Espectroscopia de Eco de Rotação de Nêutrons como uma sonda única para dinâmicas de membrana lipídica e interações membrana-proteína

Este protocolo descreve a preparação da amostra e a redução de dados necessárias para estudos bem-sucedidos de eco de spin de nêutrons de flutuações coletivas de membrana de relevância para funções biológicas e aplicações práticas de membranas lipídicas. O NSE acessa diretamente a dinâmica da membrana nas escalas de tempo nanossegundos das funções-chave da membrana com a vantagem única da sensibilidade do isótopo para sondar características de membrana seletiva inacessíveis com outras técnicas. Estudos da dinâmica da membrana na nanoescala são essenciais para entender as propriedades de membrana subjacentes do mecanismo molecular e interações membrana-proteína implicadas em várias patologias celulares.

O método fornece aos pesquisadores novas para a NSE diretrizes detalhadas sobre a concepção, preparação e caracterização de vesículas lipídicas para experimentos bem-sucedidos e análise e interpretação subsequentes de redução de dados. Demonstrando o procedimento estarão Teshani Kumarage e Julie Nguyen, uma estudante de pós-graduação e estudante de graduação do laboratório. Trabalhando dentro de um capô, prepare a suspensão lipídica dissolvendo lipídios com peso preciso em um mililitro de solvente com mistura manual.