Name: Avaliação Hemodinâmica Invasiva para o Sistema Ventricular Direito e hipertensão arterial pulmonar induzida por hipóxia em camundongos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-24T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 54 s
Description: Aprenda avaliação hemodinâmica invasiva do ventrículo direito e artéria pulmonar em camundongos por cirurgia torácica aberta. Este método simultâneo de pressões é essencial para modelos de hipertensão arterial pulmonar.

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Esta pesquisa é apoiada pelo Projeto de Pós-Graduação em Educação e Reforma Do Ensino da Faculdade de Medicina da União de Pequim (10023-2016-002-03), pelo Fuwai Hospital Youth Fund (2018-F09) e pelo Fundo diretor do Laboratório-Chave de Pesquisa Pré-clínica de Pequim e Avaliação de Materiais de ImplanteS Cardiovasculares (2018-PT2-ZR05).

O protocolo animal foi revisado e aprovado pelo Institutional Animal Care and Use Committee no Fuwai Hospital, Chinese Academy of Medical Science, Peking Union Medical College (NO.0000287). Os animais experimentais foram alojados e alimentados de acordo com as diretrizes do bem-estar animal na China.
NOTA: Oito a 12 semanas de idade machos C57BL ratos foram alojados em um ambiente com um 12 h escuro / 12 h ciclo de luz. Os camundongos PAH foram alojados por 4 semanas uma concentração de oxigênio de 10%, mantidos por uma câmara de hipóxia controlada por oxigênio para induzir hipertensão pulmonar, e camundongos controle foram alojados no ar do quarto (21% de oxigênio) em condições idênticas. As medidas de RVP e PAP foram realizadas ao final das 4 semanas de desafio da hipóxia.
1. Preparação pré-operatória
<ol><li>Mergulhe o cateter transdutor de pressão (tamanho: 1 Fr) em 0,9% de soro lógico à temperatura ambiente por pelo menos 30 min antes do experimento hemodinâmico.</li>
	<li>Filtrar a solução de 2,2,2-Tribromoetanol com filtro de 0,22 μm e armazenar em refrigerador de 4 graus.</li>
	<li>Prepare ferramentas e suprimentos de cirurgia limpos, como luvas para cirurgia.</li>
	<li>Prepare 10 mL de 1,0% de solução de enzimas digestivas para limpeza de cateter.</li>
	<li>Conecte o cateter transdutor de pressão a um sistema de volume de pressão.</li>
	<li>Calibrar o transdutor de pressão antes de obter medidas de pressão para cada mouse.<ol>
<li>Vire o botão de calibração para 0 mmHg e 25 mmHg para enviar um sinal de pressão de verificação para o software de aquisição de dados e configurar a configuração de calibração no software.</li>
		<li>Vire o botão para Transducer e ajuste o botão de equilíbrio para a linha de base zero.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Configure um estereoscópio padrão e uma tabela cirúrgica animal pequena temperatura-controlada para a manutenção da temperatura de corpo durante a cirurgia.</li>
	<li>Configure um sistema de iluminação leve para microcirurgia para fornecer luz suficiente sobre a área cirúrgica.</li>
</ol>2. Cirurgia de peito aberto e medição hemodinâmica
<ol><li>Camundongos anestesios com 250 mg/kg de 2,2,2-Tribromoetanol via injeção intraperitoneal (i.p.). Se necessário, repita doses suplementares em 1/3 a 1/2 da dose original durante o procedimento.</li>
	<li>Retire a pele do peito e pescoço usando uma loção de barbear e depilação (Figura 1A, 2A).</li>
	<li>Fixe cada rato na posição supina em uma tabela cirúrgica animal pequena temperatura-controlada para ajudar a manter a temperatura de corpo (37 °C) durante a cirurgia.</li>
	<li>Limpe o local cirúrgico com 70% de etano.</li>
	<li>Uma vez que a anestesia está em vigor, confirme a indução adequada da anestesia usando uma pitada do dedo do dedo do dedo do dedo do dedo do dedo do dedo.</li>
	<li>Faça uma incisão midline na pele do pescoço(Figura 1A).</li>
	<li>Dissecar o músculo esquelético usando fórceps curvos e expor a traqueia (Figura 1B, 1C).</li>
	<li>Realize a intubação pela boca usando um cateter de bainha intravenosa modificado de 22 G. Confirme que a tubulação está na traqueia usando fórceps (Figura 1D).</li>
	<li>Ligue a tubulação a um pequeno ventilador de animais. Calcule e defina taxa de respiração e volume de marés com base no peso corporal de acordo com o manual do usuário do ventilador10. Por exemplo, defina a taxa de respiração para 133/min e volume de marés para 180 μL para um mouse de 30 g com base no cálculo descrito.</li>
	<li>Fixe a tubulação para ventilação usando a fita adesiva.</li>
	<li>Confirme a indução adequada da anestesia usando uma pitada do dedo do dedo do dedo do dedo do dedo.</li>
	<li>Faça uma incisão midline na pele do peito e dissecar cuidadosamente os músculos do peito usando uma ferramenta cautery (Figura 2B, 2C).</li>
	<li>Corte o esterno usando uma tesoura no meio e exponha a cavidade torácica(Figura 2D).</li>
	<li>Evite qualquer sangramento usando a ferramenta cautery durante o procedimento de cirurgia de caixa aberta.</li>
	<li>Expor o ventrículo direito com os retratores(Figura 2E).</li>
	<li>Insira o cateter transdutor de pressão salina através de um pequeno túnel criado com uma agulha de 25 G no ventrículo direito para medir RVP (Figura 2F e Figura 3A, 3C).</li>
	<li>Segure o cabo de cateter e atravesse a válvula pulmonar de forma coaxial com a artéria pulmonar. Observe a forma de onda de pressão e obtenha um sinal PAP estável (Figura 3B, 3D).</li>
	<li>Registre dados hemodinâmicos usando o sistema e o software de aquisição de dados.</li>
	<li>Após as medições finais, eutanásia ratos humanamente através de injeção de i.p. de uma dose excessiva de 2,2,2-Solução de Tribromoetanol.</li>
	<li>Retire cuidadosamente o cateter do sistema cardíaco direito e coloque em uma seringa de 1 mL contendo 1% de solução de enzima digestiva.</li>
	<li>Use água destilada para lavar continuamente o cateter com cuidado e armazená-lo na caixa original.</li>
</ol>3. Análise de dados para hemodinâmica
NOTA: Os dados hemodinâmicos foram registrados e analisados usando o software de análise11 (Tabela de Materiais).
<ol><li>Para cada mouse, selecione pelo menos 10 ciclos cardíacos contínuos e estáveis sem ruído para obter os dados médios dos dados de RVP ou PAP para cada parâmetro.</li>
	<li>Use o teste tdo estudante para comparar os grupos normais do controle de ar e da hipóxia. NOTA: p < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Os dados são apresentados como a média ± SD.</li>
</ol>

<ol><li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+therapeutic+interventions+for+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension.</a> Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).</li>
<li>Chatterjee, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Swan-Ganz+catheters%3A+past%2C+present%2C+and+future%3A+a+viewpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint.</a> Circulation. 119 (1), 147-152 (2009).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHAMPION+trial+rationale+and+design%3A+the+long-term+safety+and+clinical+efficacy+of+a+wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Failure%22%5BJournal%5D)">CHAMPION trial rationale and design: the long-term safety and clinical efficacy of a wireless pulmonary artery pressure monitoring system.</a> Journal of Cardiac Failure. 17 (1), 3-10 (2011).</li>
<li>Abraham, W. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+haemodynamic+monitoring+in+chronic+heart+failure%3A+a+randomised+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery haemodynamic monitoring in chronic heart failure: a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 377 (9766), 658-666 (2011).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+guides+management+to+reduce+decompensation+in+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery pressure monitoring guides management to reduce decompensation in heart failure with preserved ejection fraction.</a> Circulation: Heart Failure. 7 (6), 935-944 (2014).</li>
<li>Shatat, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Kruppel-like+Factor+4+modulates+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Endothelial Kruppel-like Factor 4 modulates pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 50 (3), 647-653 (2014).</li>
<li>SPR-1000 Mouse Pressure Catheter. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000">https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000</a> (2019).</li>
<li>Tabima, D. M., Hacker, T. A., Chesler, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+right+ventricular+function+in+the+normal+and+hypertensive+mouse+hearts+using+admittance-derived+pressure-volume+loops%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Measuring right ventricular function in the normal and hypertensive mouse hearts using admittance-derived pressure-volume loops.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 299 (6), 2069-2075 (2010).</li>
<li>Skuli, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+deletion+of+hypoxia-inducible+factor-2alpha+%28HIF-2alpha%29+alters+vascular+function+and+tumor+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Endothelial deletion of hypoxia-inducible factor-2alpha (HIF-2alpha) alters vascular function and tumor angiogenesis.</a> Blood. 114 (2), 469-477 (2009).</li>
<li>Harvard Inspira Advanced Safety Ventilator User's Manual. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.">http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.</a> (2019).</li>
<li>LabChart. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE">https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE</a> (2019).</li>
<li>Marius, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definitions+and+diagnosis+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension.</a> Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), 42-50 (2013).</li>
<li>Ciuclan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+murine+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (10), 1171-1182 (2011).</li>
<li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li>
<li>Chen, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+systolic+pressure+measurements+in+combination+with+harvest+of+lung+and+immune+tissue+samples+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Right ventricular systolic pressure measurements in combination with harvest of lung and immune tissue samples in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (71), 50023(2013).</li>
<li>Ma, Z., Mao, L., Rajagopal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+characterization+of+rodent+models+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic characterization of rodent models of pulmonary arterial hypertension.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), 53335(2016).</li>
<li>Chen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Berberine+attenuates+hypoxia-induced+pulmonary+arterial+hypertension+via+bone+morphogenetic+protein+and+transforming+growth+factor-%CE%B2+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Berberine attenuates hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension via bone morphogenetic protein and transforming growth factor-β signaling.</a> Journal of Cellular Physiology. , (2019).</li>
<li>Bueno-Beti, C., Hadri, L., Hajjar, R. J., Sassi, Y. The Sugen 5416/Hypoxia mouse model of pulmonary arterial hypertension. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBueno-Beti%2C+C+%22Experimental+Models+of+Cardiovascular+Diseases.+Methods+in+Molecular+Biology.+vol+1816%22">Experimental Models of Cardiovascular Diseases. Methods in Molecular Biology. vol 1816</a>. Ishikawa, K. , Humana Press. New York, NY. (2018).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

A intubação do traqueal é a primeira etapa importante para cirurgias da aberto-caixa. O método clássico de intubação traqueal para pequenos animais, como ratos ou camundongos, envolve fazer uma incisão em forma de T na traqueia e inserir diretamente tubos traqueais do tipo Y na traqueia. Na prática, descobrimos que este método não é fácil durante a operação. A tubulação do traqueal do Tipo Y é muito grande para pequenos animais e forma um ângulo com a traqueia. Assim, é difícil reparar a tubulação no lugar. Além disso, u...

A hipertensão arterial pulmonar (HAP) é uma doença cardiopulmonar crônica e grave com elevação da pressão arterial pulmonar (PAP) e pressão ventricular direita (RVP) causada pela proliferação celular e fibrose de pequenas artérias pulmonares 1. Cateteres de artéria pulmonar, também chamados de cateteres Swan-Ganz2,são comumente usados no monitoramento clínico de RVP e PAP. Além disso, um sistema de monitoramento PAP sem fio tem sido usado clinicamente3,4,5. Para imitar a doença para estudo em camundongos, um ambiente hipóxico é usado para simular manifestações clínicas humanas da HAP6. Na avaliação do PAP em animais, os animais de grande porte são relativamente fáceis de monitorar através de cateteres de artéria pulmonar usando a mesma técnica que para os seres humanos, mas pequenos animais, como ratos e camundongos, são difíceis de avaliar por causa de seu pequeno tamanho corporal. A medida hemodinâmica do sistema ventricular direito em camundongos é possível com um cateter ultrapequeno tamanho 1 Fr7. Um método para medir RVP e PAP em camundongos tem sido relatado na literatura8,9, mas a metodologia carece de uma descrição detalhada. RVP e PAP são mais desafiadores para medir do que a pressão ventricular esquerda por causa das diferenças anatômicas entre os sistemas cardíaco esquerdo e direito.
Para obter parâmetros PAP e RVP no mesmo mouse, descrevemos uma abordagem baseada em cirurgia de caixa aberto para medições hemodinâmicas do coração direito, sua validação com camundongos saudáveis e PAH e como evitar a geração de dados artificiais durante o complicado peito aberto Cirurgia. Embora esta técnica seja melhor executada por um cirurgião bem treinado, tem a vantagem de poder avaliar pap e RVP no mesmo rato.

<table><tbody><tr><td>2,2,2-Tribromoethanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T48402-5G</td><td>para o</td></tr><tr><td>controlador de temperatura animal</td><td>Physitemp Instruments da anestesia, Inc.</td><td>TCAT-2LV</td><td>Para controle de temperatura</td></tr><tr><td>Pinça de dissecção</td><td>Fine Science Tools, Inc.</td><td>11274-20</td><td>Para cirurgia</td></tr><tr><td>Gemini Cautery System</td><td>Gemini</td><td>GEM 5917</td><td>Para cirurgia</td></tr><tr><td>Cateter intravenoso (22G)</td><td>BD angiocath</td><td>381123</td><td>Para intubação</td></tr><tr><td>LabChart 7.3</td><td>ADInstruments</td><td></td><td>Para análise de dados</td></tr><tr><td>Sistema de iluminação de luz</td><td>Olympus</td><td></td><td>Para cirurgia</td></tr><tr><td>Cateter Mikro-Tip</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>SPR-1000</td><td>Para medição de pressão</td></tr><tr><td>Millar Pressure-Volume Systems</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>MVPS-300</td><td>Para medição de pressão</td></tr><tr><td>Controlador de O2 e câmara de hipóxia</td><td>Biospherix</td><td>ProOx 110</td><td>Para hipóxia crônica</td></tr><tr><td>Sistema de aquisição de dados PowerLab</td><td>ADInstruments</td><td>PowerLab 16/30</td><td>Para gravação de</td></tr> <tr><td></td><td>dados TesouraFerramentas de Belas Ciências, Inc.</td><td>14084-08</td><td>Para cirurgia</td></tr><tr><td>Ventilador para pequenos animais</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Mini-Vent 845</td><td>Para cirurgia</td></tr><tr><td>Estereomicroscópio</td><td>Olympus</td><td>SZ61</td><td>Para cirurgia</td></tr><tr><td>Fita cirúrgica</td><td>3M</td><td></td><td>Para cirurgia</td></tr><tr><td>Enzima Terg-a-zyme</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z273287-1EA</td><td>Para limpeza de cateteres</td></tr></tbody></table>

avaliação hemodinâmica invasiva para o sistema ventricular direito e hipertensão arterial pulmonar induzida por hipóxia em camundongos

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

A hipertensão arterial pulmonar (HAP) é uma doença cardiopulmonar crônica e grave. Os ratos são um modelo animal popular usado para imitar esta doença. No entanto, a avaliação da pressão ventricular direita (RVP) e da pressão pulmonar da artéria (PAP) permanece tecnicamente desafiadora em camundongos. RVP e PAP são mais difíceis de medir do que a pressão ventricular esquerda por causa das diferenças anatômicas entre os sistemas cardíaco esquerdo e direito. Neste artigo, descrevemos um método de medição hemodinâmica do coração direito estável e sua validação usando camundongos saudáveis e PAH. Este método é baseado na cirurgia open-chest e na sustentação mecânica da ventilação. É um procedimento complicado em comparação com procedimentos torácicos fechados. Enquanto um cirurgião bem treinado é necessário para esta cirurgia, a vantagem deste procedimento é que ele pode gerar parâmetros rvp e PAP ao mesmo tempo, por isso é um procedimento preferível para a avaliação dos modelos de HAP.

O cateter transdutor de pressão foi inserido no ventrículo direito(Figura 3A)através de um túnel expandido por uma agulha de 25 G, e uma forma de onda RVP típica (Figura 3C)foi obtida. O cateter foi continuamente ajustado e avançado lentamente e mantido no mesmo eixo que a artéria pulmonar ao passar pela válvula pulmonar(Figura 3B). Quando o sensor de pressão foi inserido com sucess...

Aqui, apresentamos um protocolo para realizar uma avaliação hemodinâmica invasiva do ventrículo direito e artéria pulmonar em camundongos usando uma abordagem de cirurgia de caixa aberta.

Avaliação Hemodinâmica Invasiva para o Sistema Ventricular Direito e hipertensão arterial pulmonar induzida por hipóxia em camundongos

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

Este protocolo é uma avaliação hemodinâmica baseada em cirurgia torácica aberta e é útil para a avaliação de pressão ventricular e pulmonar direita em pequenos animais, como camundongos. A vantagem deste procedimento é que ele pode gerar parâmetros VP e PAP ao mesmo tempo. Por isso, é preferível para avaliações de modelos PAH.Comece montando o equipamento para a cirurgia. Mergulhe o cateter transdutor de pressão em 0,9% salino à temperatura ambiente por pelo menos 30 minutos antes do experimento hemodinâmico. Em seguida, conecte o cateter a um sistema de volume de pressão.Calibrar o transdutor de pressão girando o botão de calibração para zero e 25 milímetros de mercúrio para enviar um sinal de pressão de verificação para o software de aquisição de dados e, em seguida, configurar a configuração de calibração. Gire o botão para o transdutor e ajuste a válvula de equilíbrio para zero de linha de base. Configure um microscópio estéreo padrão, mesa cirúrgica de pequeno animal controlada pela temperatura e um sistema de iluminação leve para microcirurgia.Uma vez que o rato esteja devidamente anestesiado, remova a pele do peito e do pescoço usando uma máquina de barbear e loção de depilação. Fixar o mouse na posição supina na mesa cirúrgica controlada pela temperatura. Depois de garantir que a anestesia esteja em vigor, faça uma incisão midline na pele do pescoço.Disseque o músculo esquelético usando fórceps curvos e exponha a traqueia. Realizar intubação pela boca com um cateter de bainha intravenosa de 22 bitolas, confirmando que o tubo está na traqueia com fórceps. Conecte a tubulação a um pequeno ventilador animal e fixe-o para ventilação usando fita adesiva.Em seguida, faça uma incisão midline na pele do peito e disseca cuidadosamente o músculo torácico usando uma ferramenta de cauteria. Corte o esterno usando uma tesoura no meio, e exponha a cavidade torácica. Certifique-se de evitar qualquer sangramento usando a ferramenta cautery.Exponha o ventrículo direito com retráteis e, em seguida, insira o cateter transdutor de pressão embebido salino através de um pequeno túnel criado com uma agulha de calibre 25 no ventrículo direito para medir a pressão ventricular direita, ou RVP. Segure o cabo do cateter e cruze a válvula pulmonar de forma coaxial com a artéria pulmonar. Observe a forma de onda de pressão e obtenha uma pressão arterial pulmonar estável ou sinal PAP.Em seguida, registo os dados hemodinâmicos usando o software de aquisição de dados. Remova cuidadosamente o cateter do sistema cardíaco direito e coloque-o em uma seringa de um mililitro contendo solução de enzima digestiva de 1%. Este protocolo foi usado com sucesso para obter formas de onda RVP e PAP em camundongos, inserindo um cateter transdutor de pressão no ventrículo direito e na artéria pulmonar.Para evitar a geração de dados artificiais, segmentos com ruído foram excluídos da análise de dados e correções foram feitas se o nível zero do cateter tivesse derivado. RVP e PAP foram medidos em camundongos com hipóxia crônica induzida, e os resultados foram comparados aos obtidos de um grupo controle. PAP sistólica, PAP diastólica, PAP médio e pressão sistólica ventricular direita foram significativamente aumentadas no grupo de hipóxia crônica.A coisa mais importante a se lembrar é inserir o cateter transdutor de pressão no ventrículo direito cuidadosamente, certificando-se de evitar danos ao cateter e confirmar que a forma de onda RVP lisa aparece na tela.

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Um protocolo específico e rápido para pesquisar, simultaneamente, a função cardíaca direita, inflamação pulmonar, e da resposta imunológica é descrito como uma ferramenta de aprendizagem. Vídeo e figuras descrevem fisiologia e técnicas de microdissecção em um grupo organizado abordagem, que é adaptável a ser utilizado para as pequenas e grandes estudos porte.

Sistólica do ventrículo direito Medição de Pressão em combinação com colheita de amostras de tecido pulmonar e imunológica em ratos

Este artigo fornece um protocolo para a avaliação ecocardiográfica do tamanho do ventrículo direito e hipertensão pulmonar em camundongos. As aplicações incluem a determinação do fenótipo e avaliação de série em modelos de ratos transgênicos e induzida por toxinas de miocardiopatia e doença vascular pulmonar.

Avaliação ecocardiográfica do coração direito em Ratos

Ventrículo direito (VD) disfunção é fundamental para a patogênese da doença cardiovascular, ainda metodologias limitados estão disponíveis para a sua avaliação. Recentes avanços em ultra-sonografia fornecer uma opção não invasiva e precisas para o estudo RV longitudinal. Aqui, temos um método ecocardiográfico passo-a-passo através de um modelo murino de sobrecarga de pressão RV detalhes.

Avaliação da Estrutura e Função do Ventrículo Direito em modelo de camundongo Pulmonary Artery constrição por Ecocardiografia transtorácica

A hipertensão arterial pulmonar (HAP) é uma doença das arteríolas pulmonares que leva à sua obliteração e ao desenvolvimento de insuficiência ventricular direita. Modelos de HAP em roedores são essenciais para a compreensão da fisiopatologia da HAP. Aqui demonstramos a caracterização hemodinâmica, com cateterismo cardíaco direito e ecocardiografia, em camundongos e ratos.

Hemodinâmica Caracterização de roedores modelos de Hipertensão Arterial Pulmonar

Apresentamos um protocolo de criação de disfunção ventricular direita em um modelo de porco através da indução de SDRA. Demonstramos que a monitorização invasiva da esquerda e da direita de débito cardíaco ventricular usando fluxo de sondas ao redor da aorta e a artéria pulmonar, bem como medições de pressão arterial na aorta e artéria pulmonar.

Monitorização hemodinâmica invasiva da hemodinâmica da artéria aórtica e pulmonar em um grande modelo Animal de SDRA

Este protocolo descreve a indução da hipertensão pulmonar (PH) em camundongos com base na exposição à hipóxia e na injeção de um antagonista receptor VEGF. Os animais desenvolvem hipertrofia ph e ventricular direita (RV) 3 semanas após o início do protocolo. A caracterização funcional e morfométrica do modelo também é apresentada.

Indução e Caracterização da Hipertensão Pulmonar em Camundongos usando o Modelo De Hypoxia/SU5416

Aqui, nós fornecemos uma aproximação útil para estudar o mecanismo da falha ventricular direita. Uma aproximação mais conveniente e mais eficiente à constrição da artéria pulmonaa é estabelecida usando instrumentos cirúrgicos feitos inhouse. Além disso, são fornecidos métodos para avaliar a qualidade dessa abordagem por ecocardiografia e cateterismo.

Indução de insuficiência ventricular direita por constrição da artéria pulmonar e avaliação da função ventricular direita em camundongos

O presente protocolo descreve a caracterização ecocardiográfica da morfologia e função do ventrículo direito em um modelo de hipertensão arterial pulmonar em ratos.

Avaliação Ecocardiográfica Abrangente da Função do Ventrículo Direito em Modelo de Hipertensão Arterial Pulmonar em Rato

Este protocolo fornece um procedimento passo-a-passo para a execução da administração de múltiplas doses intravenosas em bolus e monitorização hemodinâmica invasiva em camundongos. Os investigadores podem usar esse protocolo para futura triagem terapêutica de compostos para hipertensão arterial pulmonar.

Dosagem Múltipla em Bolus Intravenoso e Avaliação Hemodinâmica Invasiva em Modelo de Hipertensão Arterial Pulmonar em Camundongos Induzida por Hipóxia

A apresentação de métodos detalhados para a avaliação da função do ventrículo direito aumentará a qualidade e a confiabilidade da pesquisa sobre hipertensão pulmonar, oferecendo uma estrutura robusta para estudos futuros e aumentando a reprodutibilidade em diferentes laboratórios.

Avaliação da Função Ventricular Direita em Modelos Experimentais de Hipertensão Arterial Pulmonar

Aprenda avaliação hemodinâmica invasiva do ventrículo direito e artéria pulmonar em camundongos por cirurgia torácica aberta. Este método simultâneo de pressões é essencial para modelos de hipertensão arterial pulmonar.

Avaliação Hemodinâmica Invasiva para o Sistema Ventricular Direito e hipertensão arterial pulmonar induzida por hipóxia em camundongos (Vídeo) | JoVE Journal

Avaliação Hemodinâmica Invasiva para o Sistema Ventricular Direito e hipertensão arterial pulmonar induzida por hipóxia em camundongos

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