1 de fevereiro de 2022
Há várias diferenças entre os ventrículos direito e esquerdo. No entanto, a fisiopatologia do infarto ventricular direito (RVI) não foi esclarecida. No presente protocolo, é introduzido um método reprodutível para geração de modelos de mouse RVI, o que pode fornecer um meio de explicar o mecanismo do RVI.
O ventricular direito é mais resistente à isquemia do que o esquerdo. Introduzimos uma técnica para gerar um modelo de infecção ventricular direita, que pode esclarecer o mecanismo fisioterásio durante o desenvolvimento de um infarto ventricular direito. Localizamos a artéria coronária direita através do custeio vascular e definimos a área de ligadura que é fundamental para gerar com sucesso um modelo de infarto ventricular direito do mouse.
Demonstrando o procedimento estará Linhai Ruo, um médico propaganda do meu laboratório. Coloque o supino do mouse sobre uma almofada e garanta a profundidade da anestesia pela ausência de uma resposta de retirada do dedo do pé. Fixar seus incisivos com uma sutura e imobilizar os membros com fita adesiva.
Remova o cabelo do pescoço para xiphoid com um creme depilatório. Puxe a língua ligeiramente com pinças, levante a mandíbula com um depressor de língua para expor o glottis. E realizar intubação intra traqueal inserindo uma cânula de calibre 22 no glottis.
Conecte os eletrodos de eletrocardiografia aos membros do mouse corretamente e regissou o ECG. Para abrir o peito, faça uma incisão de um centímetro de comprimento na pele, paralela à terceira costela direita com uma tesoura oftálmica. Determine novamente o terceiro espaço intercostal e garanta espaço adequado de acordo com o ângulo do esterno.
Separe e corte os músculos peitoral e peitoral com tesoura e micro fórceps acima do terceiro espaço intercostal. Depois disso, separe sem rodeios o músculo intercostal com fórceps do cotovelo para expor o campo cirúrgico e, em seguida, inciso o pericárdio. Levante o átrio direito com algodão estéril e liga a artéria coronária direita com um 8-0 estéril fio de nylon, com uma faixa de ligadura de três a cinco milímetros.
Depois de ligar a artéria coronária direita, observe o monitoramento do eCG chumbo 3, mostrando elevação do segmento ST. Remova os músculos de algodão e sutura e a pele com uma linha de nylon estéril 5-0. Em seguida, coloque o mouse na almofada de aquecimento para promover a recuperação.
Coloque o mouse na posição supina em uma plataforma ultrassônica para fixação animal e operação ultrassônica. Tape suas garras no eletrodo para obter uma gravação de ECG, através de um sistema ligado à máquina ultrassônica. Retire o cabelo do peito do rato com um creme depilatório e aplique gel de ultrassom na pele do peito.
Coloque a plataforma na posição horizontal. Oriente o transdutor paralelo à perna esquerda e obtenha a imagem do eixo longo ventricular esquerdo. Gire a sonda 90 graus no sentido horário para obter a visão de acesso curto do ventrículo esquerdo.
Pressione o botão da loja cine para salvar as imagens. Incline o canto superior esquerdo da plataforma no ponto mais baixo. Mova-se para baixo do transdutor verticalmente, mantendo sua posição sobre o abdômen superior e abaixo do diafragma do mouse sob modo B.
Ajuste ligeiramente a posição da plataforma girando seu eixo X e Y até que o ventrículo direito, o átrio direito, o átrio esquerdo e o ventrículo esquerdo sejam vistos na tela. E salve a imagem pressionando a loja cine ou o botão de quadro. Pressione o modo M.
Após a linha indicadora X aparecer a linha indicadora no orifício da válvula tricúspide, para obter o movimento do plano anual tricúspide. Pressione o Modo M novamente. Pressione o botão cine store ou frame store para salvar dados e imagens.
Incline o lado esquerdo da plataforma no ponto mais baixo. Coloque a sonda em um ângulo de 30 graus para o eixo horizontal ao longo da linha axilar anterior direita. Gire o eixo X e Y da plataforma para exibir o ventrículo direito.
Pressione o botão M-Mode e localize a linha indicadora no ponto hiperecérico de septo, para obter a imagem do Modo M da interface ventrículo direita. Pressione novamente o botão Modo M. Pressione o botão da loja cine para salvar a imagem.
Realizar intubação traqueal e definir o parâmetro do ventilador animal. Faça uma incisão bilateral de um centímetro na pele acima do processo xifoide e transceta o diafragma e a costela com uma tesoura oftálmica para expor o coração. Puna a parede livre ventricular direita com uma agulha calibre 32.
Retire a agulha e pressione a ferida com algodão para sangrar firmemente. Insira a ponta do cateter no ventrículo direito através do local da punção e empurre o cateter para a frente, lentamente. Ajuste a posição da ponta para obter uma forma típica de onda de pressão rv, mostrada em um monitor e sistema de gravação.
Após 10 minutos de estabilização, registos os dados da pressão arterial sistólica do RV, pressão rv e diastólica, e pressão ventricular direita máxima do RV aumentando a taxa de diminuição. Clique no botão de seleção para selecionar ciclos cardíacos para cálculo. E, em seguida, clique no botão analisado para calcular os valores médios dos ciclos selecionados.
Coloque o supino animal na almofada e entuba para ventilação artificial. Abra o peito com uma tesoura cirúrgica e exponha o coração. Faça um entalhe de três milímetros com uma tesoura oftálmica na atria direita e perfunda o coração com 5mL de soro fisiológico normal através do ápice cardíaco com um injetor.
Bloqueie o sangue da aorta com um grampo aórtico. E perfumar 0,1mL de 1 mg/mL nitroglicerina, através do ápice cardíaco com um injetor para dilatar a artéria coronária. Perfunda o coração com um reagente lançado de 1mL através do ápice cardíaco e espere de duas a três horas.
Ero o coração com hidróxido de sódio de 50% por dois a três dias. E remova o tecido muscular ou o tecido conjuntivo enxaguando com soro fisiológico normal. Após a ligadura da RCA, a elevação do segmento ST foi observada na liderança 3 do ECG.
2, 3, 5-Triphenyltetrazolium manchas de cloreto mostraram que a área de infarto representa 45% da parede livre do trailer, 24 horas após o dia. A ecocardiografia mostrou que a dimensão interna do RV no final da diastole, aumentou no RV1. E foi mais de duas vezes no grupo Sham.
Encurtamento de fração de RV, fração de ejeção de RV e excursão sistólica de plano anular tricúspido foram significativamente menores no RVI. A razão de área rv por LV aumentou em aproximadamente 50% de medição hemodinâmica de RV mostrou que no grupo RVI, a pressão arterial sistólica ventricular direita, a taxa máxima e mínima de aumento da pressão do RV, a contralução do RV, foram significativamente menores. A pressão ventricular direita e diastólica e a constante de tempo exponencial do índice de relaxamento do RV, foram consideravelmente mais significativas do que as do grupo Sham.
Um aneurisma de RV era visível na área infarta. A relação peso cardíaco/peso corporal e a relação peso cardíaco para a relação comprimento da tíbia no grupo RVI foram ligeiramente maiores. A coloração de Masson indicou fibrose significativa na parede livre do trailer.
E raramente, a fibrose ocorreu no septo do grupo RVI. Em contraste, alguns cardiomiócitos sobreviventes estavam na área de infarto. É crucial expor a área de ligadura e compreender a profundidade da agulha inserida e o alcance para aumentar o sucesso e as taxas de sobrevivência.
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Este estudo introduz um método reproduzível para gerar um modelo de infarto do ventrículo direito (IVD) em camundongos. A técnica visa esclarecer os mecanismos fisiopatológicos subjacentes ao IVD, que não têm sido bem compreendidos.
Robust preclinical models of right ventricular infarction (RVI) are essential for elucidating mechanisms of right heart failure and for identifying therapeutic targets relevant to human disease. This protocol enables reproducible generation and quantitative characterization of RVI in mice, supporting translational research and mechanistic de-risking at early discovery and preclinical stages. The model's quantitative outputs facilitate predictive confidence and portfolio triage for cardiovascular drug discovery programs.
This RVI model integrates into the discovery-to-preclinical continuum, bridging early mechanistic studies with translational validation for right heart failure programs.