Purification of High Yield Extracellular Vesicle Preparations Away from Virus

Catherine DeMarino; Robert  A. Barclay; Michelle  L. Pleet; Daniel  O. Pinto; Heather Branscome; Siddhartha Paul; Benjamin Lepene; Nazira El-Hage; Fatah Kashanchi

doi:10.3791/59876

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Imunologia e Infecção

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Purificação de preparações de vesículas extracelulares de alto rendimento longe do vírus

Purification of High Yield Extracellular Vesicle Preparations Away from Virus

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Purification of High Yield Extracellular Vesicle Preparations Away from Virus

Purificação de preparações de vesículas extracelulares de alto rendimento longe do vírus

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00:07 min

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September 12, 2019

DOI:

10.3791/59876-v

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10.3791/59876-v

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00:07 min

September 12, 2019

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Catherine DeMarino*¹, Robert A. Barclay*¹, Michelle L. Pleet¹, Daniel O. Pinto¹, Heather Branscome^1,2, Siddhartha Paul³, Benjamin Lepene⁴, Nazira El-Hage⁵, Fatah Kashanchi¹

¹Laboratory of Molecular Virology, School of Systems Biology,George Mason University ²American Type Culture Collection (ATCC)³ATCC Cell Systems ⁴Ceres Nanosciences, Inc ⁵Department of Immunology and Nano-medicine, Herbert Wertheim College of Medicine,Florida International University

Summary

Este protocolo isola vesículas extracelulares (EVs) longe de virions com alta eficiência e rendimento através da incorporação de precipitação EV, ultracentlee gradiente de densidade, e captura de partículas para permitir um fluxo de trabalho simplificado e uma redução de partida requisitos de volume, resultando em preparações reprodutíveis para uso em todas as pesquisas EV.