Determinação de subconjuntos de regulação de células T no timo murino, pancreático drenagem do linfonodo e baço usando citometria de fluxo

Este protocolo ajuda na investigação do papel das células imunes em determinados órgãos em saúde e patologia. A principal vantagem dessa técnica é que esta é uma técnica econômica, já que é uma técnica manual. Demonstrando o procedimento será Zhengkang Luo, um estudante de doutorado do meu laboratório.

Para começar, coloque as glândulas tímicas e baços de camundongos previamente eutanizados em frascos de cintilação de 20 ml, ou tubos cônicos de 15 ml, preenchidos com 5 ml da solução de sal balanceada de Hank. Coloque os linfonodos de drenagem pancreática em micro-tubos de 1,5 ml preenchidos com 1 ml de RPMI-1640. Certifique-se de usar todo o timo e baço, e todas as PDLNs.