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DOI: 10.3791/60541-v
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Apresentado aqui é um protocolo para detectar a produção de armadilha extracelular de macrófagos (MET) na cultura celular ao vivo usando microscopia e mancha de fluorescência. Este protocolo pode ser estendido para examinar marcadores específicos da proteína met por coloração de imunofluorescência.
A liberação de armadilhas extracelulares por neutrófilos e outras células imunes é importante na imunidade inata, mas também fortemente ligada a patologias inflamatórias. Muito pouco se sabe sobre esse processo em macrófagos, embora essas células tenham um papel crítico na resposta inflamatória. Este protocolo fornece um modelo humano primário in vitro de captura extracelular ou liberação de mastro.
Ele fornece um modelo para estudarmos um potencial crescimento fisiológico dessa estrutura in vivo. A principal vantagem dessa técnica é que as células deste protocolo são células primárias isoladas das preparações do casaco de buffy humano. Não é necessário um passo de escoramento para diferenciar o monócito em macrófagos, o que contrasta com outras linhas celulares monocitos, como a linha celular THP-1.
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