Name: Uma bateria de testes comportamentais para a avaliação repetida das habilidades motoras, humor e cognição em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-02T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: Aprenda a avaliar habilidades motoras, humor e cognição em ratos com uma bateria de testes comportamentais repetíveis. Este método estruturado reduz o estresse animal e melhora a eficiência dos experimentos em neurodegeneração.

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Os autores agradecer Dr. Cora SW Lai da escola de ciências biomédicas, Universidade de Hong Kong, para empréstimos a elevada além de teste de labirinto e o departamento de Anestesiologia da Universidade de Hong Kong para a aparelhagem de ensaio rotarod os empréstimos.

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Os autores não têm nada para divulgar.

Análise comportamental de ratos é crítico para a pesquisa de neurodegeneração. Enquanto a função cognitiva é, muitas vezes, o domínio mais suscetível de comportamento afetado em doenças neurodegenerativas, disfunção do humor, como depressão e ansiedade, muitas vezes é comórbidos. Além disso, a função motora muitas vezes afeta a interpretação dos resultados de alguns testes, tais como o teste de reconhecimento de objeto do romance, a elevada plus teste de labirinto e o teste de interação social. Baseado nestes pensamentos...

Doenças neurodegenerativas destaque devastadoras comportamentais sintomas, incluindo comprometimento cognitivo, disfunções de humor, como ansiedade e depressão ou disfunção motora1. A patogênese dos vários tipos de doenças neurodegenerativas é claro2. Acumulativos estudos indicam que fatores genéticos e ambientais podem tanto contribuir para a patogênese de doenças neurodegenerativas. Identificar o fator de risco de neurodegeneração requer análise comportamental. Embora cada tipo de doença neurodegenerativa tem seu sintoma comportamental de assinatura (por exemplo, a doença de Alzheimer [AD] é caracterizada com comprometimento cognitivo e a doença de Parkinson [PD] com disfunção motora). Com a progressão da doença, os pacientes manifestam comorbidade de anormalidades comportamentais diferentes3. Por exemplo, pacientes apresentam sintomas de disfunção do humor no estágio avançado4,5. Pacientes com DP podem progredir em demência PD-relacionados e desenvolver comprometimento cognitivo6. Baseado sobre esses recursos, a análise comportamental na neurodegeneração modelos geralmente é abrangente e repetidas.
Para atingir este objetivo, uma bateria que contém testes comportamentais clássicos e amplamente utilizados com excelente validade foi projetada para análises comportamentais no motor, humor e cognição. A função motora pode ser testada pelo teste de campo aberto7,8 e o teste de rotarod a aceleração. Disfunção do humor, incluindo disfunção social, depressão e ansiedade, são mais comumente vistos em de doenças neurodegenerativas5. Portanto, esta bateria inclui um teste de interação social para sociabilidade9, a elevada mais teste de labirinto para ansiedade10e o teste de natação forçada para depressão11. Comprometimento cognitivo é um dos sintomas mais característicos em doenças neurodegenerativas, como AD e de demência lobar frontotemporal12. Domínios cognitivos, incluindo a curto prazo e a memória episódica, são suscetíveis a neurodegeneração13,14,15. Portanto, o teste de labirinto de Morris água para aprendizagem espacial e memória de16 e o teste de reconhecimento de objeto romance para curto prazo memória17 estão incluídos na bateria. Estes testes são compatíveis uns com os outros. A ordem dos testes foi projetada para maximizar a habituação e a minimizar as interferências, para aumentar ainda mais a compatibilidade dentro da bateria. Desde que cada função é testada pelo menos dois testes independentes que são diferentes em princípio e método, os resultados de cada teste podem ser validados ainda mais. Além disso, os protocolos de alguns testes são destacados para testes repetidos, facilitando o estudo longitudinal do desenvolvimento de doenças neurodegenerativas. Portanto, esta bateria de testes de comportamento estuda diferentes subdomínios de mudanças de comportamento vistos em vários estágios de neurodegeneração enquanto custando um número mínimo de animais. Esta bateria tem sido utilizada em um estudo longitudinal que avaliou as alterações comportamentais em jovens adultos (3 meses) masculino C57BL/6N os ratos após exposição respiratória de nanopartículas de sílica, que é um factor de risco potencial de ofício Neurodegeneração18. No entanto, cepas ou outros modelos, tais como idade ratos e manipulado geneticamente ratos, podem se comportar de forma diferente de jovens camundongos C57BL/6N. Portanto, cuidado pode ser exigido ao usar esta bateria nestes ratos.

<table><tbody><tr><td>câmaras em teste de interação social</td><td>caseiro</td><td></td> <td>(8 cm (L) x 6 cm (L) x 12 cm (A)), transparente com furos,</td></tr><tr><td>tanques cilíndricos de plástico usados em teste de nado forçado</td><td>caseiro 30</td><td></td><td>cm de altura, 20 cm de diâmetro, vidro</td></tr><tr><td>elevado mais labirinto</td><td>caseiro</td><td></td><td>braços abertos (30 cm x 5 cm x 0,5 cm), braços fechados (30 cm x 5 cm x 16 cm), plataforma central (5 cm x 5 cm x 0,5 cm), 40 cm de altura. Aparelho de plástico não transparente</td></tr><tr><td>IITC Roto-Rod IITC</td><td>life science Inc.</td><td>755, série 8</td><td></td></tr><tr><td>arena de campo aberto</td><td>feita em</td><td></td> casa <td>60 cm (C) x 60 cm (L) x 40 cm (A), plástico,</td></tr><tr><td>labirinto aquático</td> não transparente <td>feito em</td><td></td> casa <td>120 cm de diâmetro, 60 cm de profundidade, aço</td></tr></tbody></table>

uma bateria de testes comportamentais para a avaliação repetida das habilidades motoras, humor e cognição em ratos

A Behavioral Test Battery for the Repeated Assessment of Motor Skills, Mood, and Cognition in Mice

Estudos farmacológicos e toxicológicos na neurodegeneração exigem abrangente análise comportamental em ratos porque disfunções motor e disfunções de humor e cognição são comuns e compartilhado muitas vezes sintomas em doenças neurodegenerativas. Mostrado aqui é uma bateria de testes comportamentais para motor, humor e cognição, que pode ser testada repetidamente em um estudo longitudinal. Esta bateria avalia o fenótipo comportamental em geral em ratos, examinando cada domínio de comportamento pelo menos dois testes bem aceitas independentes (ou seja, teste de campo aberto e rotarod teste para a função motora, teste de interação social, elevados além de teste de labirinto, e teste de natação forçada para função emocional e teste de labirinto de água de Morris e teste de reconhecimento de objeto romance para função cognitiva). Portanto, esta bateria de teste sensível e abrangente é uma poderosa ferramenta para o estudo da alternância comportamental na neurodegeneração.

Esta bateria de testes comportamentais foi projetada para a análise comportamental abrangente e válida de motor, humor e cognição, que são comumente afetados na neurodegeneração5. Nós aplicamos esta bateria para estudar as mudanças comportamentais em jovens adultos C57BL/6N ratos após exposição respiratória de nanopartículas de sílica por 1 mês e 2 meses18. Os resultados revelaram que camundongos C57BL/6N expostos a nanopartículas de sílica ...

Uma bateria de testes comportamentais abrangente das habilidades motoras, humor — incluindo a interação social, depressão e ansiedade — e cognição destina-se a avaliação repetida das alterações comportamentais relacionadas à neurodegeneração em camundongos.

Uma bateria de testes comportamentais para a avaliação repetida das habilidades motoras, humor e cognição em ratos

Pharmacological and toxicological studies in neurodegeneration require comprehensive behavioral analysis in mice because motor dysfunctions and ...

A doença neurodegenerativa frequentemente se manifesta com sintomas de comportamento devastadores, como comprometimento cognitivo, disfunções de humor ou até mesmo disfunções motoras. Este estudo permite que um fenótipo comportamental seja avaliado com precisão com um alto nível de repetibilidade. Projetamos uma bateria abrangente que pode ser repetidamente utilizada na análise de comportamento em camundongos.Este teste acompanha funções motoras, interação social, função emocional e função cognitiva. Ao organizar a ordem e o intervalo de testes nesta bateria, aumentamos a eficiência dos testes e diminuímos a interferência entre os testes e o estresse em camundongos de manuseio frequente. Para começar, organize o teste comportamental na ordem descrita no protocolo de texto.Realize o teste de campo aberto em uma arena de plástico não transparente, branca e plástica. Inicie a gravação da câmera e coloque suavemente o mouse ao lado do meio de uma parede da arena, de frente para a parede. Regisso comportamento do rato por 10 minutos, e devolva-o para sua gaiola.Em seguida, divida a arena em quatro por quatro quadrados na tela do computador. Conte o número de vezes que o mouse cruza as linhas de grade na arena para avaliar a função locomotor. Para medir a ansiedade, meça o tempo que o rato passa na área central da arena.Realize o teste de labirinto elevado mais no mesmo dia. Uma vez que todos os ratos terminem o teste de campo aberto, coloque o mouse na junção dos braços abertos e fechados. Regisso o comportamento do mouse por cinco minutos antes de devolver o mouse à gaiola.Após dois dias consecutivos de teste de campo aberto, configure o novo teste de reconhecimento de objetos de acordo com o protocolo de texto. Inicie a câmera e coloque o mouse na arena, de frente para o meio da parede, para familiarizar o mouse. Regisso comportamento do rato por 10 minutos.Então devolva o rato para sua gaiola. 24 horas após a familiarização, repita o teste com um novo objeto. Meça o tempo em que o mouse interage com um novo objeto e um objeto familiar separadamente.Em seguida, calcule a memória do mouse como a preferência para o objeto novo. Para o teste de interação social, utilize uma arena de campo aberto com duas câmaras transparentes com buracos na superfície. Coloque o mouse sujeito na arena por um período de exploração de objetos de três minutos para habituar o mouse às câmaras.Em seguida, devolva o rato sujeito para sua gaiola de origem e limpe a arena. Coloque um rato novo em uma das câmaras. Em seguida, reintroduzir o rato sujeito para a arena e gravar por três minutos.Ao revisar o vídeo, avalie a interação social medindo a proporção de tempo que o rato sujeito passa interagindo com a câmara do rato novo ou a câmara vazia. Em seguida, realize o teste rotarod acelerado. Em cada ensaio, coloque o mouse na haste estática de frente para a parede em frente à máquina.Habituar os camundongos ao rotarod treinando-o por três dias nos camundongos ingênuos antes do início de possíveis sintomas, para que o rato aprenda igualmente a escala. Pare o dispositivo quando o mouse cair e grave o tempo que o mouse passou na haste. Repita este processo mais duas vezes antes de devolver o mouse à gaiola de origem.Em seguida, coloque o labirinto de água no centro de uma sala comportamental, e marque a posição do labirinto para garantir que a posição do labirinto de água permaneça constante. Divida o labirinto em quatro quadrantes imaginários. Pendure pistas visuais no centro de cada quadrante.Em seguida, coloque uma plataforma no centro do quarto quadrante e marque sua localização. Encha o labirinto com água, branco colorido com leite em pó, até que o nível de água seja um centímetro mais alto que a plataforma. No início de cada teste de treinamento, inicie a gravação de vídeo, e gentilmente coloque o mouse no labirinto.Fique fora de vista do rato. Devolva o mouse para sua gaiola doméstica quando o mouse não conseguir localizar a plataforma dentro de 60 segundos ou se o mouse localizar a plataforma dentro de 60 segundos e permanecer nele por 10 segundos. Depois que o teste acabar, pare o vídeo e coloque o mouse em sua gaiola em casa sob uma luz infravermelha.Finalmente realize a fase da sonda do teste do labirinto de água como descrito anteriormente, sem a plataforma. Em seguida, prepare o tanque cilíndrico para o teste de natação forçado. Inicie a gravação de vídeo e coloque suavemente o mouse na água no centro do tanque.Grave o mouse por seis minutos antes de colocar o rato de volta em sua gaiola. Reveja o vídeo do teste de natação forçado. Meça o tempo de imobilidade nos últimos cinco minutos do vídeo.Este protocolo foi para estudar mudanças comportamentais em camundongos após exposição respiratória a nanopartículas de sílica. Os resultados no teste de campo aberto e no teste rotarod acelerado demonstraram que as nanopartículas de sílica não afetaram a função locomotor ou motor em camundongos. A atividade de interação social foi afetada após um mês de exposição a nanopartículas de sílica, porém o teste de campo aberto, elevado mais teste de labirinto, e o teste de natação forçado não indicaram ansiedade ou depressão após um mês de exposição.Uma exposição de dois meses a nanopartículas de sílica resultou em ansiedade, como demonstrado pelos resultados do teste elevado mais labirinto. O comprometimento cognitivo também foi detectado no teste do labirinto de água após dois meses de exposição. Esta bateria foi projetada para a análise de comportamento abrangente na neurodegeneração na cepa do mouse C57.É mais adequado para estudos longitudinais relacionados à neurodegeneração em toxicidade de neurotoxinas ou fatores de risco potenciais, ou desenvolvimento de medicamentos, que muitas vezes apresenta administração de longo prazo e testes repetidos.

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Research

JoVE Journal

Behavior

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Nos distúrbios da doença de Parkinson e de movimento, em geral, os ensaios comportamentais sensíveis e fiáveis ​​são essenciais para testar novas terapêuticas potenciais. Aqui, descrevemos uma bateria gerenciável de testes sensório-motores para os ratos que são sensíveis a diferentes graus de lesão no sistema nigroestriatal e útil para estudos pré-clínicos.

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Sistema totalmente automatizado para a medição de propriedades fisiologicamente significativas dos mecanismos de mediação de localização espacial, localização temporal duração, taxa e estimativa de probabilidade, avaliação de risco, impulsividade e da exatidão e precisão da memória, a fim de avaliar os efeitos das manipulações genéticas e farmacológicas sobre mecanismos fundamentais da cognição em camundongos.

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Monitorização prolongada e abrangente de ratos em um ambiente de home-gaiola proporciona uma compreensão mais profunda do comportamento aberrante em modelos murinos de doenças do cérebro. Este artigo descreve a Estação Behavioral Integrado (INBEST) como o componente-chave da análise comportamental contemporânea.

Behavioral Fenotipagem de modelos de doenças Murino com a Estação Integrada Comportamental (INBEST)

Apresentada é uma bateria concisa de testes motores neonatais em camundongos. Usando esses testes, os déficits motores neonatais podem ser demonstrados em uma variedade de distúrbios motores neonatais. Por ter um conjunto padronizado de testes, os resultados de diferentes estudos podem ser comparados, permitindo relatórios melhores e precisos entre os grupos.

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Testes comportamentais é utilizado em ensaios pré-clínicos para avaliar os efeitos fenotípicos de uma doença ou tratamento no bem-estar do animal. Para globalmente avaliar o funcionamento do motor, nós selecionamos testes para locomoção geral, força muscular e coordenação: teste do campo aberto, a malha e o teste de rotarod, respectivamente.

Bateria de comportamental testes de avaliação geral de locomoção, coordenação e força Muscular em camundongos

Realizamos a oclusão da artéria carótida unilateral no pós-Natal dia 7-10 CD-1 mouse filhotes para criar um modelo de (HI) hipóxico-isquêmica neonatal e investigaram os efeitos da lesão cerebral de HI. Nós estudamos funções Neurocomportamentais nestes ratos em comparação com camundongos normais não operado.

Neurocomportamentais avaliações em um modelo do rato de lesão cerebral hipóxica-isquêmica Neonatal

Este artigo descreve um protocolo para avaliação cognitiva para modelos genéticos da doença de Alzheimer usando o sistema de IntelliCage, que é um sistema de monitoramento comportamental alto throughput automatizado com condicionamento operante.

Automatizada, a longo prazo ensaio comportamental para funções cognitivas em vários modelos genéticos da doença de Alzheimer, usando IntelliCage

Descrevemos o estabelecimento de um modelo murino para a doença de Parkinson usando MPTP e avaliações comportamentais usando o cilindro e testes de campo aberto para medir a função motora. Então usamos l-dopa como um exemplo para mostrar como aplicar este modelo no estudo de drogas de PD.

Avaliações comportamentais de locomoção espontânea em um modelo murino induzida por MPTP a doença de Parkinson

Modelos de roedores são ferramentas valiosas para estudar comportamentos centrais relacionados ao transtorno do espectro do autismo (TEA). Neste artigo, expomos dois testes comportamentais para modelar as principais características do TEA em camundongos: auto-limpeza, que avalia o comportamento repetitivo, e o teste de interação social de três câmaras, que documenta deficiências sociais.

Estratégias para avaliar comportamentos semelhantes aos autistas em camundongos

Aprenda a avaliar habilidades motoras, humor e cognição em ratos com uma bateria de testes comportamentais repetíveis. Este método estruturado reduz o estresse animal e melhora a eficiência dos experimentos em neurodegeneração.

Uma bateria de testes comportamentais para a avaliação repetida das habilidades motoras, humor e cognição em ratos

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