Name: Monitoramento multissuso para identificação de convulsões, arritmias e apneia em coelhos conscientes contidos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-03-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 25 s
Description: Aprenda a monitorar convulsões, arritmias e apneia simultaneamente em coelhos conscientes usando EEG, ECG, oximetria e capnografia. Este método integra análise neurológica, cardíaca e respiratória para compreender a morte súbita.

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Os autores reconhecem que este estudo foi apoiado por subsídios da American Heart Association, American Epilepsy Society e SUNY Upstate Department of Pharmacology.

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<li>Zhu, Y., Ai, X., Oster, R. A., Bers, D. M., Pogwizd, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+repolarization+and+slow+delayed+rectifier+potassium+current+and+their+regulation+by+sympathetic+stimulation+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Archives%22%5BJournal%5D)">Sex differences in repolarization and slow delayed rectifier potassium current and their regulation by sympathetic stimulation in rabbits.</a> Archives. 465 (6), 805-818 (2013).</li>
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<li>Harding, G. F., Fylan, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+visual+mechanisms+of+photosensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Two visual mechanisms of photosensitivity.</a> Epilepsia. 40 (10), 1446-1451 (1999).</li>
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<li>Kalume, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sudden+unexpected+death+in+a+mouse+model+of+Dravet+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Sudden unexpected death in a mouse model of Dravet syndrome.</a> Journal of Clinical Investigation. 123 (4), 1798-1808 (2013).</li>
<li>Xiang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Threshold+for+maximal+electroshock+seizures+%28MEST%29+at+three+developmental+stages+in+young+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Zoology+Research%22%5BJournal%5D)">Threshold for maximal electroshock seizures (MEST) at three developmental stages in young mice.</a> Zoology Research. 40 (3), 231-235 (2019).</li>
<li>Ross, K. C., Coleman, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+and+genetic+audiogenic+seizure+models%3A+behavior+and+biological+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+and+Biobehavior+Reviews%22%5BJournal%5D)">Developmental and genetic audiogenic seizure models: behavior and biological substrates.</a> Neuroscience and Biobehavior Reviews. 24 (6), 639-653 (2000).</li>
<li>Faingold, C. L., Randall, M., Tupal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DBA%2F1+mice+exhibit+chronic+susceptibility+to+audiogenic+seizures+followed+by+sudden+death+associated+with+respiratory+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">DBA/1 mice exhibit chronic susceptibility to audiogenic seizures followed by sudden death associated with respiratory arrest.</a> Epilepsy and Behavior. 17 (4), 436-440 (2010).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a revelar.

Esta configuração experimental facilita gravações e análises simultâneas de vídeo e EEG-EEG-ECG-oximetria-capnografia em coelhos, particularmente em modelos de doenças cardíacas e/ou neuronais. Os resultados deste artigo mostram que este método é capaz de detectar convulsões e arritmias e diferenciá-las de artefatos eletrográficos. Os resultados esperados foram obtidos ao dar aos coelhos um provulsivo, o que induziu convulsões. Os dados obtidos a partir das gravações de vídeo-EEG puderam ser ainda mais analisados para di...

A eletrocardiografia (ECG) é rotineiramente utilizada no cenário clínico para avaliar a dinâmica da condução elétrica cardíaca e o processo de ativação-recuperação elétrica. O ECG é importante para detectar, localizar e avaliar o risco de arritmias, isquemias e infartos. Normalmente, os eletrodos são afixados no peito, braços e pernas do paciente, a fim de fornecer uma visão tridimensional do coração. Uma deflexão positiva é produzida quando a direção da despolarização do miocárdio é para o eletrodo e uma deflexão negativa é produzida quando a direção da despolarização do miocárdio está longe do eletrodo. Os componentes eletrográficos do ciclo cardíaco incluem despolarização atrial (onda P), condução arrial-ventricular (intervalo P-R), excitação ventricular (complexo QRS) e repolarização ventricular (onda T). Há grandes semelhanças no ECG e medidas potenciais de ação em muitos mamíferos, incluindo humanos, coelhos, cães, cobaias, porcos, cabras e cavalos1,2,3.
Coelhos são um modelo ideal para pesquisa translacional cardíaca. O coração do coelho é semelhante ao coração humano em termos de composição do canal de íons, e propriedades potenciais de ação2,4,5. Coelhos têm sido usados para a geração de modelos genéticos, adquiridos e induzidos por drogas de doenças cardíacas2,4,6,7,8. Há grandes semelhanças no ECG cardíaco e resposta potencial de ação a drogas em humanos e coelhos7,10,11.
A frequência cardíaca e o processo de ativação elétrica cardíaca é muito diferente em roedores, em comparação com coelhos, humanos e outros mamíferos maiores12,13,14. O coração de roedor bate ~10 vezes mais rápido que os humanos. Em contrapartida, para o segmento ISO-elétrico ST em ECGs humanos e coelhos, não há segmento ST em roedores14,15,16. Além disso, os roedores têm uma forma de onda QRS-r com uma onda T invertida14,15,16. As medições do intervalo QT são muito diferentes em roedores vs. humanos e coelhos14,15,16. Além disso, os valores normais de ECG são muito diferentes em humanos vs. roedores12,15,16. Essas diferenças nas formas de onda do ECG podem ser atribuídas a diferenças na morfologia potencial de ação e nos canais de íons que impulsionam a repolarização cardíaca9,14. Enquanto a corrente transitória de potássio externo é a maior corrente de repolarização na morfologia potencial de ação cardíaca curta (não-cúpula) em roedores, em humanos e coelhos há uma grande cúpula fase-2 sobre o potencial de ação, e as correntes de potássio retificadora atrasadas (IKr e IKs) são as principais correntes repolarizantes em humanos e coelhos4,9,13,17. É importante ressaltar que a expressão de IKr e IKs é ausente/mínima em roedores, e devido à ativação temporal cinética de IKr e IKs não tem um papel na ação cardíaca potencial morfologia9,13. Assim, os coelhos fornecem um modelo mais translacional para avaliar os mecanismos de anormalidades e arritmias induzidas, adquiridas e herdadas de drogas4,7,13. Em seguida, como inúmeros estudos têm mostrado a presença de anormalidades elétricas neuronais e cardíacas em doenças cardíacas primárias (Síndrome de QT Longo18,19,20) ou doenças neuronais (epilepsia21,22,23,24), é importante estudar os mecanismos subjacentes em um modelo animal que reproduz de perto a fisiologia humana. Embora os roedores possam ser suficientes para modelar o cérebro humano, os roedores não são um modelo ideal de fisiologia cardíaca humana7.
A eletroencefalografia (EEG) utiliza eletrodos, geralmente colocados no couro cabeludo ou intracranianamente, para registrar a função elétrica cortical. Estes eletrodos podem detectar alterações na taxa de disparo e sincronicidade de grupos de neurônios piramida próximos no córtex cerebral25. Essas informações podem ser usadas para avaliar a função cerebral e o estado de despertar/sono. Além disso, os EEGs são úteis para localizar a atividade epiepiforme e distinguir convulsões epilépticas de eventos não epilépticos (por exemplo, atividade psicogênica não epiléptica e eventos cardiogênicos). Para diagnosticar o tipo de epilepsia, provocando fatores e a origem da convulsão, os pacientes com epilepsia são submetidos a diversas manobras que podem provocar uma convulsão. Vários métodos incluem hiperventilação, estimulação fótica e privação do sono. Este protocolo demonstra o uso de estimulação fótica para induzir aberrações e apreensões de EEG em coelhos26,27,28,29.
Gravações simultâneas de vídeo-EEG-ECG têm sido amplamente utilizadas em humanos e roedores para avaliar a atividade comportamental, neuronal e cardíaca durante os estados pré-ictal, ictal e pós-ictal30. Embora vários estudos tenham realizado gravações de EEG e ECG separadamente em coelhos4,31,32,33, um sistema para aquisição e análise de vídeo simultâneo-EEG-ECG no coelho consciente contido não está bem estabelecido34. Este artigo descreve o desenho e a implementação de um protocolo que pode gravar dados simultâneos de vídeo-EEG-ECG -capnografia-oximetria em coelhos conscientes, a fim de avaliar a função elétrica e respiratória neuro-cardíaca. Os resultados obtidos a partir deste método podem indicar a suscetibilidade, gatilhos, dinâmica e concordância entre arritmias, convulsões, distúrbios respiratórios e manifestações físicas. Uma vantagem do nosso sistema experimental é que adquirimos gravações conscientes sem a necessidade de um sedativo. Os coelhos permanecem nos contentores por ≥5 h, com movimento mínimo. Como anestésicos perturbam a função neuronal, cardíaca, respiratória e autônoma, as gravações durante o estado consciente fornecem os dados mais fisiológicos.
Este sistema de gravação pode, em última análise, fornecer insights detalhados para avançar na compreensão dos mecanismos neurológicos, cardíacos e respiratórios para morte súbita inesperada em epilepsia (SUDEP). Além do monitoramento neurológico e cardíaco acima, evidências recentes também apoiaram o papel da insuficiência respiratória como potencial contribuição para a morte súbita após uma convulsão35,36. Para monitorar o estado respiratório dos coelhos, foram implementadas oximetria e capnografia para avaliar o estado do sistema respiratório antes, durante e depois de uma convulsão. O protocolo aqui apresentado foi concebido com o objetivo de avaliar o limiar para convulsões de coelhos induzidos por farmacologicamente e estímulos fóticos. Este protocolo pode detectar sutis anormalidades de EEG e ECG que podem não resultar em manifestações físicas. Além disso, este método pode ser usado para testes de segurança cardíaca e eficácia anti-arrítmica de novas drogas e dispositivos.

<table><tbody><tr><td>Irrigação com cloreto de sódio a 0,9%, USP - Recipiente flexível</td><td>PFIZER (HOSPIRA)</td><td>7983-09</td><td>Seringa Luer Lock diluente</td></tr><tr><td>de 10cc com agulha de 20G x 1</td>" <td>Sur-Vet</td><td>SS-10L2025</td><td>Usado como descarga após injeção de drogas</td></tr><tr><td>4x4 esponjas de gaze</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-415-469</td><td>Enrolado em um tubo para imobilizar a orelha com molho de maçã angiocateter</td></tr><tr><td></td><td>Kirkland</td><td>897971</td><td>Veículo para medicamentos orais</td></tr><tr><td>Computador</td><td>Dell</td><td>Optiplex 5040</td><td>Computador</td></tr><tr><td>de aquisição E-4031</td><td>Tocris</td><td>1808</td><td>Agente conhecido por prolongar o intervalo QT</td></tr><tr><td>Eletrodo de ECG RhythmLink</td><td></td><td>RLSND116-2,5</td><td>13 mm 35 graus dobrado (0,4 mm de diâmetro) eletrodos de pino subdérmico</td></tr><tr><td>EEG Eletrodo</td><td>RhythmLink</td><td>RLSP513</td><td>Eletrodos de pino subdérmico retos de 13 mm (0,4 mm de diâmetro) de 5 torções</td></tr><tr><td>EEGLAB (2020)</td><td>Swartz Center for Computational Neuroscience</td><td>Open Access</td><td>Pode realizar análise espectral do</td></tr><tr><td>adaptador EEG Ethernet-para-ethernet</td><td>Adaptador Linksys</td><td>USB3G16</td><td>para conectar a câmera ao computador</td></tr><tr><td>Solução Eutanásia-III</td><td>Med-Pharmex</td><td>ANADA 200-280</td><td>Contém pentobarbital sódico e fenitoína sódica, substância controlada</td></tr><tr><td>Enchimento de espuma</td><td>Genérico</td><td>N/A</td><td>Reduz a pressão aplicada ao pescoço de coelhos pequenos pelo sistema de contenção para prevenir os efeitos cardiorrespiratórios adversos da compressão do pescoço</td></tr><tr><td>Heparin Lock Flush</td><td>Medline</td><td>EMZ50051240</td><td>Para manter a permeabilidade do angiocateter</td></tr><tr><td>IR Light</td><td>Bosch</td><td>EX12LED-3BD-8W</td><td>Facilita as gravações no escuro</td></tr><tr><td>LabChart Pro (2019, Versão 8.1.16)</td><td>ADInstruments</td><td>N/A</td><td>ECG Analysis</td></tr><tr><td>JELCO PROTECTIV Safety I.V. Cateteres, calibre 25</td><td>Smiths Medical</td><td>3060</td><td>Usado para catarizar a veia marginal da orelha</td></tr><tr><td>MATLAB (R2019b, Atualização 5)</td><td>MathWorks</td><td>N/A</td><td>Necessário para executar o microfone EEGLAB</td></tr><tr><td></td><td>Sony Stereo</td><td>ECM-D570P</td><td>Gravação de manifestações audíveis de convulsões</td></tr><tr><td>Micropore Medical Tape, Papel, Branco</td><td>3M</td><td>1530-1</td><td>Usado para prender fios e criar tala de orelha</td></tr><tr><td>Natus NeuroWorks</td><td>Natus</td><td>LC101-8</td><td>Software de aquisição e revisão</td></tr><tr><td>Pentilenotetrazol (1 - 10 mg/kg sempre em volume de 1mL)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>88580</td><td>Diluições preparadas em solução salina</td></tr><tr><td>Photic Stimulator</td><td>Grass</td><td>Estimulador PS22</td><td>para controlar a frequência, atraso, duração, intensidade dos pulsos de luz</td></tr><tr><td>Organizador / empacotador de fios de plástico</td><td>12Vwire.com</td><td>LM-12-100-BLK</td><td>Fios de feixe para reduzir o ruído</td></tr><tr><td>PS 22 Estimulador Fótico</td><td>Instrumentos de Grama</td><td>BZA641035</td><td>Luz estroboscópica com frequência de flash ajustável, atraso e intensidade</td></tr><tr><td>Tubo de PVC</td><td>Genérico</td><td>N / A</td><td>Evita que coelhos pequenos chutem as patas traseiras e causem lesões na coluna vertebral</td></tr><tr><td>Amplificador</td><td>Quantum Natus</td><td>13926</td><td>Amplificador / digitalizador</td></tr><tr><td>Quantum HeadBox Amplificador</td><td>Natus</td><td>22134</td><td>Caixa de fuga de 64 pinos</td></tr><tr><td>Restritor de coelho</td><td>Plas-Labs</td><td>501-TC</td><td>Vários tamanhos de contenção de coelho estão disponíveis. 6" x 18" x 6" neste estudo.</td></tr><tr><td>Almofada de borracha (booster)</td><td>Genérico</td><td>N/A</td><td>Levanta pequenos coelhos na contenção para evitar a compressão do pescoço</td></tr><tr><td>Clipe de orelha SpO2</td><td>NONIN</td><td>61000</td> Adaptador de sensor <td>PureSAT/SpO2</td></tr><tr><td>SpO2</td><td>NONIN</td><td>13931</td><td>XPOD PureSAT/SpO2</td></tr><tr><td>SRG-X120 1080p PTZ Câmera com saída HDMI, IP e 3G-SDI Sony</td><td></td><td>SRG-X120</td><td>Impela</td></tr><tr><td>Seringa Tuberculina Terumo Sur-Vet 1cc 25G X 5/8" Regular Luer</td><td>Sur-Vet</td><td>13882</td><td>Usado para injetar medicamentos intravenosos</td></tr><tr><td>Plugue de Injeção Veterinária Luer Lock</td><td>Sur-Vet</td><td>SRIP2V</td><td>Plugue de injeção para inserir a agulha para medicação intravenosa</td></tr><tr><td>Webcol Preparação de Álcool, Estéril, Grande, 2-ply</td><td>Covidien</td><td>5110</td><td>Para preparar a veia da orelha antes do cateterismo</td></tr></tbody></table>

monitoramento multissuso para identificação de convulsões, arritmias e apneia em coelhos conscientes contidos

Multi-system Monitoring for Identification of Seizures, Arrhythmias and Apnea in Conscious Restrained Rabbits

Pacientes com canalopatias de íons têm alto risco de desenvolver convulsões e arritmias cardíacas fatais. Há maior prevalência de doenças cardíacas e arritmias em pessoas com epilepsia (ou seja, coração epiléptico.) Além disso, distúrbios cardíacos e autônomos foram relatados em torno de convulsões. 1:1.000 pacientes com epilepsia/ano morrem de morte inesperada súbita na epilepsia (SUDEP). Os mecanismos para a SUDEP permanecem incompletamente compreendidos. Eletroencefalogramas (EEG) e eletrocardiogramas (ECG) são duas técnicas rotineiramente utilizadas no cenário clínico para detectar e estudar os substratos/gatilhos para convulsões e arritmias. Embora muitos estudos e descrições dessa metodologia estejam em roedores, sua atividade elétrica cardíaca difere significativamente dos humanos. Este artigo fornece uma descrição de um método não invasivo para gravação simultânea de vídeo-EEG-ECG-oximetria-capnografia em coelhos conscientes. Como a função elétrica cardíaca é semelhante em coelhos e humanos, os coelhos fornecem um excelente modelo de estudos diagnósticos e terapêuticos translacionais. Além de delinear a metodologia de aquisição de dados, discutimos as abordagens analíticas para o exame da função elétrica neuro-cardíaca e da patologia em coelhos. Isso inclui detecção de arritmia, análise espectral do EEG e uma escala de convulsão desenvolvida para coelhos contidos.

O método descrito acima é capaz de detectar anormalidades no sistema de condução elétrica do cérebro e do coração, bem como distúrbios respiratórios. Um software de aquisição de dados é usado para avaliar a morfologia do ECG e detectar quaisquer frequências cardíacas anormais, distúrbios de condução ou ritmos ECG (batidas ectópicas atrial/ventriculares e brady-/tchy-arritmias)(Figura 6). Além de visualizar a morfologia do ECG, os traços são analisados para qu...

Utilizando vídeo simultâneo EEG-ECG-oximetria-capnografia, desenvolvemos uma metodologia para avaliar a suscetibilidade de modelos de coelhos para desenvolver arritmias provocadas e convulsões. Este novo sistema de gravação estabelece uma plataforma para testar a eficácia e a segurança da terapêutica e pode capturar a complexa cascata de eventos multi-sistemas que culminam em morte súbita.

Monitoramento multissuso para identificação de convulsões, arritmias e apneia em coelhos conscientes contidos

Patients with ion channelopathies are at a high risk of developing seizures and fatal cardiac arrhythmias. There is a higher prevalence of heart disease ...

Disfunção cardíaca e respiratória contribui para morte súbita após uma convulsão. Portanto, para estudar esse fenômeno, foi aplicada uma abordagem multissecional a um modelo coelho. Esta técnica permite o monitoramento simultâneo e a análise posterior da função neurológica, cardíaca e respiratória de múltiplos coelhos ao redor de convulsões, arritmias e morte anterior.Embora uma doença possa ser principalmente neuronal ou cardíaca, pode incluir distúrbios elétricos no cérebro e no coração, como convulsões e arritmias, bem como disfunção respiratória. Pode ser difícil trabalhar com coelhos por causa da força da perna traseira. Tome cuidado para manter os coelhos calmos ao movê-los, e ao anexar os monitores.Comece conectando o computador a um amplificador com uma caixa de cabeça de 64 pinos. Para fazer de cada oitavo pino na caixa de entrada uma referência, defina o eletrodo de referência como independente. Para implantação dos eletrodos ECG, fixe um coelho na posição supina com a cabeça nos joelhos do investigador e inferior ao resto do corpo.Com um segundo investigador espalhando a pele para expor a pele subjacente, insira subdermeticamente eletrodos tortos de ângulo de 35 graus em cada axila. Coloque as pistas no peito, posteriormente para os membros dianteiros direito e esquerdo. E no abdômen, anterior ao membro traseiro esquerdo.Em seguida, coloque um eletrodo de pino de terra anterior ao membro traseiro direito no abdômen. Quando todas as pistas de ECG tiverem sido devidamente colocadas, proteja o coelho em um conterrâneo de tamanho apropriado com os membros traseiros sob o animal. Usando uma abordagem angular de 45 graus, insira eletrodos subdérmicos de pinos retos no couro cabeludo.Coloque uma liderança EEG na parte anterior direita, anterior esquerda, occipital direita e regiões occipitais esquerdas da cabeça. E coloque uma liderança central no ponto central entre as outras quatro pistas. Passe os fios entre as orelhas, e amarre-os soltos ao conter atrás da cabeça.Para monitorar a respiração durante o experimento, conecte um oxímetro de pulso a uma orelha sobre a veia marginal do ouvido, e proteja suavemente uma máscara facial com tubos de capnografia sobre a boca e o nariz do animal. Em seguida, conecte a outra extremidade da tubulação ao monitor de sinais vitais. Para gravar vídeo EEG-ECG, abra um programa de software EEG disponível comercialmente e ajuste o vídeo de modo que todos os coelhos possam ser observados dentro do campo de visão.Realize uma gravação de linha de base para o animal por um mínimo de 10 a 20 minutos, ou até que a frequência cardíaca se estabilize para 200 a 250 batidas por minuto por pelo menos cinco minutos. Coloque o filtro de baixa frequência em um hertz e o filtro de alta frequência para 59 hertz. Adicione notas bloqueadas em tempo real para indicar o tempo de intervenções, eventos neuro-cardíacos e artefatos motores ou investigadores.Para estimulação fótica, coloque uma fonte de luz com um refletor circular de 30 centímetros na frente do coelho ao nível dos olhos com a intensidade de flash definida ao máximo. E coloque dois espelhos em cada lado da cabeça, e um espelho atrás do coelho, para que a luz entre nos olhos do coelho. Conecte a luz a um controlador com uma taxa, intensidade e duração ajustáveis.Com o estimulador fótico definido para um hertz e o flash ligado, registo a resposta por 30 segundos. Cubra os olhos do coelho com uma máscara para simular ou causar fechamento dos olhos e estimular por mais 30 segundos. Depois de gravar os olhos abertos e os olhos fechados resposta em cada frequência, desligue o estimulador fótico por 30 segundos e ajuste o controlador para a próxima configuração de frequência.Depois de gravar por 60 segundos em cada frequência de um a 25 hertz em dois intervalos de hertz, diminua a frequência de 60 para 25 hertz em cinco incrementos de hertz, e grave por 30 segundos com os olhos abertos e 30 segundos com os olhos fechados. No final do experimento, remova os condutores de EEG e ECG do coelho e devolva os animais para suas gaiolas domésticas para cuidados rotineiros pela equipe de criação. Antes de administrar a medicação, colete de 10 a 20 minutos de vídeo EEG-ECG de linha de base do coelho não tratado como demonstrado.Para a administração oral de um medicamento de interesse, misture 0,3 miligramas por quilograma da droga de interesse em três mililitros de molho de maçã de grau alimentar, e carregue a mistura em uma seringa oral de três mililitros. Levantando suavemente o lábio superior do coelho, deslize a ponta da seringa para o lado da boca que é desobstruída pelos dentes do coelho, e injete todo o volume de molho de maçã suplementado com drogas na boca do coelho. Em seguida, colete duas horas de dados de vídeo EEG-ECG antes de devolver o coelho à sua gaiola doméstica para cuidados de rotina.Antes de registrar a resposta do EEG-ECG à administração de medicamentos intravenosos, raspe a superfície posterior da orelha do coelho e use 70% de etanol para desinfetar o local, e dilatar, a veia auditiva marginal. Cuidadosamente, cannulate a veia auditiva marginal com um angiocateter de 25 metros, e coloque um plugue de injeção na extremidade do cateter. Fita uma tala criada a partir de três pedaços enrolados de gaze para a orelha para fixar o cateter no lugar e para segurar a orelha ereto.Injete um mililitro de 10 unidades usp por mililitro de soro fisiológico heparinizado para manter a patente do cateter. Quando a gravação da linha de base terminar, injete soro fisiológico com um a 10 miligramas por quilograma da droga de interesse no cateter uma vez a cada 10 minutos. Após cada dose, monitore cuidadosamente o vídeo EEG-ECG, capnografia de oximetria, para quaisquer anormalidades neuro, cardíacas, elétricas e respiratórias ou evidências visuais de atividade epieptiforme.Observe essas alterações em tempo real, bem como durante a análise pós-revisão. Para analisar o vídeo ECG, use um software comercialmente disponível para identificar períodos de taquicardia, braquicardia, batidas ectópicas ou outras arritmias dentro dos dados do ECG. Para reduzir a quantidade de dados para revisão, crie um tachograma para aumentar a facilidade com que períodos de taquicardia, bradicardia ou irregularidades do intervalo RR podem ser identificados.Para análise de EEG de vídeo após um experimento de administração de drogas, role visualmente através do rastreamento EEG para distinguir movimentos epilépticos versus não epilépticos por pelo menos um minuto após cada dose de droga. Para análise de EEG de vídeo após um experimento de estimulação fótica, crie um gráfico de análise espectral em um programa de software de análise EEG apropriado. Em seguida, analise as pistas occipitais do EEG para a presença e ausência do ritmo de condução occipital.O ritmo de condução occipital criará um pico na análise espectral que corresponde à frequência do estimulador fótico. A avaliação da morfologia do ECG permite a detecção de frequências cardíacas anormais, condução e formas de onda ECG. Os traços também podem ser usados para quantificar a frequência cardíaca, intervalo de RR, intervalo de RP, duração P, intervalo QRS, intervalo QT, QTc, intervalo JT e T-peak para intervalo T-end.Gravações dos condutores de EEG occipital normalmente exibem uma amplitude maior do que a observada para dados de chumbo frontal. E a frequência dominante em todos os leads são comumente medidos na faixa Delta. Aqui, ondas de fuso do sono de um experimento representativo de coelho são mostradas.Múltiplas montagens de EEG de um período de sono demonstram que essas ondas surgem do centro da cabeça, o que é consistente com os achados humanos. Além das alterações normais do EEG, vários movimentos conscientes e não epilépticos de coelhos também podem ser observados durante gravações de linha de base que podem ser usadas para distinguir esses dados de descargas epilépticas. É importante colocar o chumbo ECG firmemente na pele para manter os fios longe das pernas e ter cuidado para que os eletrodos permaneçam ligados ao transferir coelhos para o conterrâmido.Este aparelho de gravação multi-sistema permitirá futuros estudos de segurança e eficácia de medicamentos, e facilitará uma compreensão abrangente de várias doenças adquiridas e hereditárias. Esta técnica captura o curso de disfunção potencialmente fatal, multiórgãos após uma convulsão, o que levará a uma melhor compreensão do mecanismo do SUDEP.

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Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este vídeo demonstra o procedimento para implantar eletrodos de EEG-ECG e anexar sondas respiratórias em um modelo de coelho para aquisição e análise de registros de seus biosinais.

Preparando o Modelo de Coelho Consciente para Vídeo-EEG-ECG-Oximetria-Capnografia Simultânea para Intervenções Experimentais: Um Procedimento para Implantar Eletrodos de EEE-ECG e Anexar Sondas Respiratórias em Modelo de Coelho

Neste vídeo, mostramos um procedimento para gravação simultânea de dados de vídeo-EEG-ECG-capnografia-oximetria gerados pela indução de convulsões em um modelo de coelho.

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Neste vídeo, descrevemos a gravação simultânea de vídeo, EEG, ECG e pistas respiratórias em um modelo de coelho em resposta ao medicamento administrado por via oral para entender a sequência de eventos que levam à convulsão. O modelo pode ser usado para testar medicamentos potenciais para sua segurança neurocardíaca.

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Neste vídeo, demonstramos um método de monitoramento multissistêmico para avaliar anormalidades neurológicas e cardiorrespiratórias durante a injeção intravenosa de um medicamento indutor de convulsões. O monitoramento simultâneo dos parâmetros de vídeo EEG, ECG, oximetria e capnografia ajuda a entender as alterações fisiológicas em tempo real associadas às crises epilépticas.

Monitoramento multissistêmico de anormalidades epilépticas em coelhos: um método para gravação simultânea de vídeo EEG, ECG, capnografia e oximetria durante convulsões induzidas

O estudo descreve um protocolo para o projeto, fabricação e colocação de um novo sistema contínuo de registro de EEG / ECG em coelhos. Este sistema com fio permite gravações contínuas de EEG / ECG de nove eletrodos distintos na cabeça e no tórax, o que facilita avaliações abrangentes da atividade elétrica no cérebro e no coração.

Procedimento de implante cirúrgico e configuração de fiação para monitoramento contínuo de EEG/ECG de longo prazo em coelhos

Os mecanismos de morte súbita inesperada na epilepsia (SUDEP) são pouco compreendidos e difíceis de traduzir a partir dos modelos atuais. Coelhos transgênicos podem oferecer informações sobre esses mecanismos. Descrevemos um método para eletroencefalografia contínua de longo prazo e registros eletrocardiográficos em kits de coelhos transgênicos para avaliar eventos graves que podem levar à morte.

Implante de Eletroencefalograma e Telecardiograma em Kits Neonatais para Coelhos

O grampo hiperinsulinêmico euglicêmico-é o "padrão ouro" para a avaliação da ação da insulina. A insulina é infundida a uma taxa constante estimulando a captação de glicose. A quantidade de glicose exógena infundido para combater essa queda é um indicativo de sensibilidade à insulina. Aqui, o procedimento é realizado em um rato, consciente desenfreada.

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Hiperinsulinêmico euglicêmico-Clamps em Consciente, Ratos Unrestrained

Desenvolvimento recente no gene ferramentas que visam torna a produção de knockout (KO) coelhos possível. No presente trabalho, geramos cinco coelhos apolipoproteína (Apo) C-III KO usando Nucleases dedo de zinco (ZFN). Este trabalho demonstrou que ZFN é um método altamente eficiente para a produção de coelhos KO.

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Aprenda a monitorar convulsões, arritmias e apneia simultaneamente em coelhos conscientes usando EEG, ECG, oximetria e capnografia. Este método integra análise neurológica, cardíaca e respiratória para compreender a morte súbita.

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