Name: Um Protocolo de Transplante de Coração Heterotópico Porcino para Entrega de Terapêutica a um Aoenxerto Cardíaco (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-02-14T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: Aprenda a administrar terapêuticas em aloenxertos cardíacos porcinos usando um modelo de transplante heterotópico. Este método permite testar efeitos terapêuticos por períodos prolongados após o transplante.

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Gostaríamos de agradecer ao Duke Large Animal Surgical Core e ao Duke Perfusion Services por sua assistência durante estes procedimentos. Também gostaríamos de agradecer a Paul Lezberg e à TransMedics, Inc. pelo apoio.

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<li>Ho, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+characterization+of+swine+leucocyte+antigen+class+I+genes+in+outbred+pig+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Genetics%22%5BJournal%5D)">Molecular characterization of swine leucocyte antigen class I genes in outbred pig populations.</a> Animal Genetics. 40 (4), 468-478 (2009).</li>
<li>Ho, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+characterization+of+swine+leucocyte+antigen+class+II+genes+in+outbred+pig+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Genetics%22%5BJournal%5D)">Molecular characterization of swine leucocyte antigen class II genes in outbred pig populations.</a> Animal Genetics. 41 (4), 428-432 (2010).</li>
</ol>

Paul Lezberg é empregado da TransMedics, Inc. Carmelo Milano recebeu um presente financeiro da TransMedics, Inc. para financiar cirurgias heterotópicas de transplante de coração. Michelle Mendiola Pla é apoiada pela T32HL007101. Os outros autores não têm conflitos de interesse para declarar.

A entrega de terapêutica durante a ex vivo perfusão em transplante cardíaco oferece uma estratégia para modificar o aoenxerto e potencialmente melhorar os resultados do transplante. O protocolo aqui apresentado incorpora o armazenamento de perfusão normoérmico de última geração e oferece potencial promissor para testar a entrega isolada de células, genes ou imunoterápicos ao alusão 11,12,13. Até o momento, as t...

A insuficiência cardíaca é uma condição que afeta cerca de 6 milhões de adultos nos Estados Unidos e deve aumentar para 8 milhões de adultos até o ano de 20301. Transplante cardíaco é o tratamento padrão ouro para insuficiência cardíaca em estágio final. No entanto, não é sem suas limitações e complicações. Permanece limitado pelo número de corações doadores disponíveis, disfunção do enxerto primário, rejeição do coração e os efeitos colaterais da imunossupressão de longo prazo2. Essas limitações são particularmente importantes em jovens receptores que podem sofrer falha de aoenxerto e requerem posterior reco transplante para alcançar a expectativa de vida normal.
Uma intervenção ideal para superar essas limitações trataria a loenxertos cardíacos inteiros com terapêutica antes da implantação no receptor que pode melhorar a viabilidade do aoenxerto e conferir "cardioproteção". Tais intervenções seriam dadas profilaticamente para minimizar a incidência de insultos isquêmicos, rejeição de aloenxerto, vasculopatia de aloenxerto cardíaco e até mesmo reparar aloenxertos marginais. Estudos translacionais para o desenvolvimento desses tipos de intervenções requerem um modelo animal de transplante cardíaco para permitir a vigilância a longo prazo do enxerto cardíaco. O modelo de transplante de coração suíno e heterotópico na posição intraabdominal tem se mostrado ideal para este fim. O transplante de coração nesta posição permite testar os efeitos de novas terapias e avaliar a imunopatologia da rejeição do enxerto. Além disso, o modelo heterotópico é vantajoso sobre o modelo ortotópico devido à melhor sobrevida geral do receptor, sem necessidade de bypass cardiopulmonar e sem necessidade do enxerto para manter a circulação do receptor3.
A efetiva entrega de intervenções terapêuticas ao coração, como gene, celular ou imunoterapia, é uma barreira significativa para a aplicação clínica 4,5. A tecnologia introduzida pelos dispositivos de perfusão ex vivo permite que os enxertos sejam continuamente perfundidos, mantendo-os em um estado não trabalhador, mas metabolicamente ativo 6,7,8,9. Isso oferece uma oportunidade única para tratar um coração inteiro com terapêutica avançada, minimizando os potenciais efeitos colaterais do parto sistêmico 10,11,12,13. Outra vantagem de utilizar dispositivos de perfusão ex vivo para entrega terapêutica é que eles permitem a administração de medicamentos para a circulação coronariana por períodos prolongados que não são viáveis usando métodos tradicionais de armazenamento estático frio. Isso permite uma entrega mais global da terapêutica ao enxerto14. Usando o protocolo aqui apresentado, entregamos com sucesso o gene luciferase de vagalume a um enxerto cardíaco porcino inteiro usando vetores adenovirais15. O objetivo deste protocolo é fornecer uma abordagem reprodutível e robusta para a realização da entrega de um terapêutico para toda a alusão cardíaca antes do transplante.

<table><tbody><tr><td>0 Sutura Maxon em loop</td><td>Covidien</td><td>GMM-341L</td><td>Usado para fechar a fáscia da incisão da laparotomia</td></tr><tr><td>0 Laços de seda</td><td>Medtronic, Inc</td><td>S346</td><td></td></tr><tr><td>18 G Angiocath</td><td>BD</td><td>381144</td><td>Usado para desar o ventrículo esquerdo do coração doador após o implante</td></tr><tr><td>20 Fr LV vent</td><td>Medtronic, Inc</td><td>12002</td><td></td></tr><tr><td>2-0 Suturas de seda</td><td>Ethicon, Inc.</td><td>SA11G</td><td></td></tr><tr><td>2-0 Gravatas de seda</td><td>Ethicon, Inc.</td><td>SA65H</td><td></td></tr><tr><td>2-0 Sutura Vicryl</td><td>Ethicon, Inc.</td><td>J259H</td><td></td></tr><tr><td>24 Cânula venosa Fr</td><td>Medtronic, Inc</td><td>68124</td><td></td></tr><tr><td>3-0 Suturas de Prolene</td><td>Ethicon, Inc.</td><td>8522</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Sutura monocryl</td><td>Ethicon, Inc.</td><td>Y469G</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Suturas de Prolene</td><td>Ethicon, Inc.</td><td>8521</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de cortar pêlos de animais</td><td>Wahl</td><td>8786-452</td><td></td></tr><tr><td>Braçadeira aórtica</td><td>V. Mueller</td><td>CH6201</td><td></td></tr><tr><td>Afastador da Marinha do Exército</td><td>V. Mueller</td><td>SU3660</td><td></td></tr><tr><td>ATF 40, Conjunto descartável de economia de células</td><td>Fresenius Kabi</td><td>9108494</td><td>Inserção do dispositivo de proteção de células Afastador</td></tr><tr><td>Balfour</td><td>V. Mueller</td><td>SU3042</td><td>Usado como um afastador da parede abdominal</td></tr><tr><td>C.A.T.S cell saver</td><td>Fresenius Kabi</td><td>ES0019</td><td>Dispositivo de proteção de células usado para lavar o sangue do doador</td></tr><tr><td>Desfibrilador cardíaco</td><td>Zoll</td><td>M Series</td><td>Desfibrilador cardíaco</td></tr><tr><td>Porta-agulha Castro V</td><td>. Mueller</td><td>CH8589</td><td></td></tr><tr><td>CG4 cartuchos iStat</td><td>Abbott</td><td>03P85-25</td><td>POC testando</td></tr><tr><td>cartuchos CG8 iStat</td><td>Abbott</td><td>03P88-25</td><td>Teste POC</td></tr><tr><td>Pinça DeBakey</td><td>V. Mueller</td><td>CH5902</td><td></td></tr><tr><td>Lápis descartável de eletrocautério</td><td>Covidien</td><td>E2450H</td><td></td></tr><tr><td>Pinça Gerald</td><td>V. Mueller</td><td>NL1451</td><td></td></tr><tr><td>Hemotherm 400CE Resfriador/aquecedor de reservatório duplo</td><td>Cincinnati Sub-Zero</td><td>86022</td><td>Resfriador de aquecedor usado para regular a temperatura de perfusão na perfusão ex vivo dispositivo</td></tr><tr><td>iSTAT 1</td><td>Abbott</td><td>04P75-03</td><td>Dispositivo de teste POC</td></tr><tr><td>Grampo Kocher V</td><td>. Mueller</td><td>SU2790</td><td></td></tr><tr><td>Aplicador de clipe grande</td><td>Sklar</td><td>50-4300</td><td></td></tr><tr><td>Clipes grandes</td><td>Teleflex</td><td>4200</td><td></td></tr><tr><td>Clipes macios grandes Covidien</td><td></td><td>8886867901</td><td></td></tr><tr><td>Aplicador de clipe médio</td><td>Sklar</td><td>50-4335</td><td></td></tr><tr><td>Clipes médios</td><td>Teleflex</td><td>2200</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum tesoura</td><td>V. Mueller</td><td>CH2006-001</td><td></td></tr><tr><td>No. 10 lâmina de bisturi</td><td>Swann-Mortan</td><td>301</td><td>Usado para incisão na pele</td></tr><tr><td>No. 11 lâmina de bisturi</td><td>Kiato Plus</td><td>18111</td><td>Usado para incisão vascular</td></tr><tr><td>Dispositivo OCS com base</td><td>TransMedics, Inc.</td><td></td><td>Dispositivo de perfusão ex vivo</td></tr><tr><td>OCS descartável</td><td>TransMedics, Inc.</td><td></td><td>Inserção de dispositivo de perfusão ex vivo com kits de perfusão</td></tr><tr><td>Cabo de estimulação</td><td>Remington Medical</td><td>FL-601-97</td><td></td></tr><tr><td>Cateter de cardioplegia pediátrica (4Fr)</td><td>Medtronic, Inc</td><td>10218</td><td>Usado para aplicar cardioplegia à raiz da aorta doadora</td></tr><tr><td>Cateter pediátrico de Foley</td><td>Teleflex</td><td>RSH170003080</td><td>Colocado pré-operatório para descomprimir a bexiga do receptor</td></tr><tr><td>Tesoura Potts</td><td>V. Mueller</td><td>CH13038</td><td></td></tr><tr><td>Bolsa de pressão x2 (1.000 mL)</td><td>Novaplus</td><td>V4010H</td><td>Usada para administrar cardioplegia a uma pressão definida</td></tr><tr><td>Pinça de Satinsky</td><td>V. Mueller</td><td>CH7305</td><td>Pinça vascular usada para criar anastomoses entre o coração do doador e os vasos receptores</td></tr><tr><td>Tesoura</td><td>Felco</td><td>FELCO 200A-50</td><td>Usada para realizar esternotomia</td></tr><tr><td>Pequenas promessas</td> <td>durasCovidien</td><td>8886867701</td><td></td></tr><tr><td>Afastador esternal</td><td>V. Mueller</td><td>CH6950-007</td><td></td></tr><tr><td>Fios de estimulação cardíaca temporários</td><td>Ethicon, Inc.</td><td>TPW32</td><td></td></tr><tr><td>Marcapasso temporário de câmara dupla</td><td>Medtronic, Inc</td><td>5388</td><td>Dispositivo de estimulação cardíaca</td></tr><tr><td>Kit de torniquete</td><td>Medtronic, Inc</td><td>79005</td><td>Torniquetes Rummel</td></tr><tr><td>Fita umbilical</td><td>Covidien</td><td>8886861903</td><td></td></tr><tr><td>Alças de vaso</td><td>Covidien</td><td>31145686</td><td></td></tr></tbody></table>

um protocolo de transplante de coração heterotópico porcino para entrega de terapêutica a um aoenxerto cardíaco

A Porcine Heterotopic Heart Transplantation Protocol for Delivery of Therapeutics to a Cardiac Allograft

Transplante cardíaco é o tratamento padrão ouro para insuficiência cardíaca em estágio final. No entanto, permanece limitado pelo número de corações doadores disponíveis e complicações, como disfunção primária do enxerto e rejeição do enxerto. O recente uso clínico de um dispositivo de perfusão ex vivo em transplante cardíaco introduz uma oportunidade única para o tratamento de a lotoxeris cardíacos com intervenções terapêuticas para melhorar a função e evitar respostas deletérios do receptor. Estabelecer um modelo translacional e animal grande para entrega terapêutica a todo o aoenxerto é essencial para testar novas abordagens terapêuticas no transplante cardíaco. O modelo de transplante de coração suíno e heterotópico na posição intraabdominal serve como um excelente modelo para avaliar os efeitos de novas intervenções e a imunopatologia da rejeição do enxerto. Este modelo também oferece sobrevida a longo prazo para o suíno, uma vez que o enxerto não é necessário para manter a circulação do receptor. O objetivo deste protocolo é fornecer uma abordagem reprodutível e robusta para alcançar a entrega ex vivo de um terapêutico a toda a alusão cardíaca antes do transplante e fornecer detalhes técnicos para realizar um transplante heterotópico de sobrevivência do coração ex vivo perfumado.

Esse grupo sobreviveu com sucesso a 9 suínos entre 5 e 35 dias após o protocolo apresentado aqui, dependendo do desenho do estudo. Dos 10 suínos submetidos a este protocolo, apenas 1 morreu prematuramente por complicações cirúrgicas, gerando uma taxa de sobrevivência de 90%. Demonstrado na Figura 2 é um diagrama da configuração de um coração heterotópico transplantado na posição intraabdominal em um porco. Ao determinar o local para anastomose do alusão, selecione um site que minimize qualqu...

Apresentamos um protocolo para a utilização de um sistema de perfusão normal ex vivo sanguinous para a entrega de terapêutica a um aoentrato cardíaco inteiro em um modelo de transplante de coração heterotópico porcina.

Um Protocolo de Transplante de Coração Heterotópico Porcino para Entrega de Terapêutica a um Aoenxerto Cardíaco

Cardiac transplantation is the gold standard treatment for end-stage heart failure. However, it remains limited by the number of available donor hearts ...

Este protocolo é o primeiro a descrever como a terapêutica pode ser efetivamente administrada a toda uma alusão cardíaca no grande modelo animal de transplante cardíaco. A principal vantagem deste protocolo é que permite aos pesquisadores testar os efeitos de uma terapêutica em toda uma alusão cardíaca durante longos períodos de tempo após o transplante. Esta técnica pode ser usada para investigar intervenções que previnem a rejeição do a looenxerto cardíaco, disfunção primária do enxerto, minimizar a necessidade de imunossupressão pós-operatória ou prolongar a vida útil de um aoenxerto cardíaco.Otimizar a exposição é a parte mais desafiadora do procedimento de transplante e requer que vários membros da equipe completem. Da mesma forma, perfusionistas experientes são necessários para coordenar e monitorar a perfusão ex vivo. Para começar, faça uma incisão de 20 a 30 centímetros de comprimento usando a lâmina número 10 do manúbrio até o xifoide, dependendo do tamanho do porco.Use eletrocauteria para dividir o peitoral maior do esterno até o xifoide ter o cuidado de dividir ao longo da linha média do esterno. Uma vez até o esterno, marque a linha média e comece a esternotomia a parti

a-porcine-heterotopic-heart-transplantation-protocol-for-delivery

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Neste vídeo, descrevemos um protocolo passo a passo para extrair o coração de um modelo suíno para transplante cardíaco.

Excisão de coração suíno: um protocolo para extrair coração suíno para transplante cardíaco

Modelos suínos de transplante de órgãos fornecem uma plataforma importante para estudar mecanismos de preservação de órgãos. Este artigo descreve um modelo heterotópico de autotransplante renal suíno, que permite investigar novas abordagens para melhorar o resultado do transplante usando enxertos renais marginais.

Heterotópico Renal autotransplante em um modelo suíno: Um Protocolo Passo-a-Passo

Aqui, nós descrevemos um modelo pré-clínico do grande-animal (porcine) da transplantação transplantação orthotopic do do coração que foi estabelecida firmemente e utilizada para investigar estratégias cardioprotetores novas.

Um modelo pré-clínico porcino de transplante cardíaco ortotópico

No presente protocolo, um modelo de transplante cardíaco em camundongos é utilizado para investigar o mecanismo de rejeição do enxerto cardíaco. Neste modelo heterotópico de transplante cardíaco, a eficiência da operação é melhorada, e a sobrevida dos enxertos cardíacos é garantida por uma anastomose cervical término-terminal do implante cardíaco usando uma técnica de Cuff modificada.

Técnica de Cuff Modificada para Modelo de Transplante Cardíaco Heterotópico Cervical:

O presente artigo descreve uma técnica modificada para transplante cardíaco vascularizado heterotópico com técnica asséptica atualizada, analgesia e anestesia.

Protocolo de transplante cardíaco heterotópico murino modificado que atende aos padrões contemporâneos de técnica asséptica, anestesia e analgesia

O protocolo aqui descrito descreve um modelo de transplante cardíaco suíno de alta fidelidade após doação após morte circulatória utilizando perfusão ex vivo do aloenxerto.

Um modelo suíno de alta fidelidade de transplante cardíaco ortotópico após doação após morte circulatória

Este estudo propõe um modelo pré-clínico de transplante cardíaco ortotópico em suínos miniatura de Bama, utilizando a técnica biatrial. O modelo é aplicável para imunologia de transplantes, avaliação de medicamentos e otimização de técnicas cirúrgicas, fornecendo suporte para aplicações clínicas de transplante cardíaco.

Um modelo pré-clínico de transplante cardíaco ortotópico em porcos miniatura de Bama usando a técnica biatrial

Este estudo apresenta um modelo pré-clínico heterotópico de xenotransplante cardíaco abdominal usando porcos e macacos knockout para α-Gal (GTKO). O modelo incorpora seleção otimizada de receptores, técnicas de anastomose vascular e estratégias de manejo perioperatório. É adequado para avaliar novos agentes imunossupressores e fornece uma plataforma conveniente para o avanço do xenotransplante cardíaco.

Um modelo padronizado de xenotransplante cardíaco heterotópico de porco para macaco

O manuscrito descreve as etapas necessárias para realizar o transplante cardíaco heterotópico no mouse.

Técnica de transplante heterotópico Murino Coração

De modo a compreender os mecanismos celulares e moleculares subjacentes neotissue formação e desenvolvimento de estenose em válvulas cardíacas de engenharia de tecidos, foi desenvolvido um modelo murino de transplante heterotópico de válvula cardíaca. A válvula cardíaca pulmonar foi transplantado para destinatário usando o coração técnica de transplante heterotópico.

O transplante de válvula pulmonar Usando um modelo do rato de Heterotópica Transplante de Coração

Aprenda a administrar terapêuticas em aloenxertos cardíacos porcinos usando um modelo de transplante heterotópico. Este método permite testar efeitos terapêuticos por períodos prolongados após o transplante.

Um Protocolo de Transplante de Coração Heterotópico Porcino para Entrega de Terapêutica a um Aoenxerto Cardíaco

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