Aplicação da tecnologia de Microfluidic Biochip para detectar soro alérgeno-específicas E de imunoglobulina (sIgE)

O sistema de tecnologia microfluidic biochip é uma seção baseada em cartuchos microfluidos que usa o princípio de quimiomiluminescência para assage de especif de soro IGE. Em comparação com outros métodos de detecção, os sistemas bioIC têm as vantagens de serem de baixo custo e exigirem menos soro para detectar soro IGE. As implicações dessa técnica tendem ao diagnóstico de doenças alérgicas, como rinite e asma, pois muitos desses pacientes são sensibilizados com alérgenos detectáveis comuns.

Embora este método possa fornecer insights sobre doenças alérgicas respiratórias, ele também pode ser aplicado a outras situações, como alergias alimentares e cutâneas. Como essa técnica é mais fácil de usar, e tem um método reduzido para treinamento de operadores, indivíduos novos no sistema podem aprender a usá-la rapidamente. A demonstração vívida deste assunto é fundamental, pois determina se o teste é bem sucedido e requer uma operação manual hábil.

Para testar amostras de soro para anticorpos de imunoglobulina séum E a alérgenos inteiros, selecione aleatoriamente três amostras com pelo menos 900 microliters de soro e pegue o chip do kit e numera-o. Em seguida, ligue o computador e a potência do analisador. Inicie o programa de TI do Laboratório no computador.

Se a janela de aviso do quadro escuro aparecer, clique em OK para executar um teste de vazamento e clique no logotipo central para entrar na interface de operação. Verifique a temperatura de reação e a carga acoplado ao dispositivo ou temperatura ccd, a temperatura de reação deve subir para 37 mais ou menos um grau celsius em cerca de dez minutos e a temperatura ccd deve cair para menos 15 mais ou menos um grau celsius. Quando a temperatura do CCD cair para menos 15 mais ou menos um grau celsius, confirme que não há outros itens dentro do instrumento, e feche a porta.

Em seguida, clique em ferramentas, teste do sistema, teste de vazamento. Quando o teste estiver concluído, a janela do relatório aparecerá. Em seguida, carregue 620 microliters de tampão de lavagem, 120 microliters de tampão de bloqueio, 60 microliters de conjugados A e B, 60 microliters de substratos A e B, e 100 microliters de cada amostra de soro nos tanques de reagente correspondentes no cartucho microfluido.

Depois de clicar no ID do cartucho, use o scanner de código de barras para digitalizar o número de série do cartucho e digite o ID da amostra.Em seguida, coloque o cartucho no analisador, feche a porta e clique no analisador e execute para iniciar a análise. Ao final da análise, exporte os resultados para um programa de software estatístico adequado e remova o cartucho do analisador. Limpe levemente o ferro de aquecimento interno e o eletroímã do analisador com 75% de álcool e feche a janela de TI do Laboratório.

A janela de monitoramento de temperatura aparecerá e fechará automaticamente quando o CCD aquecer até o modo de proteção de cinco graus celsius, momento em que é seguro desligar o analisador e o computador. O sistema microfluido produz resultados repetitivos, como demonstrado por esses dados para caspa de gato, caspa de cachorro e barata após nove rodadas de testes. Como observado, todos os dados estão dentro do intervalo de dois desvios padrão, o que é consistente com o erro clínico máximo permitido.

Como esperado das taxas de positividade para os alérgenos, todos os resultados de avaliação para alérgenos inalantes são superiores aos alérgenos alimentares. Como a área sob os valores da curva demonstra uma faixa de 0,613 a 0,984, e a área sob os valores de curva para os três alérgenos inalatórios é superior a 0,950, pode-se concluir que o sistema dois tem alta precisão em relação ao sistema um. A análise de consistência para os dois sistemas revela que os valores kappa para os três inalantes são todos maiores do que os valores kappa para os alérgenos alimentares que, em geral, ficam abaixo de 0,4.

Nestes gráficos de dispersão construídos com o sistema dois resultados ao longo do eixo x e do sistema um resultados ao longo do eixo y, a distribuição da concentração de imunoglobulina sérico E resulta dos dois sistemas para seis alérgenos diferentes. Antes de iniciar a detecção, verifique sempre a reação e as temperaturas do CCD, pois estão ligadas à precisão do teste. Após esse procedimento, outros métodos como o diagnóstico de componentes resolvidos podem ser realizados para responder a perguntas adicionais sobre padronização cruzada de alérgenos e co-sensibilização.

A tecnologia de chips microfluidos tem sido aplicada com sucesso no campo do diagnóstico de alergia para resolver problemas como soro inadequado e alto custo médico Como trabalhar com soro humano, os sintomas podem ser perigosos. O uso dos equipamentos de proteção pessoal adequados e outras precauções devem ser sempre tomadas durante a realização deste procedimento.