Name: Entrevista: apresentação de antígenos glicolipídeos por CD1d eo potencial terapêutico das células NKT Ativação (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-12-31T19:27:00.000+00:00
Duration: 18 min 8 s
Description: Aprenda sobre a apresentação de antígenos glicolipídeos por CD1d e o potencial terapêutico das células NKT em imunologia, câncer e doenças autoimunes.

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<ol><li>Khurana, A., Kronenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Method+for+Production+of+Recombinant+CD1d+Protein+in+Insect+Cells%5BTitle%5D)+AND+%2212%2F10%2F2007%29+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Method for Production of Recombinant CD1d Protein in Insect Cells.</a> 12/10/2007) Journal of Visualized Experiments. , Forthcoming.</li>
</ol>

Os autores não têm nada a declarar.

entrevista: apresentação de antígenos glicolipídeos por cd1d eo potencial terapêutico das células nkt ativação

Interview: Glycolipid Antigen Presentation by CD1d and the Therapeutic Potential of NKT cell Activation

Células natural killer T (NKT) são determinantes críticos da resposta imune ao câncer, a regulação da doença autioimmune, a depuração de agentes infecciosos, bem como o desenvolvimento de placas artheriosclerotic. Nesta entrevista, Mitch Kronenberg discute os esforços de seu laboratório para entender o mecanismo através do qual as células NKT são ativados por antígenos glicolipídeos. Central para estes estudos é CD1d - a molécula apresentadoras de antígenos que apresenta glicolipídeos nas células NKT. O advento da tecnologia CD1d tetrâmero, uma técnica desenvolvida pelo laboratório Kronenberg, é fundamental para a classificação e identificação de subconjuntos de células específicas glicolipídeo T-reativa. Mitch explica como agonistas glicolipídeo estão sendo usados ​​como agentes terapêuticos para ativar as células NKT em pacientes com câncer e como tetrâmeros CD1d pode ser usado para avaliar o estado da população de células NKT in vivo após a terapêutica agonista glicolipídeo. Status atual de ensaios clínicos em curso com estes agonistas são discutidos, bem como previsão de Mitch para áreas no campo da imunologia, que terá emergentes importância no futuro próximo.

Células natural killer T (NKT) são determinantes críticos da resposta imune ao câncer, a regulação da autioimmunity, eliminação da infecção, eo desenvolvimento de placas artheriosclerotic. Nesta entrevista, Mitch Kronenberg discute os esforços de seu laboratório para entender o mecanismo através do qual as células NKT são ativados por antígenos glicolipídeos.

Entrevista: apresentação de antígenos glicolipídeos por CD1d eo potencial terapêutico das células NKT Ativação

As células T Natural Killer (NKT) são determinantes críticos da resposta imunitária ao cancro, da regulação de doenças autoimunes, da depuração de infeções...

Olá, meu nome é Mitchell Cronenberg e estou no Instituto La Jolla para Alergia e Imunologia. Sou, na verdade, o presidente e diretor científico, mas tenho um laboratório de pesquisa muito ativo e é sobre isso que vamos falar, é claro: uma das tecnologias que possuímos, os tetrameros CD1D. A maior parte do trabalho no meu laboratório diz respeito a linfócitos T reativos ao CD1D.E essas células são únicas porque reconhecem glicolipídios em vez de peptídeos. E outro ramo do meu laboratório está voltado para um tema completamente diferente, o sistema imunológico mucosal e sua regulação. As moléculas CD1 são moléculas apresentadoras de antígenos, o que significa que elas ligam antígenos ou fragmentos de proteínas ou outras moléculas e os expõem para o reconhecimento por células T.Agora existem realmente dois tipos diferentes de moléculas apresentadoras de antígenos. Há aquelas que retêm ou apresentam peptídeos, e há aquelas que retêm lipídios e glicolipídios. E as moléculas CD1 retêm lipídios e glicolipídios.Essa é a função deles, e eles sustentam ou apresentam esses lipídios e glicolipídios para as células T. Na verdade, existem quatro tipos diferentes de moléculas CD1, CD1A, CD1B, CD1

interview-glycolipid-antigen-presentation-cd1d-therapeutic-potential

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Um método para preparar células de insetos e infectá-las com baculovírus com a finalidade de produção de recombinantes proteinand mCD1d gerando tetrâmeros mCD1d.

Um método para produção de proteína recombinante em células de inseto mCD1d.

Aqui nós descrevemos um método para ativar e expandir células humanas NKT de granel populações de células T com células artificiais apresentando antígeno (AAPC). O uso de CD1d baseado AAPC fornece um método padronizado para a geração de números elevados de células NKT funcionais.

Antígeno Artificial célula apresentadora de ativação mediada (AAPC) e expansão de células T Natural Killer

Subconjuntos distintos de células dendríticas existem como populações raras em órgãos linfóides e, portanto, são difíceis de isolar em número e pureza suficientes para experimentos imunológicos. Aqui descrevemos um método de alta eficiência e alto rendimento para isolamento de todos os principais subconjuntos atualmente conhecidos de células dendríticas esplênicas de camundongos.

Um método de rendimento eficiente e alta para o isolamento de subpopulações de células dendríticas Rato

Um método simples e de confiança é descrito aqui para analisar um conjunto de funções das células NK, tais como desgranulação, produção de citocina e quimiocina dentro de diferentes subconjuntos de células NK.

Ensaio de citometria de fluxo baseada para a monitorização das funções das células NK

A erradicação mediada por células por células cancerígenas é importante para a iniciação e progressão do câncer. Aqui, apresentamos dois protocolos não baseados em radioatividade para avaliar a citotoxicidade mediada por célulank em relação às células tumorais hepáticas. Além disso, um terceiro protocolo é apresentado para analisar a migração de células NK.

Medição da Citotoxicidade e Migração Mediadas por Células Assassinas Naturais no Contexto das Células Tumorais Hepáticas

Um protocolo para estudar eventos orientados pela FcγRIIIa por anticorpos terapêuticos em células assassinas naturais humanas é descrito aqui. Esta plataforma de estimulação artificial permite o interrogatório de funções de efeitos a jusante, como degranulação, produção de quimiocina/citocina, e caminhos de sinalização mediados pelas porções fcγriiia e fc de anticorpos envolvidos na vinculação.

Avaliação de Eventos celulares assassinos naturais humanos impulsionados pelo engajamento da FcγRIIIa na presença de anticorpos terapêuticos

Apresentamos dois protocolos de coloração diferentes para detecção de ligantes NKG2D (NKG2DL) em amostras de leucemia mielóide aguda primária humana (LMA). A primeira abordagem é baseada em uma proteína de fusão, capaz de reconhecer todos os ligantes conhecidos e potencialmente ainda desconhecidos, enquanto o segundo protocolo conta com a adição de múltiplos anticorpos anti-NKG2DL.

Duas abordagens citométricas de fluxo de detecção de superfície de ligante NKG2D para distinguir células-tronco de subpopulações a granel em leucemia mielóide aguda

Descrevemos um protocolo rápido e robusto para enriquecer células T (iNKT) invariantes do assassino natural do baço do rato e expandi-las in vitro para números adequados para estudos in vitro e in vivo.

Purificação e Expansão de Células T Assassinos Naturais Invariantes para Estudos In vitro e In vivo

Este protocolo descreve a reprogramação in vivo de células cancerígenas de camundongo em células dendríticas tipo 1 dentro do microambiente tumoral por meio da expressão forçada dos fatores de transcrição PU.1, IRF8 e BATF3.

Reprogramação In Vivo Tratável de Células Tumorais para Células Dendríticas Convencionais Tipo 1

Este protocolo oferece um fluxo de trabalho padronizado in vitro. para medição consistente da citotoxicidade natural, mediada pelo receptor de antígeno quimérico e dependente de anticorpos de células humanas natural killer, utilizando imagens de células vivas e citometria de fluxo.

Quantificação da citotoxicidade de células NK potenciada por receptores de antígeno quiméricos e anticorpos terapêuticos usando imagem de células vivas e citometria de fluxo

Aprenda sobre a apresentação de antígenos glicolipídeos por CD1d e o potencial terapêutico das células NKT em imunologia, câncer e doenças autoimunes.

Entrevista: apresentação de antígenos glicolipídeos por CD1d eo potencial terapêutico das células NKT Ativação

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