Name: Aplicação da Tomografia de Coerência Óptica a um Modelo de Retinopatia de Rato (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-01-12T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Aprenda a aplicar tomografia de coerência óptica em modelos de retinopatia de rato. Esta técnica não invasiva permite imagens de alta resolução em tempo real e medições quantitativas da espessura retinal.

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Fonte do Projeto: Fundação de Ciências Naturais da Província de Guangdong (2018A0303130306). Os autores gostariam de agradecer ao Laboratório de Pesquisa Oftalmológica, ao Joint Shantou International Eye Center da Universidade de Shantou e à Universidade Chinesa de Hong Kong pelo financiamento e materiais.

As operações foram realizadas seguindo a Declaração sobre o Uso de Animais na Pesquisa Oftalmológica e Visão da Associação de Pesquisa em Visão e Oftalmologia. O delineamento experimental foi aprovado pelo Comitê de Ética Animal da instituição (Comitê de Ética Médica da JSIEC, EC 20171213(4)-P01). Camundongos C57BL/6J de dois meses de idade e camundongos knockout Vldlr foram utilizados neste estudo. Havia 7 camundongos em cada grupo, todos do sexo feminino e pesavam de 20 g a 24 g.
1. Condições experimentais
<ol><li>Atribua os ratos a dois grupos: um grupo experimental composto por camundongos knockout Vldlr e um grupo controle composto por camundongos C57BL/6J.</li>
	<li>Alimente os ratos com comida e água convencionalmente.</li>
	<li>Elevar os ratos no laboratório animal sob condições estáveis de temperatura ambiente (22 °C), umidade (50-60%), ciclo claro-escuro (12 h-12 h) e intensidade da luz ambiente (350-400 lux).</li>
	<li>Preparar o equipamento experimental: tomografia de coerência óptica com oftalmoscópio a laser de varredura confocal (cSLO) para animais de pequeno porte (Figura 1A).</li>
	<li>Preparar todos os materiais necessários para o experimento (Figura 1B) e pesar os camundongos (Figura 1C).</li>
</ol>2. Registos de informação
<ol><li>Registre as informações: grupo, código, data de nascimento, idade, sexo, peso e dosagem anestésica.</li>
</ol>3. Inicialização e teste do instrumento
<ol><li>Ligue o computador e inicie o software.</li>
	<li>Clique no botão Testar programa para concluir o programa de teste.</li>
	<li>Ligue o termóstato e pré-aqueça-o à temperatura de 37 °C.</li>
	<li>Inicie o procedimento do módulo OCT após o teste do programa.</li>
	<li>Crie um novo assunto e preencha as informações do mouse.</li>
	<li>Pré-aqueça o cobertor elétrico e cubra-o com toalhas cirúrgicas.</li>
</ol>4. Anestesia
<ol><li>Use pó anestésico liofilizado contendo tiletamina e zolazepam para preparar a mistura anestésica. NOTA: Siga as recomendações do comitê de ética animal local para a escolha, dosagem e via de administração da anestesia. Anestesiar o animal com um anestésico que proporcionará imobilidade e perda da percepção da dor por pelo menos 1 hora, após o que o animal se recupera rapidamente. A dosagem deve ser baseada na duração do tempo de experimento, peso do animal e outros fatores.</li>
	<li>Anestesiar o animal utilizando a mistura anestésica preparada. Certifique-se de manter o animal aquecido durante todo o procedimento até a recuperação.</li>
</ol>5. Aplicação de gotas midriáticas
<ol><li>Consiga a contenção manual do mouse pelo scruff, faça com que o globo ocular se projete ligeiramente e gire a cabeça do mouse com um olho voltado para cima.</li>
	<li>Aplicar as gotas midriáticas para dilatar as pupilas (Figura 2A).</li>
	<li>Verifique se há dilatação da pupila após 10 minutos.</li>
</ol>6. Posicionamento do mouse
<ol><li>Coloque um mouse em uma plataforma de cobertor elétrico.</li>
	<li>Revestir ambos os olhos com gel de hialuronato de sódio medicinal (Figura 2B).</li>
	<li>Parafuse uma lente esférica dupla 60 D (lente predefinida) no dispositivo cSLO (Figura 1A-5, 6).</li>
	<li>Coloque uma lente de contato 100 D na córnea do camundongo com o lado côncavo tocando o gel de hialuronato de sódio na superfície da córnea (Figura 2C, D e Figura 3A-II).</li>
	<li>Coloque o mouse sobre a plataforma animal pequena e de temperatura constante e mantenha o olho a 1-2 mm de distância da lente do dispositivo cSLO (Figura 3A).</li>
	<li>Ajuste o ângulo da lente de contato com pinças para manter a pupila no centro da lente.</li>
	<li>Ajuste os ajustes na cabeça para fazer com que o olho fique voltado para a frente.</li>
</ol>7. Oftalmoscópio a laser de varredura confocal (cSLO)
<ol><li>Clique no botão OCT , escolha o módulo do mouse e inicie o programa cSLO (Figura 4B).</li>
	<li>Selecione o modo IR (fonte de luz: luz vermelha) e ajuste o parâmetro (intervalo: 2047, Figura 4D).</li>
	<li>Selecione o olho a ser examinado (olho direito: Figura 4C-1; olho esquerdo: Figura 4C-2). </li>
	<li>Controle a alavanca e mova a lente predefinida em direção à lente de contato lentamente.</li>
	<li>Ajuste o valor da dioptria até que a imagem do polo posterior esteja clara (Figura 4E).</li>
	<li>Faça ajustes adicionais para alinhar a imagem do polo posterior da retina, centralizando-a na cabeça do nervo óptico.</li>
</ol>8. Tomografia de coerência óptica (OCT)
<ol><li>Inicie o programa OCT (Figura 4G).</li>
	<li>Clique na barra de progresso para cima e para baixo até que a imagem da OCT apareça (Figura 4H).</li>
	<li>Ajustar parâmetros: Range Min (Figura 4I) = 0-20, Range Max (Figura 4J) = 40-60.</li>
	<li>Ajuste a distância da lente predefinida e a direção da posição até obter uma imagem OCT ideal.</li>
	<li>Selecione a posição de varredura movendo a linha padrão no cSLO (Figura 4M).</li>
	<li>Comece a varredura da cabeça do nervo óptico.</li>
	<li>Coletar imagens na mesma ordem para cada olho: linha horizontal: cabeça do nervo óptico → superior → inferior; linha vertical: cabeça do nervo óptico → nasal → temporal.</li>
	<li>Colete imagens de quatro direções.</li>
	<li>Clique em Média para sobrepor os sinais de imagem cSLO e OCT (Figura 4F e Figura 4O).</li>
	<li>Clique no botão de captura para adquirir a imagem SLO-OCT (Figura 4P).</li>
	<li>Salve e exporte todas as imagens (Figura 4Q, R).</li>
</ol>9. Fim da experiência (após o exame PTU)
<ol><li>Coloque o mouse sobre o cobertor elétrico para mantê-lo aquecido até que ele acorde. NOTA: O rato deve ser monitorizado até recuperar a consciência suficiente para manter a decúbito esternal. A exposição pós-operatória à luz brilhante deve ser minimizada.</li>
	<li>Remova a lente de contato 100 D.</li>
	<li>Aplique o gel de olho de levofloxacina para proteger a córnea.</li>
	<li>Coloque o rato de volta na gaiola depois de acordar. NOTA: Certifique-se de que o rato examinado não é devolvido à companhia de outros ratinhos até que esteja totalmente recuperado.</li>
	<li>Desligue o software e desligue o computador.</li>
	<li>Limpe a lente de contato 100 D com água; secar a lente.</li>
	<li>Limpar e desinfetar o ambiente.</li>
</ol>10. Análise de imagem
<ol><li>Compare as imagens OCT de camundongos knockout Vldlr com as de camundongos C57BL/6J.</li>
	<li>Observe múltiplas posições: varreduras verticais e horizontais passando pela papila óptica; exames superiores, inferiores, nasais e temporais; e varreduras anormais do local de reflexão.</li>
	<li>Observe a espessura, a forma, as camadas e as lesões de reflectância anormais da retina em cada imagem, bem como a interface vítrea da retina e do corpo vítreo.</li>
	<li>Registre os locais, características e números de lesões.</li>
</ol>11. Correção da estratificação retiniana
<ol><li>Clique em Load Examination na interface da OCT (Figura 5A).</li>
	<li>Chame as imagens OCT de um mouse de uma janela pop-up.</li>
	<li>Selecionar imagens: Digitalização de imagens OCT através da papila óptica, horizontal ou verticalmente.</li>
	<li>Clique duas vezes na imagem no Media Container para exibi-la na tela (Figura 5C).</li>
	<li>Clique em Layer Detection (Detecção de camadas ) para concluir a colocação automática de camadas na retina (Figura 5D).</li>
	<li>Selecione as linhas divisórias em ambos os lados da camada preparada para análise (Figura 6D-10).</li>
	<li>Selecione uma linha divisória separada (Figura 6B-6) e clique em Edit Layer (Figura 6A-1) para ativar a linha quando um círculo vermelho aparecer (Figura 6B-7).</li>
	<li>Ajuste o espaçamento (Figura 6A-4, por exemplo, 50) e o intervalo limite (Figura 6A-5, por exemplo, 50).</li>
	<li>Modifique a linha divisória movendo o círculo vermelho (compare a linha divisória verde na Figura 6B e na Figura 6C; A Figura 6C mostra o resultado modificado).</li>
</ol>12. Espessura da laminação da retina
<ol><li>Clique no botão Measure Marker (Figura 6D-9).</li>
	<li>Selecione a linha divisória da camada a ser analisada (por exemplo, na camada nuclear externa, selecione a 4ª e a5ª linha divisória na lista) para exibir o limite da camada na imagem OCT (Figura 6D-10).</li>
	<li>Selecione Connect with Layer (Figura 6D-11) e Stay Connected on Move (Figura 6D-12).</li>
	<li>Selecione a área para exibir os resultados (a coluna selecionada é colorida, Figura 6D-13).</li>
	<li>Clique na posição a ser analisada na imagem OCT para que a linha de medição apareça (perpendicular ao eixo horizontal e consistente com a cor da área resultante) (Figura 6D-14).</li>
	<li>Clique na próxima coluna para a próxima medição e revele os dados anteriores (Figura 6E-15).</li>
	<li>Leia o valor Vert (espessura da posição medida) na linha Comprimento em μm (tecido) (Figura 6E, retângulo vermelho).</li>
	<li>Clique em Delete Marker (Figura 6E-16) e New Marker (Figura 6E-17) para testar novamente para que os resultados cubram os dados originais (se a remedição for necessária).</li>
	<li>Pressione Print Scr no teclado para salvar capturas de tela ou clique em Save Examination para salvar diretamente (Figura 5H).</li>
	<li>Insira os dados em uma planilha ou software estatístico para análise estatística.</li>
</ol>13. Medição da espessura total da retina
<ol><li>Selecione a linha 1 (ILM, membrana limitante interna, Figura 7B) e a linha 7 (OS-RPE, OS: segmentos fotorreceptores externos; PSE: camada epitelial pigmentar da retina, Figura 7C) na lista no canto superior direito. NOTA: A espessura total da retina significa a espessura da camada do neurepitélio da retina, que é a retina entre ILM e OS-RPE na OCT).</li>
	<li>Meça a espessura da retina em ambos os lados da papila óptica em um intervalo específico.<ol><li>Por exemplo: a partir do aparecimento da estrutura da retina na borda da papila óptica, meça 4 valores com espaçamento de 200 μm da régua horizontal (Figura 7G, H).</li>
	</ol></li>
	<li>Registre todos os valores medidos em uma planilha.</li>
	<li>Use vários testes t (um por linha) para comparar os valores medidos de cada posição correspondente em ambos os grupos.</li>
</ol>

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</ol>

Os autores declaram não haver potencial conflito de interesses.

Neste estudo, a OCT usando um sistema de imagem de retina de pequenos animais foi aplicada para avaliar as alterações da retina em camundongos knockout Vldlr , que demonstram descolamento vítreo posterior incompleto, neovascularização sub-retiniana e afinamento da espessura da retina. OCT é um método de imagem não invasivo para examinar a condição da retina in vivo. A maioria dos dispositivos OCT são projetados para exame oftalmológico humano. O tamanho do equipamento de hardware, a configuração da dist...

A tomografia de coerência óptica (OCT) é uma técnica de imagem que pode fornecer imagens in vivo de alta resolução e corte transversal para tecidos 1,2,3,4,5,6,7,8, especialmente para o exame não invasivo na retina 9,10,11,12 . Também pode ser usado para quantificar alguns biomarcadores importantes, como a espessura da retina e a espessura da camada de fibras nervosas da retina. O princípio da OCT é a reflectometria de coerência óptica, que obtém informações teciduais transversais a partir da coerência da luz refletida de uma amostra e a converte em uma forma gráfica ou digital através de um sistema computacional7. A OCT é amplamente utilizada em clínicas de oftalmologia como uma ferramenta essencial para diagnóstico, acompanhamento e manejo de pacientes com distúrbios da retina. Também pode fornecer informações sobre a patogênese das doenças da retina.
Além das aplicações clínicas, a OCT também tem sido usada em estudos com animais. Embora a patologia seja o padrão-ouro de caracterização morfológica, a OCT tem a vantagem de imagens in vivo não invasivas e acompanhamento longitudinal. Além disso, tem sido demonstrado que a OCT está bem correlacionada com a histopatologia em modelos animais de retinopatia 11,13,14,15,16,17,18,19,20. O rato é o animal mais comumente usado em estudos biomédicos. No entanto, seus pequenos globos oculares representam um desafio técnico para a realização de imagens OCT em camundongos.
Em comparação com a OCT usada pela primeira vez para imagens da retina em camundongos21,22, a OCT em pequenos animais agora foi otimizada em relação a sistemas de hardware e software. Por exemplo, o OCT, em combinação com o rastreador, reduz significativamente a relação sinal-ruído; As atualizações do sistema de software OCT permitem que mais camadas da retina sejam detectadas automaticamente; e o beamer DLP integrado ajuda a reduzir os artefatos de movimento.
O receptor de lipoproteína de densidade muito baixa (Vldlr) é uma proteína transmembrana em células endoteliais. É expressa em células endoteliais vasculares da retina, células epiteliais pigmentares da retina e ao redor da membrana limitante externa23,24. A neovascularização sub-retiniana é o fenótipo de camundongos knockout Vldlr 23. Portanto, camundongos knockout Vldlr são usados para investigar a patogênese e a potencial terapia da neovascularização sub-retiniana. Este artigo demonstra a aplicação de imagens OCT para detectar lesões retinianas em camundongos knockout Vldlr, na esperança de fornecer alguma referência técnica para a pesquisa de retinopatia em modelos animais de pequeno porte.

<table><tbody><tr><td>Lente de contato 100-Dpt</td><td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td><td></td><td>Acessório pertencente ao RETImap</td></tr><tr><td>Lente de vidro asférica dupla de 60 Dpt</td><td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td><td></td><td>Acessório pertencente ao RETImap</td></tr><tr><td>Manta de aquecimento elétrico</td><td>POPOCOLA</td><td>CW-DRT-01</td><td>50 x 35 cm</td></tr><tr><td>Seringa de injeção (1 mL)</td><td>Kaile</td><td></td><td>0,45 x 16RWLB</td></tr><tr><td>Gel para os olhos de cloridrato de levofloxacina</td><td>EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD</td><td></td><td>5 g: 0,015 g</td></tr><tr><td>Gel de hialuronato de sódio médico</td><td>Alcon</td><td>16H01E</td><td></td></tr><tr><td>Seringas de microlitro</td><td>Xangai high pigeon industry and trade co., LTD</td><td>Q31/0113000236C001-2017</td><td>50 &micro; L</td></tr><tr><td>solução de iodopovidona</td><td>Guangdong medihealth pharmaceutical Co.,LTD</td><td></td><td>100 mL</td></tr><tr><td>RETImap</td><td>ROLAND CONSULT</td><td>19-99_50-2.1_1.2E</td><td>cSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP</td></tr><tr><td>Brincos</td> para pequenos animais <td>OSMO POCKET OT110</td><td>INS1005-1S</td><td></td></tr><tr><td>Tropicamida Fenilefrina Colírio</td><td>Santen Pharmaceutical Co.,LTD</td><td></td><td>5 mg/mL</td></tr><tr><td>Xilazina</td><td>Sigma</td><td>X1251-5G</td><td>5 g</td></tr><tr><td>Zoletil 50</td><td>Virbac.S.A</td><td>7FRPA</td><td>Tiletamina 125 mg + Zolazepam 125 mg</td></tr></tbody></table>

aplicação da tomografia de coerência Óptica a um modelo de retinopatia de rato

Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy

A tomografia de coerência óptica (OCT) oferece um método não invasivo para o diagnóstico de retinopatia. A máquina OCT pode capturar imagens transversais da retina a partir das quais a espessura da retina pode ser calculada. Embora a OCT seja amplamente utilizada na prática clínica, sua aplicação na pesquisa básica não é tão prevalente, especialmente em pequenos animais, como camundongos. Devido ao pequeno tamanho de seus globos oculares, é um desafio realizar exames de imagem de fundo de olho em camundongos. Portanto, um sistema de imagem retiniana especializado é necessário para acomodar a imagem OCT em pequenos animais. Este artigo demonstra um sistema específico para pequenos animais para procedimentos de exame OCT e um método detalhado para análise de imagens. Os resultados do exame OCT da retina de camundongos knockout do receptor de lipoproteína de densidade muito baixa (Vldlr) e camundongos C57BL/6J são apresentados. As imagens OCT de camundongos C57BL/6J mostraram camadas da retina, enquanto as de camundongos knockout Vldlr mostraram neovascularização sub-retiniana e afinamento da retina. Em resumo, o exame OCT poderia facilitar a detecção não invasiva e a medição da retinopatia em modelos de camundongos.

Graças às varreduras de alta resolução da OCT, as camadas da retina do rato podem ser observadas e reflexões anormais e suas localizações exatas podem ser identificadas. As imagens de OCT da retina de camundongos knockout Vldlr e C57BL/6J foram comparadas neste estudo. As imagens OCT de todos os camundongos C57BL/6J mostraram várias camadas da retina com diferentes refletividades, e a demarcação foi clara (Figura 8D). Em contraste, todos os camundongos knockout Vldlr aprese...

Aqui, descrevemos uma técnica de imagem in vivo usando tomografia de coerência óptica para facilitar o diagnóstico e a medição quantitativa da retinopatia em camundongos.

Aplicação da Tomografia de Coerência Óptica a um Modelo de Retinopatia de Rato

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images ...

A tomografia de coerência óptica é amplamente utilizada no diagnóstico clínico de diferentes doenças da retina, mas ainda é difícil de aplicar em modelos de camundongos. Este protocolo descreve como gerenciar a técnica OCT em animais. Esta tecnologia pode ser aplicada a animais com diferentes tamanhos de globo ocular.Ele permite imagens transversais da retina não invasivas, de alta resolução e em tempo real, juntamente com medições quantitativas da espessura da retina. A OCT auxilia no diagnóstico de retinopatia, identificando as características da lesão, como localização, alcance, forma e tamanho das lesões, bem como todas as suspeitas de anormalidades da retina, como a neovascularização da retina. Este protocolo é aplicável a estudos em animais ou doenças de fundo de olho, incluindo doenças da retina.Antes de iniciar o procedimento, esteja preparado e siga o protocolo passo a passo. Realizar o experimento quando o animal estiver anestesiado. Deve-se ser capaz de obter imagens OCT de boa qualidade após alguma prática.Para começar, ligue o computador e inicie o software. Clique no botão de programa de teste para concluir o programa de teste. Em seguida, ligue o termostato e pré-aqueça-o a 37 graus Celsius.Após o teste do programa, inicie o procedimento do módulo OCT. Crie um novo assunto e preencha as informações do mouse. Em seguida, pré-aqueça o cobertor elétrico e cubra-o com toalhas cirúrgicas.Coloque o rato anestesiado na plataforma da manta eléctrica e cubra imediatamente ambos os olhos com gel de hialuronato de sódio médico. Em seguida, coloque uma lente de contato 100D na córnea do rato com o lado côncavo tocando o gel de hialuronato de sódio na superfície da córnea. Em seguida, coloque o mouse na pequena plataforma animal de temperatura constante do dispositivo cSLO.Ajuste o ângulo da lente de contato com pinças para manter a pupila no centro da lente. Ajuste os ajustes na cabeça para fazer com que o olho fique voltado para a frente. Clique no botão OCT, escolha o módulo do mouse e inicie o programa cSLO.Em seguida, use a alavanca de operação para mover lentamente a lente predefinida em direção à lente de contato. Faça ajustes adicionais para alinhar a imagem do polo anteroposterior, centralizando-a na cabeça do nervo óptico. Em seguida, inicie o programa OCT e clique na barra de progresso para cima e para baixo até que a imagem da OCT apareça.Ajuste o intervalo mínimo entre 0 a 20 e o intervalo máximo entre 40 a 60. Em seguida, ajuste a distância da lente predefinida e a direção da posição até que uma imagem OCT ideal seja obtida. Selecione a posição de varredura movendo a linha padrão no cSLO.Em seguida, clique em média para sobrepor o sinal de imagem cSLO e OCT e clique no botão de captura para adquirir a imagem da OCT SLO. Após o experimento, remova a lente de contato 100D e aplique o gel ocular de levofloxacina para proteger a córnea. Para correção da estratificação da retina, clique em carregar o exame na interface OCT e chame as imagens da OCT de uma janela pop-up.Em seguida, clique duas vezes na imagem no contêiner de mídia para exibi-la na tela. Em seguida, clique em detecção de camada para concluir a colocação automática de camadas na retina. Depois de selecionar a linha divisória em ambos os lados da camada preparada para análise, clique em editar camada para ajustar o espaçamento e limitar o intervalo.Em seguida, modifique a linha movendo o círculo vermelho. Para medir a espessura da laminação da retina, clique no botão de marcador de medida e selecione a linha divisória da camada a ser analisada para exibir o limite da camada na imagem OCT. Em seguida, selecione conectar com a camada e permanecer conectado em movimento.Em seguida, selecione a área para exibir os resultados e clique na posição a ser analisada na imagem da OCT para que a linha de medição apareça. Clique na próxima coluna para medições subsequentes e para revelar os dados anteriores. Para medir a espessura total da retina, selecione a linha um e a linha sete na lista no canto superior direito.Em seguida, a partir do aparecimento da estrutura da retina na borda da papila óptica, meça quatro valores em intervalos de espaçamento de 200 micrômetros na régua horizontal. Imagens OCT de camundongos C57BL/6 mostraram várias camadas da retina com demarcação clara. Em contraste, os camundongos knockout Vldlr apresentaram lesões hiper-reflexivas anormais.As imagens da OCT mostraram algumas bandas reflexivas médias nas superfícies da retina dos camundongos knockout Vldlr. Essas bandas aderiram ao vaso da retina, sendo consistentes com as características da OCT de descolamento vítreo incompleto. Uma lesão hiperrreflexiva apareceu no espaço sub-retiniano e se espalhou para a camada nuclear externa, mas não rompeu a camada plexiforme externa.A aparência da OCT desta lesão foi consistente com os achados patológicos. O corte patológico mostrou que a neovascularização rompeu a camada do epitélio pigmentar da retina, os segmentos internos-externos fotorreceptores e a membrana limitante externa, invadindo a camada nuclear externa, mas não a camada plexiforme externa. Outra faixa de lesão hiperrreflexiva, localizada no espaço sub-retiniano, não envolveu a camada nuclear externa.Consistente com os achados patológicos, essa neovascularização sub-retiniana não rompeu a membrana limitante externa. A comparação da espessura da retina do olho direito nas direções temporal, nasal, superior e inferior do polar posterior entre os dois grupos revelou que a espessura da retina dos camundongos knockout Vldlr foi significativamente menor do que a dos camundongos C57BL/6J. Ao executar o protocolo, coloque corretamente uma lente de contato 100D na córnea e, em seguida, ajuste a posição da imagem.Selecione o local de digitalização e sobreponha a imagem antes de fotografar. Após esse procedimento, a OCT do segmento anterior é viável, exigindo a alteração da distância entre o cristalino predefinido e a córnea. Pode mostrar a córnea, a câmara anterior, a íris, o corpo ciliar e o cristalino.Esta técnica fornece uma importante ferramenta para a pesquisa de retinopatia em modelos animais de pequeno porte, promovendo a detecção não invasiva e a medição da retinopatia na pesquisa básica.

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Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este vídeo demonstra uma técnica de imagem in vivo para detectar e quantificar a inflamação ocular em um modelo de camundongo com uveíte pós-infecciosa. A técnica, conhecida como tomografia de coerência óptica (OCT), gera imagens transversais de alta resolução do olho para avaliar a progressão da doença.

Tomografia de coerência óptica para avaliação de uveíte em modelo de camundongo

Source: &lt;a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/55865/ coerência-óptica-tomografia-imagem-de-camundongo-células-ganglionares-de-retina-em-vivo'&gt;Jagodzinska, J., et. al., Tomografia de Coerência Óptica: Imagem de células ganglionares da retina de camundongos In Vivo. J. Vis. exp. (2017)  Neste vídeo, demonstramos o uso da tomografia de coerência óptica de domínio espectral (SD-OCT) para obter imagens das camadas da retina e avaliar as mudanças estruturais em um modelo...

Imagem in vivo da retina de camundongo usando tomografia de coerência óptica

Este manuscrito descreve um protocolo para a imagem no vivo da retina do rato com a tomografia de coerência óptica de domínio espectral de alta resolução (SD-OCT). Centra-se em células ganglionares da retina (RGC) na região de peripapillary, com vários digitalização e quantificar as abordagens descritas.

Tomografia de coerência óptica: Imagens Mouse ganglionares da retina células In Vivo

Aqui vamos demonstrar uma nova abordagem para usando a tomografia de coerência óptica espectral-domínio de alta resolução (HR-SD-OCT) para auxiliar entrega de agentes de terapia do gene para o espaço subretinal, avaliar sua cobertura areal e caracterizar vitalidade fotoreceptor.

Tomografia de coerência óptica Mouse ultra alta resolução para auxiliar a injeção intra-ocular em pesquisa de terapia de genes da retina

Este protocolo descreve técnicas como de alta resolução de imagem como tomografia de coerência óptica de domínio espectral e digitalização laser Oftalmoscopia pode ser utilizado em pequenos roedores, usando um sistema de plataforma de imagem oftálmica, para obter informações sobre espessura da retina e microglial celular distribuição, respectivamente.

Na Vivo Imagem de Cx3cr1gfp/gfp repórter ratos com a tomografia de coerência óptica espectral-domínio e digitalização Laser Oftalmoscopia

Um protocolo detalhado para a avaliação de leituras visuais e estruturais em roedores por coerência óptica tomografia computadorizada e optocinético resposta é apresentado. Os resultados fornecem informações valiosas para investigação oftalmológica, bem como neurológica.

Usando a tomografia de coerência óptica e resposta Optokinetic como estrutural e funcional sistema Visual leituras em camundongos e ratos

Aqui, descrevemos o uso da tomografia de coerência óptica de domínio espectral (SD-OCT) para visualizar estruturas retinianas e oculares in vivo em modelos de degeneração da retina, glaucoma, retinopatia diabética e miopia.

Avaliações estruturais in vivo de doenças oculares em modelos de roedores utilizando tomografia de coerência óptica

Aqui, descrevemos um modelo de camundongo de isquemia de retina por oclusão da artéria carótida comum bilateral transitória usando suturas simples e um grampo. Este modelo pode ser útil para entender os mecanismos patológicos da isquemia da retina causada por anormalidades cardiovasculares.

Um modelo murino de lesão isquêmica da retina induzida pela oclusão da artéria da carótida comum bilateral transitória

Aqui, descrevemos um protocolo otimizado para oclusão da veia retiniana usando rosa bengala e um sistema de microscópio de imagem retiniana guiado a laser com recomendações para maximizar sua reprodutibilidade em cepas geneticamente modificadas.

Otimização do Modelo de Oclusão de Veia da Retina em Camundongo para Limitar a Variabilidade

O presente protocolo descreve os passos para o alinhamento in vivo de imagens de fibrografia por tomografia de coerência óptica de luz visível (vis-OCTF) com imagens confocais ex vivo da mesma retina de camundongos com o objetivo de verificar a morfologia do feixe axonal de células ganglionares da retina observada nas imagens in vivo.

Alinhamento de Fibrogramas de Tomografia de Coerência Óptica com Luz Visível com Imagens Confocais da Mesma Retina de Camundongo

Aprenda a aplicar tomografia de coerência óptica em modelos de retinopatia de rato. Esta técnica não invasiva permite imagens de alta resolução em tempo real e medições quantitativas da espessura retinal.

Aplicação da Tomografia de Coerência Óptica a um Modelo de Retinopatia de Rato

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