Produção de vetores de vírus associados a Adeno em pilhas de células para estudos pré-clínicos em grandes modelos animais

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30 de junho de 2021

10.3791/62727-v

30 de junho de 2021

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Aqui fornecemos um procedimento detalhado para a produção em larga escala de vetores AAV de grau de pesquisa usando células hek 293 aderentes cultivadas em pilhas de células e purificação de cromatografia de afinidade. Este protocolo produz consistentemente >1 x 1013 genomas vetoriais/mL, fornecendo quantidades vetoriais apropriadas para grandes estudos em animais.

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Produção de Vetor AAV

Chapters in this video

0:04

Introduction

0:46

Double Plasmid Transfection of HEK293 Cells in Cell Stacks

2:30

Harvesting Adeno-Associated Virus AAV and Chemical Lysis of The Transfected HEK293 Cells

3:23

AAV Vector Purification Using Heparin Affinity Chromatography

5:45

Results: Serum Human Monoclonal Antibody (hIgG) Expression in Animals Upon Administration of AAV6.2FF-hIgG

6:41

Conclusion

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