Name: Modelo de Subatividade do Detrusor em Ratos por Transecção de Conus Medullaris (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-08-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 26 s
Description: Aprenda a criar um modelo de subatividade do detrusor em ratos por transecção do conus medullaris. Este método permite estudar a fisiopatologia da bexiga e avaliar intervenções terapêuticas.

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Todos os ratos foram utilizados de acordo com protocolos aprovados pelo Comitê Experimental Animal do Beijing Friendship Hospital, Capital Medical University.
1. Preparação cirúrgica, anestesia e técnicas cirúrgicas
NOTA: Um total de 40 ratas Wistar, pesando 200–220 g, foram obtidas comercialmente para o presente estudo. Dos 40 ratos, 10 foram selecionados aleatoriamente como o grupo controle, e o restante foi tratado como o grupo teste. Todos os animais foram alojados em um ambiente estéril nas instalações de animais do Hospital da Amizade de Pequim, da Universidade Médica da Capital.
<ol><li>Realizar anestesia geral administrando pentobarbital sódico por via intraperitoneal (40 mg/kg). Alternativamente, induza a anestesia usando isoflurano a 3%-4% e mantenha-o em 1%-3% (inalado). Aplique pomada oftálmica nos olhos para evitar o ressecamento. Em seguida, coloque o rato na plataforma cirúrgica e forneça suporte térmico. NOTA: Administrar analgésicos como buprenorfina, 0,05 mg/kg, SC, 0,1-0,2 mL no início do procedimento.</li>
	<li>Verifique a profundidade da anestesia pela falta de resposta à pinça do dedo do pé. Raspe a pele de toda a área das costas com uma navalha.</li>
	<li>Esterilizar o local cirúrgico com pelo menos 3 ciclos de um esfoliante de dois estágios, como clorexidina ou iodopovidona, seguido de álcool isopropílico. Prenda os membros com fita cirúrgica e faça uma incisão mediana de cerca de 3 cm nas costas com tesoura cirúrgica.</li>
	<li>Aprofunde a incisão através dos tecidos subcutâneos usando tesoura cirúrgica e corte os músculos ligados à coluna vertebral.</li>
	<li>Identifique e exponha visualmente a13ª costela (o espaço intervertebral conectado a essa costela é o intervalo T13\u2012L1). Marque a13ª costela usando uma sutura.</li>
	<li>Após a identificação, ressecte cuidadosamente os músculos ligados à coluna vertebral e exponha a coluna vertebral. Ressecção o ligamento supraespinhoso e o ligamento interespinhoso para uma identificação precisa da coluna vertebral. Exponha o nível de L4\u2012L5 com tesoura cirúrgica e pinça. NOTA: O ligamento supraespinhoso pode ser facilmente identificado devido à presença de tecido subcutâneo fino. Após a ressecção do ligamento supraespinhoso, o ligamento entre o processo espinhoso é o ligamento interespinhoso.</li>
	<li>Dissecar cuidadosamente o processo espinhoso vertebral L4\u2012L5 e partes do processo transversal usando pinça de Kelly para expor a medula espinhal (Figura 1).</li>
	<li>Expor completamente o cone medular ao nível de L4\u2012L5 e transecto o cone medular totalmente com tesoura de iridectomia. Insira um pouco de embalagem de tecido para bloquear a recuperação da medula espinhal.</li>
	<li>Feche o músculo e a pele sobrejacentes na camada externa da pele usando sutura não absorvível 4-0.</li>
	<li>Para o grupo controle, execute as etapas 1.1 a u20121.7 e deixe o cone medular intacto. Feche a incisão de acordo com o passo 1.9.</li>
</ol>2. Recuperação de animais
<ol><li>Manter os ratos numa incubadora com temperatura controlada (37 °C) durante a primeira hora após a operação e monitorizá-los até que estejam esternais ou em movimento ativo. NOTA: Demora cerca de meia hora para a recuperação total.</li>
	<li>Transfira o animal para uma gaiola limpa com comida e água suficientes. Mantenha os ratos em gaiolas separadas. NOTA: O sucesso da transecção é indicado quando os ratos do grupo de teste se movem apenas com a ajuda das patas dianteiras, enquanto os ratos do grupo controle podem andar normalmente.</li>
</ol>3. Gestão pós-operação
<ol><li>Injete Penicilina G, um antibiótico (50.000 U/mL por animal) por via intraperitoneal. Administrar analgésicos como buprenorfina, 0,05 mg/kg, SC, 0,1-0,2 mL a cada 6-12 h por 48 horas após a operação.</li>
	<li>Comprima a bexiga urinária no hipogástrio para ajudar com a micção. Realize isso duas vezes ao dia no mesmo horário (8h e 20h) por seis semanas. NOTA: A perda de constrição normal do detrusor é o símbolo de DU.</li>
	<li>Coloque todos os ratos em gaiolas metabólicas, cada uma contendo um funil de coleta de urina colocado sobre um papel absorvente previamente pesado para monitorar a micção e a incontinência.</li>
	<li>Coletar e observar a mudança de peso do papel absorvente, que indica o volume anulado (VV) e o volume residual de urina separadamente.</li>
</ol>4. Teste urodinâmico
<ol><li>Às seis semanas de pós-operatório, realizar um cistometrograma, utilizando o equipamento de medição urodinâmica da seguinte forma.<ol><li>Anestesiar ratos injetando 10% de hidrato de cloral na cavidade peritoneal (3 mL/kg).</li>
		<li>Comprima a bexiga para micção e, em seguida, fixe o rato à plataforma cirúrgica usando uma fita.</li>
		<li>Insira o cateter peridural (3F) na bexiga e conecte o equipamento de medição urodinâmica, o cateter peridural e a bomba de infusão pelo tubo de três membros.</li>
		<li>Bombear solução salina fisiológica a uma velocidade de 0,2 mL/min para medição urodinâmica (ver Tabela de Materiais). Registre o CCM e o DOP, e a complacência da bexiga (calculada dividindo δ volume da bexiga com δ pressão do detrusor).</li>
	</ol></li>
</ol>5. Análise estatística
<ol><li>Realizar análises estatísticas utilizando software comercialmente disponível.</li>
	<li>Use o teste de Kolmogorov-Smirnov para testar a normalidade dos dados.</li>
	<li>Expresse as variáveis normalmente distribuídas como valores médios com desvios-padrão. Use os testes t de Student pareados bicaudais para comparar os parâmetros do cistometrograma em ambos os grupos. NOTA: p < 0,05 indica que a diferença teve significância estatística.</li>
</ol>

<ol><li>van Koeveeringe, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrusor+underactivity%3A+Pathophysiological+considerations%2C+models+and+proposals+for+future+research%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">Detrusor underactivity: Pathophysiological considerations, models and proposals for future research.</a> Neurourology and Urodynamics. 33 (5), ICI-RS 2013 591-596 (2014).</li>
<li>Osman, N. I., Esperto, F., Chapple, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrusor+Underactivity+and+the+Underactive+Bladder%3A+A+Systematic+Review+of+Preclinical+and+Clinical+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22European+Urology%22%5BJournal%5D)">Detrusor Underactivity and the Underactive Bladder: A Systematic Review of Preclinical and Clinical Studies.</a> European Urology. 74 (5), 633-643 (2018).</li>
<li>Osman, N. I., Chapple, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contemporary+concepts+in+the+aetiopathogenesis+of+detrusor+underactivity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Urology%22%5BJournal%5D)">Contemporary concepts in the aetiopathogenesis of detrusor underactivity.</a> Nature Reviews. Urology. 11 (11), 639-648 (2014).</li>
<li>Panicker, J. N., Nagaraja, D., Kovoor, J. M. E., Nair, K. P. S., Subbakrishna, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lower+urinary+tract+dysfunction+in+acute+disseminated+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22Multiple+Sclerosis%22%5BJournal%5D)">Lower urinary tract dysfunction in acute disseminated encephalomyelitis.</a> Multiple Sclerosis. 15 (9), Houndmills, Basingstoke, England. 1118-1122 (2009).</li>
<li>Lee, W. C., Wu, H. P., Tai, T. Y., Yu, H. J., Chiang, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+urodynamic+characteristics+and+bladder+sensory+function+in+the+early+stages+of+diabetic+bladder+dysfunction+in+women+with+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Investigation of urodynamic characteristics and bladder sensory function in the early stages of diabetic bladder dysfunction in women with type 2 diabetes.</a> The Journal of Urology. 181 (1), 198-203 (2009).</li>
<li>Araki, I., Kitachara, M., Oida, T., Kuno, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voiding+dysfunction+and+Parkinson%E2%80%99s+disease%3A+urodynamic+abnormalities+and+urinary+symptoms%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Voiding dysfunction and Parkinson’s disease: urodynamic abnormalities and urinary symptoms.</a> The Journal of Urology. 164 (5), 1640-1643 (2000).</li>
<li>Meng, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incomplete+bladder+emptying+in+patients+with+stroke%3A+is+detrusor+external+sphincter+dyssynergia+a+potential+cause%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Physical+Medicine+and+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Incomplete bladder emptying in patients with stroke: is detrusor external sphincter dyssynergia a potential cause.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 91 (7), 1105-1109 (2010).</li>
<li>FitzGerald, M. P., Brubaker, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+etiology+of+urinary+retention+after+surgery+for+genuine+stress+incontinence%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">The etiology of urinary retention after surgery for genuine stress incontinence.</a> Neurourology and Urodynamics. 20 (1), 13-21 (2001).</li>
<li>Rahman, M., Siddik, A. B. Neuroanatomy, Pontine Micturition Center. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRahman%2C+M+%22StatPearls%22">StatPearls</a>. , (2020).</li>
<li>Wrobel, A., Lancut, M., Rechberger, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+detrusor+overactivity+in+conscious+rats+induced+by+retinyl+acetate+instillation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">A new model of detrusor overactivity in conscious rats induced by retinyl acetate instillation.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 74 (7), 16(2015).</li>
<li>Rosenzweig, E. S., McDonald, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+for+treatment+of+spinal+cord+injury%3A+research+trends+and+progress+toward+useful+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">Rodent models for treatment of spinal cord injury: research trends and progress toward useful repair.</a> Current Opinion in Neurology. 17 (2), 121-131 (2004).</li>
<li>Yoo, K. H., Lee, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+animal+models+of+neurogenic+bladder+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22International+Neurourology+Journal%22%5BJournal%5D)">Experimental animal models of neurogenic bladder dysfunction.</a> International Neurourology Journal. 14 (1), 1-6 (2010).</li>
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<li>Seki, T., Hida, K., Tada, M., Koyanagi, I., Iwasaki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graded+contusion+model+of+the+mouse+spinal+cord+using+a+pneumatic+impact+device%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Graded contusion model of the mouse spinal cord using a pneumatic impact device.</a> Neurosurgery. 50 (5), discussion 1081-1082 1075-1081 (2002).</li>
<li>Yeo, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+rat+model+of+graded+contusive+spinal+cord+injury+using+a+pneumatic+impact+device%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Development of a rat model of graded contusive spinal cord injury using a pneumatic impact device.</a> Journal of Korean Medical Science. 19 (4), 574-580 (2004).</li>
<li>Bergman, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+transplants+permit+the+growth+of+serotonergic+axons+across+the+site+of+neonatal+spinal+cord+transection%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Spinal cord transplants permit the growth of serotonergic axons across the site of neonatal spinal cord transection.</a> Brain Research. 431 (2), 265-279 (1987).</li>
<li>Chancellor, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Underactive+bladder%3B+Review+of+progress+and+impact+from+the+International+CURE-UAB+Initiative%5BTitle%5D)+AND+%22International+Neurourology+Journal%22%5BJournal%5D)">Underactive bladder; Review of progress and impact from the International CURE-UAB Initiative.</a> International Neurourology Journal. 24 (1), 3-11 (2020).</li>
<li>Pfisterer, M. H. D., Griffiths, D. J., Schaefer, W., Resnick, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+age+on+lower+urinary+tract+function%3A+a+study+in+women%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Geriatrics+Society%22%5BJournal%5D)">The effect of age on lower urinary tract function: a study in women.</a> Journal of the American Geriatrics Society. 54 (3), 405-412 (2006).</li>
<li>Duchen, L. W., Anjorin, A., Watkins, P. J., Mackay, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+autonomic+neuropathy+in+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pathology of autonomic neuropathy in diabetes mellitus.</a> Annals of Internal Medicine. 92 (2), 301-303 (1980).</li>
<li>Schneider, T., Hein, P., Bai, J., Michel, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+muscarinic+receptors+or+rho-kinase+in+hypertension+associated+rat+bladder+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urologoy%22%5BJournal%5D)">A role for muscarinic receptors or rho-kinase in hypertension associated rat bladder dysfunction.</a> The Journal of Urologoy. 173 (6), 2178-2181 (2005).</li>
<li>Drake, M. J., Harvey, I. J., Gillespie, J. I., Van Duyl, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localized+contractions+in+the+normal+human+bladder+and+in+urinary+urgency%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">Localized contractions in the normal human bladder and in urinary urgency.</a> BJU International. 95 (7), 1002-1005 (2005).</li>
<li>Suskind, A. M., Smith, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+look+at+detrusor+underactivity%3A+impaired+contractility+versus+afferent+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Urology+Reports%22%5BJournal%5D)">A new look at detrusor underactivity: impaired contractility versus afferent dysfunction.</a> Current Urology Reports. 10 (5), 347-351 (2009).</li>
<li>Osman, N. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrusor+underactivity+and+the+underactive+bladder%3A+A+new+clinical+entity%3F+A+review+of+current+terminology%2C+definitions%2C+epidemiology%2C+aetiology%2C+and+diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Urology%22%5BJournal%5D)">Detrusor underactivity and the underactive bladder: A new clinical entity? A review of current terminology, definitions, epidemiology, aetiology, and diagnosis.</a> European Urology. 65 (2), 389-398 (2014).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a revelar.

O DU é uma causa comum de sintomas do trato urinário inferior em homens e mulheres. É uma constelação complexa de sintomas com poucas opções de tratamento que podem diminuir significativamente a qualidade de vida (QV) dos acometidos18. Embora se acredite que o DU seja multifatorial, a compreensão de sua patogênese permanece rudimentar. Estudos têm demonstrado que a patogênese do DU pode estar relacionada a fatores miogênicos e neurogênicos.
Nas hipóteses miogênicas, obs...

A subatividade do detrusor (UD) é uma disfunção típica do trato urinário inferior que permaneceu sob estudo. Embora a DU tenha sido definida pela International Continence Society (ICS)1, inúmeras terminologias diferentes são usadas para se referir a essa doença, por exemplo, "falha do detrusor", "bexiga acontrátil", "arreflexia do detrusor"2. A DU, conforme definida pela International Continence Society (ICS) em 2002, é uma contração de força e duração reduzidas, o que resulta em aumento prolongado no tempo de esvaziamento da bexiga, resultando assim na incapacidade de alcançar o esvaziamento completo da bexiga dentro de um período normal.
A DU pode acometer 48% dos homens e 12% das mulheres (com idade entre >70 anos)3 com sintomas do trato urinário inferior. Parece ser multifatorial, e não existe tratamento eficaz. É relatado que o DU é onipresente em pacientes com disfunção vesical neurogênica, como esclerose múltipla4, diabetes mellitus5, doença de Parkinson6 ou acidente vascular cerebral7. A DU também pode ser causada por danos nos nervos iatrogênicos, como histerectomia laparoscópica, prostatectomia ou outras intervenções cirúrgicas na pequena pelve8. As alterações fisiopatológicas e os tratamentos disponíveis de DU ainda são confusos devido à falta de um modelo animal apropriado para estudo.
O reflexo miccional é controlado por vias espino-bulboespinhais que combinam o centro de micção pontina, o núcleo parassimpático sacral e os centros do córtex mais sênior9. A ativação e a manutenção do reflexo da micção dependem principalmente do transporte regular de sinais sensoriais da bexiga para os centros do córtex mais sênior. Pode-se postular que a disfunção sensorial contribui para a UD.
A maioria dos estudos experimentais em animais relacionados a disfunções do trato urinário inferior tem se concentrado em modelos de bexiga hiperativa (OAB)10. Esses modelos fornecem uma compreensão razoável da fisiopatologia e do prognóstico da OAB. No entanto, apenas alguns modelos de DU foram relatados, por exemplo, lesão supraespinhal (lesões locais, descerebração e oclusão da artéria cerebral média), transecção ou lesão por contusão da medula espinhal, administração sistêmica (por exemplo, ciclofosfamida) ou intravesical de agentes irritantes ou inflamatórios (por exemplo, ácido, acroleína e lipopolissacarídeo)11,12,13,14 . Dentre esses métodos, apenas o método de transecção da medula espinhal ou lesão por contusão pode ser utilizado no estabelecimento de um modelo animal de DU13. Tentativas envolvendo a lesão do centro de micção pontino e dos centros do córtex superior foram abandonadas por causa do trauma grave. Assim, uma maior atenção está sendo dada para encontrar uma localização precisa no centro reflexo da micção para induzir o DU com efeitos colaterais mínimos.
Como mencionado anteriormente, um dos mecanismos de indução de DU é ferir a medula espinhal para danificar a via de sinalização do reflexo miccional. O método de queda de peso de Allen foi desenvolvido para estabelecer animais de laboratório com medula espinhal lesada15. No entanto, não existem mais dados experimentais disponíveis sobre este método. Além disso, uma vez que partes dos animais recuperaram a função espinhal após acidente vascular cerebral sem UD, não pode ser considerado como um método perfeito para gerar um modelo animal de DU16.
Em 1987, Bregman excogitou um processo de transectação da medula espinhal para geração do modelo animal de DU e adquiriu dados experimentais17. No entanto, esse método não foi aplicado para estabelecer o modelo animal de urânio empobrecido. Naquela época, os pesquisadores ainda estavam confusos sobre a patogênese da DU. Como os locais na medula espinhal associados à indução de OAB ou DU são adjacentes entre si, eles não conseguiram encontrar o local exato de dano à medula espinhal para induzir o DU17. A OAB e o DU foram introduzidos em conjunto ou separadamente por este método. Assim, embora esse método tenha introduzido a UD, ela era imprecisa e não podia ser usada para a compreensão da ocorrência e do processamento da UD.
Como dito acima, a falta de um modelo animal adequado de DU é um dos principais obstáculos para o estudo de DU. Os pesquisadores estão continuamente procurando um modelo preciso e gerenciável que possa simular a patologia da DU. Mesmo as opções de tratamento para DU não melhoraram significativamente durante os últimos 20 anos. Coletivamente, há uma grande necessidade de descrever um protocolo padrão para estabelecer um modelo animal de DU.
Assim, neste artigo, descrevemos um método para estabelecer com sucesso um modelo de DU em ratos por transecção do cone medular. A transecção foi realizada no nível L4\u2012L5 para separar o cone medular. A capacidade cistométrica máxima (CCM), a pressão de abertura do detrusor (POD) e a complacência da bexiga foram registradas e analisadas para validação do protocolo. O protocolo a seguir combinado viabilidade e confiabilidade de forma padronizada para estabelecer o modelo animal de DU, simulando a ocorrência e o processamento de DU. O protocolo pode ser utilizado como técnica para posterior estudo da UD.

<table><tbody><tr><td>Bomba salina a 0,9%</td><td>Wuhan Prosai Company</td><td>EY-C1178</td><td>para medição urodinâmica</td></tr><tr><td>10% de hidrato de cloral</td><td>Shandong Yulong Co., Ltd</td><td>H37022673</td><td>3mL / kg, administrada por injeção intraperitoneal</td></tr> de <tr><td>cloridrato de buprenorfina</td><td>Tianjin Pharmaceutical Research Institute Pharmaceutical Co. LTD</td><td>H12020275</td><td>0,05mg / kg por via subcutânea 24h e 48h pós-operatório</td></tr><tr><td>Cateter epidural</td><td>Shandong Xinghua Co, Ltd</td><td>VABR3L</td><td>para medição urodinâmica</td></tr><tr><td>Penicilina G</td><td>Alta Technology Co., Ltd</td><td>1ST5637</td><td>50.000 unidade/ml por animal</td></tr><tr><td>pentobarbital</td><td>Beijing solabo Technology Co., Ltd</td><td>NK-WF0001</td><td>40 mg/kg, administrado por via intraperitoneal</td></tr><tr><td>Linha de sutura (4-0)</td> <td>ETHICON</td><td>VCP422H</td><td>suturar a lesão</td></tr><tr><td>Tubo de três membros</td><td>Shandong Xinghua Co, Ltd</td><td>VAB3T</td><td>para medição urodinâmica</td></tr><tr><td>Bomba de infusão de traços</td><td>Zhejiang Smith Medical Instrument Co., Ltd</td><td>20162540335</td><td>Bombeie a solução salina a uma velocidade de 0,2 ml / min para medição urodinâmica</td></tr><tr><td>Equipamento de medição urodinâmica</td><td>Medical Measurement SystemsBV</td><td>08-0467</td><td>O equipamento de medição urodinâmica pode não apenas ajudar no diagnóstico de disúria, mas também fornecer materiais objetivos para tratamento e efeito terapêutico. É o método de exame mais comumente usado no diagnóstico clínico e tratamento de doenças funcionais do trato urinário inferior</td></tr><tr><td>Wistar</td><td>Rats HFK Biotechnology Co.Ltd, Pequim, China</td><td>SCXK2012-0023</td><td>200-220g</td></tr></tbody></table>

modelo de subatividade do detrusor em ratos por transecção de conus medullaris

Detrusor Underactivity Model in Rats by Conus Medullaris Transection

O objetivo do protocolo apresentado foi estabelecer um modelo de subatividade do detrusor (UD) em ratos através da transecção do cone medular. A laminectomia foi realizada em um total de 40 ratas Wistar (grupo controle: 10 ratos; grupo teste: 30 ratos) pesando 200–220 g, e o cone medular foi transectado no nível L4\u2012L5 no grupo teste. Todos os ratos foram alojados e alimentados sob as mesmas condições ambientais por seis semanas. No grupo teste, a micção da urina foi realizada duas vezes ao dia por seis semanas, e o volume residual médio de urina foi registrado. Um cistometrograma foi realizado em ambos os grupos. A capacidade cistométrica máxima (CCM), a pressão de abertura do detrusor (DOP) e a complacência da bexiga foram registradas e calculadas. O grupo teste apresentou retenção urinária significativa após a cirurgia, tanto durante quanto após o choque espinhal. No entanto, nenhuma anormalidade foi observada no grupo controle. Quando comparado ao grupo controle, o CCM e a complacência da bexiga no grupo teste foram significativamente maiores do que os do grupo teste (3,24 ± 2,261 mL versus 1,04 ± 0,571 mL; 0,43 ± 0,578 mL/cmH 2 O versus 0,032 ± 0,016 mL/cmH 2 O), enquanto o DOP no grupo teste foi menor que o controle (20,28 ± 14,022 cmH 2 O versus 35 ± 13,258 cmH2 O). Este método de estabelecer um modelo animal de DU pela transecção do cone medular oferece uma excelente oportunidade para entender a fisiopatologia da UD de uma maneira melhor.

Todo o procedimento da transecção do cone medular pode ser concluído dentro de 45 minutos por cirurgiões experientes. Nosso laboratório já realizou mais de 100 casos de cirurgias de transecção do cone medular. A taxa de sucesso é superior a 95%, conforme definido pela sobrevivência dos ratos e pela indução bem-sucedida de DU. O teste urodinâmico confirmou a indução de DU.
Com base em nossa experiência, a indução de DU pode ser avaliada preliminarmente pelo volume residual de urina. A retenção ...

Apresentamos um método para estabelecer um modelo de subatividade do detrusor por transecção do cone medular em ratos. A subatividade do detrusor foi estimulada com sucesso nesses animais. O modelo pode ser usado para estudar a função do trato urinário.

Modelo de Subatividade do Detrusor em Ratos por Transecção de Conus Medullaris

The goal of the presented protocol was to establish a detrusor underactivity (DU) model in the rat through conus medullaris transection. Laminectomy was ...

O estabelecimento de um modelo animal de urânio empobrecido por transecção do cone medular oferece uma excelente oportunidade para iniciar a fisiopatologia da hipoatividade do detrusor. Nosso protocolo é o primeiro a usar a transecção do cone medular para induzir a hipoatividade do detrusor em um modelo animal. Para realizar uma transecção do cone medular, Primeiro, faça uma incisão na pele mediana de três centímetros nas costas do animal.Use uma tesoura cirúrgica para aprofundar a incisão através dos tecidos subcutâneos e excise os músculos ligados à coluna Para expor a 13ª costela. E ressecção cuidadosamente os músculos ligados à coluna vertebral para expor a coluna vertebral. Ressecção os ligamentos supraespinhoso e interespinhoso.E use tesouras cirúrgicas e fórceps para expor a coluna em L4 a L5. Use a pinça Kelly para remover cuidadosamente o processo espinhoso vertebral L4 a L5 e partes do processo transverso para expor a medula espinhal. E exponha completamente o cone medular em L4 a L5. Use uma tesoura de iridectomia para transeccionar completamente o cone medular. E insira o tampão de tecido para bloquear a recuperação da medula espinhal.Em seguida, use uma sutura não absorvível 4-0 para fechar o músculo e a pele sobrejacentes. E coloque o rato em uma incubadora de 37 graus Celsius durante a primeira hora após o procedimento, com monitoramento até que o animal esteja esternal ou em movimento ativo. A retenção urinária é observada imediatamente após a cirurgia, com o pico de volume aparecendo no segundo dia de pós-operatório e diminuindo gradualmente por cerca de 10 dias.Dez dias após a cirurgia, o volume de retenção atinge um nível estável. O teste urodinâmico revela que a capacidade citométrica máxima e a complacência da bexiga são significativamente maiores no grupo teste, enquanto a pressão de abertura do detrusor no grupo teste diminui significativamente em comparação com o grupo controle. A identificação correta da 13ª costela é um passo fundamental para a identificação bem-sucedida da vértebra L4 a L5.

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Research

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Cistometria é uma técnica eficiente para medir a função da bexiga em animais de pequeno...

O Uso de cistometria em pequenos roedores: Um Estudo de Chemosensation Bexiga

Estádios cirúrgicos de aumento da bexiga são descritos utilizando 3-D andaimes em modelos murinos e de rato. Para testar a eficácia de configurações de biomateriais para utilização no aumento da bexiga, as técnicas para cistometria tanto acordado e anestesiados são apresentados.

Avaliação de Biomateriais para ampliação vesical utilizando análises cistométricos Em modelos de roedores Vários

Aproximadamente 3-8.000.000 de pessoas nos Estados Unidos sofrem de síndrome intersticial dor cistite / vesical (IC / BPS), uma condição debilitante caracterizada em parte pela dor pélvica. A fim de estudar as contribuições do sistema nervoso para a condição, um modelo fisiológico de dor na bexiga urinária é usado em ratinhos e ratos.

Respostas Bexiga Distensão Evocado Visceromotor como um modelo para Bexiga dor em camundongos

modelagem tradicional de obstrução da saída da bexiga parcial em roedores é cheio com a mortalidade dos animais. Uma lesão desnervação de dissecção em torno da uretra proximal e do colo da bexiga também é de grande preocupação. Nós desenvolvido e avaliado um modelo de obstrução mid-uretral segura e confiável, evitando as deficiências do modelo tradicional.

-Nervo poupadores Mid-obstrução uretral (Nemo) em fêmeas pequenos roedores

Este estudo descreve os procedimentos cirúrgicos e técnicas experimentais para realizar cistometria acordada em um mouse que se move livremente. Além disso, fornece evidências experimentais para apoiar sua otimização e padronização.

Avaliando o procedimento para realizar cistometria acordada em um modelo de mouse

Este protocolo descreve primeiramente o procedimento cirúrgico da implantação permanente de um cateter de bexiga urinária combinado com eletrodos de esfíncter uretral externo e segundo, a medição da função da bexiga urinária e externo uretral sphincter em animais acordados implantados.

Medições de esfíncter uretral Cystometric e externo em ratos acordados com cateter implantado e eletrodos permitindo medições repetidas

O modelo de bexiga livre de detrusor permite o acesso direto ao suburotelio para estudar os mecanismos locais de regulação da disponibilidade de mediadores biologicamente ativos na propria suburotelio/laminado durante o armazenamento e a anulação da urina. A preparação assemelha-se pròxima ao enchimento de uma bexiga intata e permite que os estudos do pressão-volume sejam executados sem influências sistemáticas.

Modelo de bexiga de urina de urina descentralizada (Ex Vivo) com o músculo destrusor removido para acesso direto ao suburotelio durante o enchimento da bexiga

No presente protocolo, foi desenvolvida indução de estenose uretral em ratos Wistar, seguida de reconstrução uretral com enxerto de mucosa bucal. Foi realizado uretrograma retrógrado e avaliação com laser Doppler, validando a reconstrução uretral (após a formação de estenose) e a colocação do enxerto.

Indução de estenose uretral seguida de uretroplastia de enxerto de mucosa bucal em modelo de rato

O presente protocolo descreve um modelo passo a passo reprodutível de obstrução ureteral unilateral.

Um modelo murino imaturo de obstrução ureteral unilateral reversível

Transecção do nervo óptico é um modelo amplamente utilizado de lesão do SNC adulto. Noventa por cento das células ganglionares da retina (RGCs) cujos axônios são completamente seccionado (axotomia) morrem dentro de 14 dias após a axotomia. Esse modelo se adequa facilmente a manipulações experimentais e altamente reprodutível.

Transecção do nervo óptico: Um Modelo de Apoptose Neuron Adultos no Sistema Nervoso Central

Aprenda a criar um modelo de subatividade do detrusor em ratos por transecção do conus medullaris. Este método permite estudar a fisiopatologia da bexiga e avaliar intervenções terapêuticas.

Modelo de Subatividade do Detrusor em Ratos por Transecção de Conus Medullaris

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