Name: Um grande modelo animal para lesão renal aguda por oclusão bilateral temporária da artéria renal (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 2 s
Description: Aprenda a criar um modelo porcino minimamente invasivo de lesão renal aguda por isquemia-reperfusão usando oclusão percutânea bilateral das artérias renais. Este método reprodutível reduz a resposta inflamatória e simula cenários clínicos como transplante renal e choque cardiogênico.

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Gostaríamos de agradecer ao Dr. Arthur Nedder por sua ajuda e orientação. Este trabalho foi apoiado pelo Prêmio de Inovação do Presidente Richard A. e Susan F. Smith, Michael B. Klein and Family, The Sidman Family Foundation, The Michael B. Rukin Charitable Foundation, The Kenneth C. Griffin Charitable Research Fund e The Boston Investment Council.

Todos os estudos in vivo foram realizados de acordo com as diretrizes dos Institutos Nacionais de Saúde sobre cuidados e uso de animais e foram aprovados pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais do Hospital Infantil de Boston (Protocolo 18-06-3715). Todos os animais receberam cuidados humanos em conformidade com o Guia de Cuidado e Uso de Animais de Laboratório. A Figura 1 mostra a linha do tempo, incluindo anestesia, preparação cirúrgica e pontos de tempo para medições de desfechos primários deste estudo.
1. Indução, anestesia e intubação
<ol><li>Para evitar estresse e desconforto desnecessários, sedeia os suínos por injeção intramuscular de uma mistura de tiletamina/zolazepam 4-6 mg/kg e xilazina 1,1-2,2 mg/kg, bem como isoflurano 3% usando uma máscara facial.</li>
	<li>Cannula a veia auditiva para obter acesso venoso com uma cânula de 20 G IV após desinfetar a área com 95% de etanol. Inicie uma infusão de manutenção (0,9% NaCl a 5 mL/kg/h).</li>
	<li>Entubar o porco com um tubo endotraqueal (tamanho 7 para suínos que pesam 40-50 kg) uma vez que a adequação anestésico é confirmada. Realize a ventilação de balão com uma frequência de 12 respirações/min e transporte o porco para o centro cirúrgico.</li>
	<li>Coloque o animal na mesa de operação na posição supina. Inicie imediatamente a ventilação de pressão positiva mecânica com fio2 0,50, volume de maré de 10 mL/kg e uma frequência de 12 respirações/min sob capnografia contínua.</li>
	<li>Coloque um oxímetro de pulso na orelha ou no lábio inferior para monitoramento contínuo.</li>
	<li>Mantenha a normotermia (37 °C) usando uma almofada aquecida a ar.</li>
	<li>Para manter a anestesia geral, mantenha a administração isoflurane em 0,5-4% através do tubo endotraqueal. Durante todo o procedimento, monitore continuamente o ECG, a pressão arterial, a temperatura e a capnografia para medir a profundidade da anestesia.</li>
	<li>Insira um cateter Foley para verificar o estado do fluido do animal e monitore a saída de urina coletando urina em um saco de drenagem. NOTA: Os suínos fêmeas são preferidos em relação aos machos devido às características anatômicas de sua uretra que permite um cateterismo mais fácil.</li>
</ol>2. Preparação cirúrgica e acesso vascular
<ol><li>Coloque o animal de forma estéril.</li>
	<li>Desinfete a área lateral direita do pescoço aplicando betadina e, em seguida, 95% de etanol por 3 vezes.</li>
	<li>Realize um corte para o cateterismo da artéria carótida direita e da veia jugular direita. Retraia o músculo esteterocleidomastoide lateralmente e disseque-o até a artéria carótida direita e a veia jugular direita.</li>
	<li>Insira uma bainha de angiografia 5F tanto na artéria quanto na veia. Fixá-lo com uma sutura de seda 2-0.</li>
	<li>Insira uma baia de angiografia 5F utilizando a técnica Seldinger na artéria femoral esquerda.<ol>
<li>Para executar a técnica Seldinger punem a artéria femoral usando uma agulha oca. Insira um fio-guia de ponta macia através do lúmen e avance-o para a artéria femoral.</li>
		<li>Segure o fio-guia seguro com a mão enquanto remove a agulha. Passe a baia de angiografia sobre o fio guia para a artéria femoral e retire o fio-guia. Use orientação de ultrassom, se necessário.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Indução de isquemia renal-reperfusão lesão
<ol><li>Administre 200 UI/kg de heparina de sódio por via intravenosa para alcançar a anticoagulação sistêmica (tempo de coagulação ativado por alvo (ACT) > 300 s).</li>
	<li>Realize uma angiografia injetando um agente de contraste iodinaado sob fluoroscopia para identificar as artérias renais. NOTA: Para reduzir o risco de nefrotoxicidade induzida por contraste, diluir o agente de contraste iodinaado em uma solução 1:1 com soro fisiológico normal. Tabular a dosagem para todos os animais para garantir a dosagem equivalente.</li>
	<li>Identifique as artérias renais, avance manualmente o fio-guia no cateter guia.</li>
	<li>Posicione o cateter guia JL4 5F na artéria renal esquerda através da artéria carótida direita(Figura 1A).</li>
	<li>Posicione o segundo cateter guia 5F JL4 na artéria renal direita através da artéria femoral esquerda(Figura 1A).</li>
	<li>Use os fios-guia para direcionar um cateter de dilatação transluminal percutânea de 5F (PTA) em cada artéria renal. NOTA: É preferível posicionar o balão na artéria renal proximal para que nenhum ramo ou garantia da artéria renal seja deixado patente após a inflação do balão.</li>
	<li>Posicione cada cateter de balão no lugar e conecte uma linha de pressão a cada cateter.</li>
	<li>Verifique a presença de formas de onda de pulso arterial no monitor de pressão para garantir o posicionamento correto do cateter.</li>
	<li>Infle cada balão e aponte para uma pressão de aproximadamente 2,5 atm dentro do balão(Figura 1B).</li>
	<li>Para confirmar a cessação do fluxo sanguíneo para os rins observe o achatamento da forma de onda de pulso na ponta do cateter de balão.</li>
	<li>Injete meio de contraste iodinaado (diluição 1:1) e verifique se há alguma opacificação dos vasos renais. NOTA: Também é possível encher o balão com um agente de contraste iodinado para visualização do balão inflado. No entanto, este método não é tão sensível quanto o achatamento da forma de onda de pulso para confirmar a oclusão das artérias renais.</li>
	<li>Após 60 minutos de oclusão, esvazie cuidadosamente e remova os cateteres de balão das artérias renais.</li>
	<li>Realizar uma angiografia (utilizando meio de contraste diluído 1:1) para confirmar a patência da artéria renal e o estabelecimento de reperfusão renal(Figura 1C).</li>
	<li>Remova a baia de angiografia 5F da artéria femoral esquerda.</li>
	<li>Aplique pressão firme no local do cateterismo por 30 minutos.</li>
	<li>Inverta o efeito da heparina pela administração de protamina (3 mg/kg) até que o ACT se normalize.</li>
	<li>Para provar urina durante o período pós-operatório, fixe um tubo no cateter Foley com uma sutura de seda 2-0 usando um ponto interrompido na pele.</li>
	<li>Deixe as bainhas de angiografia na artéria carótida direita e na veia jugular direita no lugar e fixe-as com uma sutura de seda 2-0 usando um ponto interrompido para permitir a amostragem de sangue durante todo o estudo.</li>
	<li>Feche a incisão do pescoço com uma sutura de seda 2-0 usando um ponto contínuo em 2 camadas.</li>
	<li>Administre bupivacaína (3 mg/kg) no local da incisão para minimizar a dor.</li>
	<li>Continue hidratando o animal com 0,9% de NaCl a 5 mL/kg/h para um total de 2h após o fim da isquemia.</li>
	<li>Coloque um remendo de fentanil (25-50 μg/h) na parte de trás do animal para minimizar a dor pós-operatória.</li>
	<li>Administre uma injeção intramuscular de buprenorfina (0,005-0,1 mg/kg) para minimizar a dor pós-operatória.</li>
	<li>Monitore o animal e mantenha-o em ventilação mecânica até acordar.</li>
</ol>4. Recuperação animal
<ol><li>Após acordar, acomode o animal em uma sala controlada pela temperatura.</li>
	<li>Continue a girar o animal de um lado para o outro até que ele recupere a consciência plena e a capacidade de ambulação.</li>
	<li>Fornecer água e comida ad libitum.</li>
</ol>5. Avaliação funcional
<ol><li>Coletar o sangue e as amostras de urina de acordo com o protocolo desejado. NOTA: Neste estudo, foram designados os seguintes pontos de tempo: linha de base (1h após início do protocolo de hidratação e antes da oclusão das artérias renais), fim da isquemia e reperfusão (2h, 6h, 24h).</li>
	<li>Recolhe as amostras de sangue arterial e venoso. Armazene-os em heparina de lítio ou vacutainers revestidos EDTA para análise posterior. NOTA: Retire o sangue diretamente dos cateteres na artéria carótida e na veia jugular.</li>
	<li>Colete as amostras de urina do cateter Foley e armazene-as em tubos de 15 mL para análise. NOTA: Recolher a urina do saco de drenagem ligado ao cateter Foley.</li>
	<li>Para determinar a saída de urina, esvazie o saco de drenagem e colete urina por 1h. NOTA: Para o ponto de tempo de 6h em que um saco de drenagem não está conectado ao cateter Foley, feche o tubo conectado ao cateter Foley por 30 minutos e, em seguida, colete a urina com uma seringa de 60 mL para determinar a saída de urina.</li>
</ol>6. Eutanásia
<ol><li>Após o término do período de reperfusão, realize anestesia e monitor conforme descrito acima.</li>
	<li>Continue hidratação com 0,9% De LNA a 5 mL/kg/h.</li>
	<li>Use os cateteres arteriais e venosos para amostragem de sangue e o cateter Foley para determinar a saída de urina. Colete as amostras finais de sangue e urina e calcule a saída de urina.</li>
	<li>Realize uma incisão de laparotomia midline de 15 cm usando uma lâmina tamanho 10 do xifoide até a pelve média.</li>
	<li>Use um retrátil lateral reto para retrair a pele abdominal.</li>
	<li>Dissecar os anexos peritários laterais da parede abdominal para expor o retroperitônio direito e esquerdo.</li>
	<li>Identificar e dissecar sem rodeios as artérias e veias renais.</li>
	<li>Ligate as artérias renais e as veias com uma sutura de seda 2-0 e realize nefrectomias bilaterais para coletar amostras de tecido inteiro para análise histológica e metabólica.</li>
	<li>Eutanásia do animal com o método preferido de eutanásia (por exemplo, exsanguinação, pentobarbital)</li>
</ol>

<ol><li>Ali Pour, P., Kenney, M. C., Kheradvar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioenergetics+consequences+of+mitochondrial+transplantation+in+cardiomyocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Bioenergetics consequences of mitochondrial transplantation in cardiomyocytes.</a> Journal of the American Heart Association. 9 (7), 014501(2020).</li>
<li>Giraud, S., Favreau, F., Chatauret, N., Thuillier, R., Maiga, S., Hauet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+large+pig+for+renal+ischemia-reperfusion+and+transplantation+studies%3A+The+Preclinical+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedicine+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Contribution of large pig for renal ischemia-reperfusion and transplantation studies: The Preclinical Model.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 14(2011).</li>
<li>Amdisen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testing+Danegaptide+effects+on+kidney+function+after+ischemia%2Freperfusion+injury+in+a+new+porcine+two+week+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Testing Danegaptide effects on kidney function after ischemia/reperfusion injury in a new porcine two week model.</a> PLoS ONE. 11 (10), 1-13 (2016).</li>
<li>Bhargava, P., Schnellmann, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+energetics+in+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial energetics in the kidney.</a> Nature Reviews Nephrology. 13 (10), 629-646 (2017).</li>
<li>Bonventre, J. V., Weinberg, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+pathophysiology+of+ischemic+acute+renal+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the pathophysiology of ischemic acute renal failure.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 14 (8), 2199-2210 (2003).</li>
<li>Case, J., Khan, S., Khalid, R., Khan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+Acute+Kidney+Injury+in+the+Intensive+Care+Unit%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Research+and+Practice%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of Acute Kidney Injury in the Intensive Care Unit.</a> Critical Care Research and Practice. 2013, 9(2013).</li>
<li>Jabbari, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transplantation+ameliorates+ischemia%2Freperfusion-induced+kidney+injury+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta+%28BBA%29+-+Molecular+Basis+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transplantation ameliorates ischemia/reperfusion-induced kidney injury in rat.</a> Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease. 1866 (8), 165809(2020).</li>
<li>Malagrino, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catheter-based+induction+of+renal+ischemia%2Freperfusion+in+swine%3A+Description+of+an+experimental+model%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reports%22%5BJournal%5D)">Catheter-based induction of renal ischemia/reperfusion in swine: Description of an experimental model.</a> Physiological Reports. 2 (9), 1-13 (2014).</li>
<li>Freeman, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nephropathy+requiring+dialysis+after+percutaneous+coronary+intervention+and+the+critical+role+of+an+adjusted+contrast+dose%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Nephropathy requiring dialysis after percutaneous coronary intervention and the critical role of an adjusted contrast dose.</a> American Journal of Cardiology. 90 (10), 1068-1073 (2002).</li>
<li>Gasthuys, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+maturation+of+the+glomerular+filtration+rate+in+conventional+growing+piglets+as+potential+juvenile+animal+model+for+preclinical+pharmaceutical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Postnatal maturation of the glomerular filtration rate in conventional growing piglets as potential juvenile animal model for preclinical pharmaceutical research.</a> Frontiers in Pharmacology. 8 (431), 1-7 (2017).</li>
<li>Doulamis, I. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transplantation+by+intra-arterial+injection+for+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transplantation by intra-arterial injection for acute kidney injury.</a> American Journal of Physiology - Renal Physiology. 319 (3), 403-413 (2020).</li>
<li>Rewa, O., Bagshaw, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+kidney+injury-epidemiology%2C+outcomes+and+economics%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Acute kidney injury-epidemiology, outcomes and economics.</a> Nature Reviews Nephrology. 10 (4), 193-207 (2014).</li>
<li>Grossini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Levosimendan+Protection+against+Kidney+Ischemia%2FReperfusion+Injuries+in+Anesthetized+Pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Experimental+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Levosimendan Protection against Kidney Ischemia/Reperfusion Injuries in Anesthetized Pigs.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 342 (2), 376-388 (2012).</li>
<li>Laskey, W. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volume-to-creatinine+clearance+ratio.+A+pharmacokinetically+based+risk+factor+for+prediction+of+early+creatinine+increase+after+percutaneous+coronary+intervention%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Volume-to-creatinine clearance ratio. A pharmacokinetically based risk factor for prediction of early creatinine increase after percutaneous coronary intervention.</a> Journal of the American College of Cardiology. 50 (7), 584-590 (2007).</li>
</ol>

Os autores declaram não haver interesses financeiros concorrentes.

AKI é uma doença clínica comum que afeta até 50% dos pacientes adultos hospitalizados em todo o mundo6,12. Um modelo animal clinicamente relevante é necessário para investigar melhor a fisiopatologia da doença e potenciais alvos terapêuticos. Embora existam vários modelos murinos replicando AKI, estes não imitam completamente seus respectivos cenários clínicos e a anatomia do rim humano. Este estudo propõe um modelo suíno clinicamente relevante para permitir a tr...

Lesão renal aguda (AKI) é uma condição comumente diagnosticada entre pacientes cirúrgicos associados à morbidade e mortalidadesignificativas 1,2. Os dados disponíveis mostram que a AKI pode afetar até metade de todos os pacientes hospitalizados em todo o mundo e leva a 50% de taxa de mortalidade em pacientes na unidade de terapia intensiva1,3. Apesar de sua alta prevalência, a terapia AKI atual permanece limitada a estratégias preventivas, como manejo de fluidos e diálise. Portanto, há um interesse contínuo em explorar terapias alternativas para aki4,5,6.
AKI é tipicamente classificada em pré-renal, intrínseca e pós-renal com base em sua etiologia4,5,6. A maioria dos pacientes cirúrgicos com AKI estão associados a causas pré-renais devido à hipovolemia, resultando em lesão de isquemia-reperfusão (IRI) dos rins2. Clinicamente, a produção de urina diminui, e os níveis de creatinina aumentam devido à diminuição da função renal. O rim é um órgão de alta taxa metabólica e suscetível à isquemia. Um modelo animal de grande porte altamente reprodutível de IRI renal é necessário para obter uma melhor visão da fisiopatologia da AKI e suas potenciais abordagens terapêuticas5.
Para imitar o cenário clínico da hipoperfusão renal peri-operativamente, um modelo de oclusão bilateral da artéria renal é considerado adequado. Modelos descritos anteriormente que implicam oclusão unilateral da artéria renal com ou sem ressecção do rim contralateral não fornecem aplicabilidade clínica suficiente7,8. Embora esses modelos sejam suficientes para causar AKI, eles não se assemelham a cenários clínicos da vida real nem em termos de tipo nem duração da lesão.
O objetivo deste artigo é apresentar um modelo suíno de oclusão temporária bilateral percutânea das artérias renais por oclusão de cateter de balão sob angiografia. A oclusão da artéria renal bilateral imita o cenário clínico da hipoperfusão renal, seguida da posterior remoção do balão para reperfusão9,10. As etapas técnicas são descritas, incluindo cateterismo, orientação de cateteres, angiografia e monitoramento hemodinâmico. Este método não só permite uma oclusão altamente controlada e replicável das artérias renais, mas a abordagem percutânea minimiza o impacto da resposta inflamatória limitando a quantidade de insulto ao corpo em comparação com uma abordagem aberta.

<table><tbody><tr><td>Injeção de cloreto de sódio a 0,9%, USP, recipiente de plástico viaflex de 100 ml</td><td>Baxter</td><td>2B1302</td><td>Para hidratação animal</td></tr><tr><td>Agente contraste 100,0ml mídia de injeção btl ioversal 74%</td><td>CARDINAL HEALTH</td><td>133311</td><td>Para visualizar a vasculatura</td></tr><tr><td>Bard Bardia Saco de drenagem urinária de sistema fechado</td><td>BARD Inc</td><td>802001</td><td>Para coleta de urina</td></tr><tr><td>BD Vacutainer K2 EDTA</td><td>BD</td><td>367841</td><td>Para armazenamento de amostras de sangue</td></tr><tr><td>BD Vacutainer Lítio Heparina</td><td>BD</td><td>366667</td><td>Para armazenamento de amostras de sangue</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Henry Schein</td><td>6906950</td><td>Para desinfecção da pele</td></tr><tr><td>Afastador Bookwalker</td><td>Codman</td><td></td><td>Para retração da pele</td></tr><tr><td>Bupivacaína 0,25%</td> <td>Hospira</td><td></td><td>Administrar no local da incisão para analgesia</td></tr><tr><td>Buprenorfina SR</td><td>Zoo Pharm</td><td></td><td>frasco de 10mg/ml, Dose: 0,2mg/kg SC</td></tr><tr><td>Cath angio 5,0 Fr x100,0 cm 0,038 in JR4</td><td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td><td>7523-21</td><td>Para identificação das artérias renais</td></tr><tr><td>Tubo endotraqueal com balonete</td><td>Emdamed</td><td></td><td>Para estabelecer uma via aérea segura durante a operação</td></tr><tr><td>EKG Medtronics- Physiocontrol LifePak 20 Monitor de saturação de oxigênio</td><td>GE Healthcare Madison WI</td><td></td><td>Para monitoramento da saturação de oxigênio</td></tr><tr><td>Inflador Encore 26</td><td>BOSTON SCIENTIFIC</td><td>710113</td><td>Para inflar os cateteres de balão</td></tr><tr><td>Etanol 95% (Álcool etílico)</td> <td>Henry Schein</td><td></td><td>Para desinfecção da pele</td></tr><tr><td>Adesivo de fentanil</td><td>Mylan</td><td></td><td>Dose: 25-50mcg/h, TD</td></tr><tr><td>Dourado revestido de silicone Foley</td><td>TELEFLEX MEDICAL INC</td><td></td> 180730160 <td>Para urina colecção</td></tr><tr><td>Heparina sódica</td><td>LEO Pharma A/S</td><td></td><td>Dose: 200 UI/kg IV</td></tr><tr><td>i33 máquina de ultrassom</td><td>Phillips</td><td></td><td>Utilize orientação ultra-sonográfica para cateterização femoral, se necessário</td></tr><tr><td>Fio-guia de diagnóstico Inqwire - 0,035" (0,89 mm) - 260 cm (102") - 1,5 mm ponta em J</td><td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td><td>6609-33</td><td>Para guiar os cateteres de balão para as artérias renais</td></tr><tr><td>Cateter intravenoso, calibre 20</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>Inc SC-360097</td><td>Para administração de fluidos</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Patterson Veterinary Supply, Inc.</td><td>21283620</td><td>Dose: 3%, INH</td></tr><tr><td>Metzenbaum curvo rombudo curvo 14,5 cm - 5(3/4)"</td><td>Rudolf Medical</td><td>RU-1311-14M</td><td>Para dissecção e corte de tecidos</td></tr><tr><td>Kit de transdutor descartável neonatal com dispositivo de descarga de 30ml/h e torneiras duplas de 4 vias para monitoramento contínuo</td><td>Argon Medical</td><td>041588505A</td><td>Para medição de pressão</td></tr><tr><td>Cateter de dilatação Powerflex pro PTA 6 x 20 mm - comprimento do eixo (135cm)</td><td>CARDINAL HEALTH</td><td>4400602X</td><td>Para oclusão das artérias renais Linhas de</td></tr><tr><td>monitoramento de pressão mll/mll - 12" transparentes, mll/mll</td><td>Smiths Medical</td><td>B1571/MX571</td><td>Para medição de pressão</td></tr><tr><td>Pacote de procedimentos</td><td>Molnlycke Health Care</td><td>97027809</td><td>Campo cirúrgico, compressas de gaze, seringas, béquer etc</td></tr><tr><td>Protamina</td><td>Henry Schein</td><td>1044148</td><td>Para reversão de</td></tr> <tr><td>heparinaLâmina de bisturi - tamanho #10</td><td>Cardinal Health (Allegiance)</td><td>32295-010</td><td>Para as incisões na pele</td></tr><tr><td>Stopcock iv 4 way lrg bore rotg male ll adptr strl</td><td>Peoplesoft</td><td>1550</td><td>Para conectar tubos</td></tr><tr><td>Afastador lateral reto</td><td>Codman</td><td></td><td>Para retração da pele</td></tr><tr><td>Sutura perma hnd 18in 2-0 trança silk blk</td><td>CARDINAL HEALTH 1</td><td>A185H</td><td>Para suturar o local da incisão e fixar cateteres</td></tr><tr><td>Seringa de injeção de contraste 10ml fixo masculino luer vermelho</td><td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td><td>MSS111-R</td><td>Para administrar o agente de contraste</td></tr><tr><td>Seringa médica 60ml ll plst strl ltx free disp</td><td>CARDINAL HEALTH 1</td><td>BF309653</td><td>Para coleta de urina e lavagem do angiocath</td></tr><tr><td>Tilzolan (tiletamina / zolazepam)</td> <td>Patterson Veterinary Supply, Inc.</td><td>07-893-1467</td><td>Dose: 4-6 mg/kg, IM</td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Putney, INC</td><td></td><td>Dose: 1,1-2,2 mg/kg, IM</td></tr></tbody></table>

um grande modelo animal para lesão renal aguda por oclusão bilateral temporária da artéria renal

A Large Animal Model for Acute Kidney Injury by Temporary Bilateral Renal Artery Occlusion

A lesão renal aguda (AKI) está associada a maior risco de morbidade e mortalidade pós-operatória. A lesão por isquemia-reperfusão (IRI) é a causa mais comum de AKI. Para imitar este cenário clínico, este estudo apresenta um modelo animal de grande porte altamente reprodutível de IRI renal em suínos utilizando oclusão bilateral percutânea temporária das artérias renais. As artérias renais são ocluídas por 60 minutos introduzindo os cateteres de balão através da artéria femoral e carótida e avançando-as para a porção proximal das artérias. O contraste iodinado é injetado na aorta para avaliar qualquer opificação dos vasos renais e confirmar o sucesso da oclusão da artéria. Isso é ainda confirmado pelo achatamento da forma de onda de pulso na ponta dos cateteres de balão. Os balões são esvaziados e removidos após 60 minutos de oclusão bilateral da artéria renal, e os animais podem se recuperar por 24h. Ao final do estudo, a creatinina plasmática e o nitrogênio da ureia sanguínea aumentam significativamente, enquanto o eGFR e a produção de urina diminuem significativamente. A necessidade de contraste iodinado é mínima e não afeta a função renal. A oclusão renal bilateral imita melhor o cenário clínico da hipoperfusão renal perioperatória, e a abordagem percutânea minimiza o impacto da resposta inflamatória e o risco de infecção vista com uma abordagem aberta, como a laparotomia. A capacidade de criar e reproduzir esse modelo suíno clinicamente relevante facilita a tradução clínica para humanos.

Análise funcional Os resultados representativos deste estudo são de 6 animais e os dados apresentados são médias ± erro padrão da média. A função renal é avaliada pela determinação da saída de urina, taxa de filtração glomerular estimada (eGFR), creatina plasmática e nitrogênio de ureia sanguínea (BUN). Os biomarcadores da função renal são avaliados por meio de um analisador de química portátil. eGFR é calculado de acordo com a seguinte fórmula: eGFR =1,879 × BW1.092/PCr0,6 ...

Este estudo apresenta um modelo animal de grande porte altamente reprodutível de isquemia renal-reperfusão em suínos usando oclusão bilateral de balão-cateter percutâneo temporário das artérias renais por 60 min e reperfusão por 24 h.

Um grande modelo animal para lesão renal aguda por oclusão bilateral temporária da artéria renal

Acute kidney injury (AKI) is associated with higher risk for morbidity and mortality post-operatively. Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the most ...

Este estudo descreve um modelo animal reprodutível de lesão de reperfusão de isquemia renal, que pode ser usado para estudar a fisiopatologia da lesão renal aguda, e explorar potenciais modalidades terapêuticas. Este método é altamente reprodutível e minimiza o impacto da resposta inflamatória limitando a quantidade de insulto ao corpo em comparação com uma abordagem aberta. Este modelo pré-clínico imita cenários clínicos, como transplante renal, hipoperfusão renal após choque cardiogênico, procedimentos transcateter resultando em isquemia renal e procedimentos cardiovasculares com tempos prolongados de parada cardio-circulatória.Para começar, desinfete a área lateral direita do pescoço aplicando betadina e, em seguida, 95% de etanol três vezes. Coloque o animal de forma estéril. Realize um corte para o cateterismo da artéria carótida direita e da veia jugular direita.Retraia o músculo esteterocleidomastoide lateralmente, e disseque-o até a artéria carótida direita e a veia jugular direita. Insira uma bainha de angiografia 5F tanto na artéria quanto na veia. Fixá-lo com uma sutura de seda 2-0.Insira uma baia de angiografia 5F usando a técnica Seldinger na artéria femoral esquerda, perfurando a artéria com uma agulha oca. Insira um fio guia de ponta macia através do lúmen e avance-o para a artéria femoral. Segure o fio guia seguro com uma mão enquanto remove a agulha.Passe a baia de angiografia sobre o fio guia para a artéria femoral e retire o fio-guia usando orientação de ultrassom, se necessário. Administrar por via intravenosa 200 UI por quilograma de heparina de sódio para alcançar a anticoagulação sistêmica. Para realizar a angiografia, injete um agente de contraste iodinaado sob fluoroscopia para identificar as artérias renais.Identifique as artérias renais e avance manualmente o fio-guia no cateter guia. Posicione o cateter guia JL4 5F na artéria renal esquerda através da artéria carótida direita. Posicione o segundo cateter guia 5F JL4 na artéria renal direita através da artéria femoral esquerda.Use os fios-guia para direcionar uma angioplastia transluminal percutânea de 5F, ou cateter de dilatação pta, em cada artéria renal. Posicione cada cateter de balão no lugar e conecte uma linha de pressão a cada cateter. Verifique a presença de formas de onda de pulso arterial no monitor de pressão para garantir o posicionamento correto do cateter.Infle cada balão e aponte para uma pressão de aproximadamente 2,5 pressão atmosférica dentro do balão. Para confirmar a cessação do fluxo sanguíneo para os rins, observe o achatamento da forma de onda de pulso na ponta do cateter de balão. Injete meio de contraste iodinaado em uma diluição de 1:1 com soro fisiológico e verifique se há alguma opacificação dos vasos renais.Após 60 minutos de oclusão, esvazie cuidadosamente e remova os cateteres de balão das artérias renais. Realize uma angiografia utilizando um meio de contraste diluído 1:1 para confirmar a patência da artéria renal e o estabelecimento de reperfusão renal. Remova a baia de angiografia 5F da artéria femoral esquerda.Aplique a partir da pressão no local do cateterismo por 30 minutos. Reverter o efeito da heparina pela administração de três miligramas por quilograma de protamina até a normalização do tempo ativo de coagulação. Para provar urina durante o período pós-operatório, fixe um tubo no cateter Foley com uma sutura de seda 2-0 usando um ponto interrompido na pele.Para amostragem de sangue, deixe as bainhas de angiografia na artéria carótida direita e na veia jugular direita no lugar, e fixá-los com uma sutura de seda 2-0. administrar três miligramas por quilograma de bupivacaína no local da incisão para minimizar a dor. Continue hidratando o animal com 0,9 cloreto de sódio por um total de duas horas após o fim da isquemia.Feche a incisão do pescoço com uma sutura de seda 2-0 usando um ponto interrompido em duas camadas. Coloque um pedaço de fentanil de 25 a 50 microgramas por hora na parte de trás do animal para minimizar a dor pós-operatória, e monitore o animal em ventilação mecânica até que ele acorde. Colete as amostras finais de sangue e urina e calcule a saída de urina.Realize uma incisão de laparotomia média usando uma lâmina tamanho 10 do xiphoide até a pelve média. Use um retrátil lateral reto para retrair a pele abdominal. Dissecar os anexos peritários laterais da parede abdominal para expor o retroperitônio direito e esquerdo.Identificar e dissecar sem rodeios as artérias e veias renais. Ligate as artérias renais e as veias com uma sutura de seda 2-0 e realize nefrectomias bilaterais para coletar amostras de tecido inteiro para análise histológica e metabólica. A função renal foi avaliada pela determinação da saída de urina, eGFR, creatina plasmática e BUN.Após 60 minutos de oclusão bilateral da artéria renal, a produção de urina diminuiu significativamente e permaneceu assim em seis e 24 horas após a reperfusão. Da mesma forma, observou-se uma diminuição significativa no eGFR, que caiu da linha de base em comparação com o fim da isquemia em duas horas, seis horas e 24 horas de reperfusão. A creatinina plasmática aumentou significativamente em duas, seis e 24 horas de reperfusão em comparação com a linha de base.O BUN foi aumentado em comparação com a linha de base em seis e 24 horas de reperfusão. Áreas necróticas e hemorrágicas evidentes foram distribuídas de forma irregular em ambos os rins ao final dos 60 minutos de isquemia renal bilateral e nas 24 horas de reperfusão. A coloração tricrática de Masson revelou necrose coagulativa confluente, que estava localizada nos túbulos proximais do córtex renal.Também foram avaliadas seções embutidas em plástico. Todos os slides tricrommos de Masson foram avaliados para necrose celular, perda de borda de escova, formação de gesso e dilatação de túbulos. Necrose tubular aguda, ou pontuação ATN, mostrou lesão significativa no córtex renal e medula.Ao realizar este protocolo, verifique o posicionamento dos locais de balão na proximidade da RC, e oclui totalmente o fluxo para o rim. Certifique-se de que não está torcia naquela água. Após este procedimento, sondas de fluxo de cateter endovascular podem ser inseridas nas artérias renais para avaliar o fluxo sanguíneo renal, ou biópsias renais podem ser realizadas para avaliar lesão tecidual renal.

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Medicine

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Uso de um sistema de suspensão de peso para oclusão da artéria renal isolada

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Isquemia-reperfusão modelo de lesão renal aguda e Pós Lesão fibrose em camundongos

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Um modelo eficaz de rato de isquemia renal unilateral-reperfusão lesão

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