Cubra o rato com uma cortina estéril.Verifique o reflexo do pedal para confirmar a anestesia bem sucedida antes da cirurgia. Marque o local da incisão dois centímetros abaixo da axila. Faça uma incisão lateral lateral de dois centímetros com uma tesoura.Separe cuidadosamente o músculo intercostal entre a quarta e a quinta costela usando um fórceps reto e curvo até entrar na cavidade torácica. Insira o retrátil do peito na cavidade torácica. Use alguma força para abrir o retrátil do peito para dividir a quarta e quinta costela em cerca de um centímetro.Levante o timo com um par de fórceps retos. Remova cuidadosamente o timo que cobre o coração com uma tesoura. Passe cuidadosamente uma sutura de monofilamento 5-0 através da superfície do ventrículo esquerdo logo abaixo do apêndice atrial esquerdo.Deve-se tomar cuidado para evitar passar a agulha pelas principais artérias coronárias. Depois que a sutura estiver no lugar e não houver uma gravata de sangramento significativa um nó solto. Puxe o fio de sutura para cima e para a frente para levantar o coração para fora do peito.Uma vez que o coração é levantado fora do peito, aplique rapidamente um clipe médio grande no átrio esquerdo logo acima da válvula mitral. Remova cuidadosamente a sutura de permanência usada para levantar o coração. Comece a fechar o peito com uma sutura de monofilamento 5-0 usando um padrão simples interrompido.Insira um tubo torácico de calibre 23 preso a uma seringa de 10cc na cavidade torácica. E então proceder com o fechamento do peito. Desenhe qualquer derrame de ar, sangue e pleurae perto do tubo torácico inserido usando a seringa de 10cc anexada.E então puxe o tubo quando nada está saindo. Feche a área da pele com sutura de monofilamento 5-0 usando um padrão simples interrompido. Remova a cortina cirúrgica.Dê a Buprenorfina 01 miligramas por quilograma subcutâneamente. Desligue o isoflurane. Escavar o rato quando ele começar a acordar.Duas semanas após a operação usam a ecografia para confirmar o sucesso da cirurgia de estenose atrial esquerda. A eficácia da estenose atrial esquerda é confirmada usando a cardiografia ecológica duas semanas após a operação. Acredita-se que ratos com velocidade de entrada do ventrículo esquerdo superiores a dois metros por segundo medidos em quatro câmaras tenham desenvolvido estenose significativa.10 semanas após a cirurgia de estenose atrial esquerda os ratos do grupo LAS mostram alargamento atrial esquerdo, congestão pulmonar, sobrecarga de pressão ventrículo direita e aumento do fluxo venoso pulmonar em comparação com os ratos do grupo operado falso. Além disso, há um aumento significativo da pressão sistólica ventricular direita no grupo de estenose atrial esquerda versus o grupo operado por sham. No entanto, a pressão sistólica do ventrículo esquerdo permanece a mesma em ambos os grupos.Exame histológico de longa seção transversal manchada com van gieson elástico mostra aumento da doença arterial pulmonar e venosa pulmonar. Uma dimensão venosa pulmonar aumentada o grupo de estenose atrial esquerda versus o grupo operado falso foi mais uma atuação muscular suave na coloração mostra aumento do número de células musculares lisas na artéria pulmonar e na veia pulmonar do grupo de estenose atrial esquerda versus o grupo controle. Espero que tenham gostado de ver este vídeo.Embora a cirurgia seja relativamente simples, deve-se tomar cuidado ao aplicar a sutura no ventrículo esquerdo para evitar atingir as principais artérias coronárias. Ao levantar o coração puxe a sutura em direção à cabeça do rato para que o átrio esquerdo sua estrutura de corrida possa ser claramente visualizada. Aplicando o clipe no átrio esquerdo, o aperto do clipe deve ser suficiente para causar estenose atrial esquerda significativa, mas não muito apertada para induzir edema pulmonar agudo e insuficiência cardíaca direita.Obrigado por assistir este vídeo. E boa sorte com sua experiência.

left-atrial-stenosis-induced-pulmonary-venous-arterialization-group-2

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

A Hipertensão Pulmonar Tromboembólica Crônica (HPTEC) e a disfunção do Ventrículo Direito (VD) foram induzidas em leitões por obstrução progressiva das artérias pulmonares. As consequências foram notavelmente semelhantes às observadas em pacientes com HPTEC. Este modelo animal seria uma ferramenta muito útil para fisiopatologia e experimentos terapêuticos sobre CTEPH e falha do VD.

Tromboembólica crônica Hipertensão Pulmonar e Avaliação da Função Ventricular Direita no Piglet

A hipertensão arterial pulmonar (HAP) é uma doença das arteríolas pulmonares que leva à sua obliteração e ao desenvolvimento de insuficiência ventricular direita. Modelos de HAP em roedores são essenciais para a compreensão da fisiopatologia da HAP. Aqui demonstramos a caracterização hemodinâmica, com cateterismo cardíaco direito e ecocardiografia, em camundongos e ratos.

Hemodinâmica Caracterização de roedores modelos de Hipertensão Arterial Pulmonar

Este protocolo descreve um procedimento cirúrgico para criar um modelo de hipertensão arterial pulmonar (HAP) induzida por fluxo em ratos e os procedimentos para analisar os principais desfechos hemodinâmicos e histológicos neste modelo.

A cirurgia de derivação, coração direito Cateterismo e Vascular morfometria em um modelo de rato para induzida Fluxo de Hipertensão Arterial Pulmonar

Apresentamos um método cirúrgico para induzir hipertrofia ventricular direita e falha em ratos.

Um tronco pulmonar bandagem modelo de sobrecarga de pressão induzida por falha e Hipertrofia Ventricular direita

A roedor pneumonectomia esquerda é uma técnica valiosa na investigação de hipertensão pulmonar. Aqui, apresentamos um protocolo para descrever o procedimento de pneumonectomia de rato e cuidados pós-operatórios para garantir mínima morbidade e mortalidade.

A pneumonectomia esquerda combinado com Monocrotaline ou Sugen como modelo de hipertensão pulmonar em ratos

Aqui, nós fornecemos uma aproximação útil para estudar o mecanismo da falha ventricular direita. Uma aproximação mais conveniente e mais eficiente à constrição da artéria pulmonaa é estabelecida usando instrumentos cirúrgicos feitos inhouse. Além disso, são fornecidos métodos para avaliar a qualidade dessa abordagem por ecocardiografia e cateterismo.

Indução de insuficiência ventricular direita por constrição da artéria pulmonar e avaliação da função ventricular direita em camundongos

Descrevemos a criação de um modelo de rato de sobrecarga de pressão induzida remodelação moderada e disfunção sistólica precoce onde as vias de transdução de sinal envolvidas no início do processo de remodelação são ativadas. Este modelo animal ajudará na identificação de alvos moleculares para a aplicação de estratégias terapêuticas precoces anti-remodelação para insuficiência cardíaca.

Um modelo de rato de sobrecarga de pressão induzida remodelação moderada e disfunção sistólica em oposição à insuficiência cardíaca sistólica overt

O presente protocolo descreve um procedimento cirúrgico para remover a faixa ascendente-aórtica em um modelo de rato de hipertensão pulmonar devido a doença cardíaca esquerda. Esta técnica estuda mecanismos endógenos de remodelação reversa na circulação pulmonar e no coração direito, informando estratégias para reverter a hipertensão pulmonar e/ou disfunção ventricular direita.

Um modelo de remodelação vascular reversa na hipertensão pulmonar devido a doença cardíaca esquerda por debandada de aórtica em ratos

O presente protocolo descreve a caracterização ecocardiográfica da morfologia e função do ventrículo direito em um modelo de hipertensão arterial pulmonar em ratos.

Avaliação Ecocardiográfica Abrangente da Função do Ventrículo Direito em Modelo de Hipertensão Arterial Pulmonar em Rato

A insuficiência cardíaca direita (ICD) é caracterizada por dilatação e hipertrofia cardíaca do lado direito, levando a disfunção ventricular e atrial. As condições cardiopulmonares associadas à ICD são acompanhadas por um risco aumentado de arritmias cardíacas. Este artigo descreve um modelo padronizado de FTE induzida por bandagem da artéria pulmonar associada a arritmogênese ventricular e atrial aumentada.

Modelo de rato de remodelamento cardíaco do lado direito e arritmia usando bandagem da artéria pulmonar

Aqui, é introduzido o método de indução de hipertensão arterial pulmonar associada à fibrose pulmonar (FP-HP) modelo de rato por meio da injeção de bleomicina nas vias aéreas. Também fornecemos uma abordagem passo a passo para validar esse modelo animal.

Estabelecimento e Validação de um Modelo de Rato de Hipertensão Arterial Pulmonar Associada à Fibrose Pulmonar

Aprenda a técnica cirúrgica de estenose atrial esquerda em ratos para estudar hipertensão pulmonar do grupo 2. Este modelo induz arterialização venosa pulmonar e fornece insights sobre mecanismos fisiopatológicos.

Estenose Atrial Esquerdo induzida Arterialization venoso pulmonar e hipertensão pulmonar do grupo 2 no rato

Explorar mais vídeos