Name: Estimando o rendimento de compostos na placa TLC através da técnica de iluminação Blue-LED (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-10-06T13:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 14 s
Description: Aprenda a estimar o rendimento de compostos em placas TLC usando iluminação blue-LED. Este método seguro, eficaz e econômico permite medir múltiplas amostras simultaneamente em pesquisas de bioquímica e produtos naturais.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Este estudo foi apoiado pelo Ministério da Ciência e Tecnologia, Taiwan (MOST 108-2320-B-110-007-MY3).

O presente protocolo é descrito usando lovastatina como exemplo. A lovastatina foi extraída de Aspergillus terreus de uma semana de idade.
1. Extração composta
NOTA: Para obter detalhes sobre a extração de compostos, consulte a Figura 1.
<ol><li>Cultura de Aspergillus terreus no meio de ágar batata-dextrose (PDA, ver Tabela de Materiais) a 30 °C.</li>
	<li>Secar a cultura a 40 °C durante 24 h. Transfira a cultura seca para um tubo de 50 mL usando pinças esterilizadas e adicione 15 mL de acetato de etila.</li>
	<li>Agitar vigorosamente a mistura por vórtice durante 1 min e incubar durante 1 h a 40 °C com agitação a 200 rpm.</li>
	<li>Sonicate a mistura usando um banho ultra-sônico de 40 kHz (ver Tabela de Materiais) a 40 °C por 1 h.</li>
	<li>Centrifugar a mistura a 5.000 x g durante 1 min à temperatura ambiente e filtrar através de um papel de filtro de 11 μm.</li>
	<li>Extrair o filtrado com um volume igual de água estéril numa ampola separatória.</li>
	<li>Após a separação de fases, recolha a camada orgânica e, em seguida, evapore num evaporador rotativo (ver Tabela de Materiais). Dissolver o resíduo em 2 mL de acetato de etila.</li>
</ol>2. Separação do extracto bruto por coluna de adsorção de fase normal (NP)
<ol><li>Embale a coluna com sílica gel NP como fase estacionária e use n-hexano:acetato de etila:ácido trifluoroacético (H:E:T; 80:20:0.1, v/v/v) como fase móvel.</li>
	<li>Carregar 2 ml do extracto (passo 1) na coluna e adicionar o solvente de fase móvel a um caudal de 1 ml/min para eluír o extracto. NOTA: A taxa de fluxo foi controlada manualmente usando uma torneira.</li>
	<li>Verificar o efluente por TLC para confirmar a presença de lovastatina e, em seguida, evaporar num evaporador rotativo a 45 °C até que o solvente seja removido. Este passo leva aproximadamente 20-25 min.</li>
	<li>Dissolva o resíduo em 1 mL de acetato de etila e, em seguida, misture com um volume igual de ácido trifluoroacético a 1%.</li>
	<li>Centrifugar a mistura a 5.000 x g durante 1 min à temperatura ambiente e recolher a camada orgânica num novo tubo de vidro.</li>
</ol>3. Preparação e carregamento de placas de cromatograma de camada fina (TLC)
<ol><li>Colocar 5 μL de amostras e padrões de lovastatina (ver Tabela de Materiais) na linha de base da placa TLC usando uma pipeta capilar, deixando uma borda de 1 cm nas laterais da placa TLC.</li>
	<li>Seque a placa TLC em um exaustor por 5 minutos à temperatura ambiente.</li>
	<li>Coloque a placa suavemente por pinça em uma câmara de vidro saturada contendo o solvente de fase móvel. Cubra a câmara com uma tampa de vidro e deixe a placa se desenvolver completamente.</li>
	<li>Remova a placa da câmara quando a linha de solvente atingir 1 cm do topo da placa.</li>
</ol>4. Análise pelo iluminador azul-LED
<ol><li>Marque a linha de solvente com um lápis. Seque a placa no exaustor por 10 minutos à temperatura ambiente.</li>
	<li>Após a secagem, mergulhe imediatamente a placa em 10% de solvente H2SO4 e, em seguida, seque no exaustor por 10 minutos à temperatura ambiente.</li>
	<li>Coloque a placa no painel de aquecimento até que as manchas marrons apareçam. Certifique-se de que a placa não esteja superaquecida, pois isso pode dificultar a visualização da lovastatina.</li>
	<li>Transfira a placa para o iluminador de LED azul e digitalize usando um freeware compatível (MiBio Fluo) (consulte a Tabela de Materiais).</li>
</ol>5. Estimativa de rendimento pelo modelo de regressão
<ol><li>Meça a dimensão das bandas usando o software ImageJ (consulte Tabela de materiais).</li>
	<li>Estabeleça um modelo de regressão usando software de análise de dados e gráficos (ver Tabela de Materiais) com base nas concentrações decrescentes dos padrões de lovastatina, incluindo 1 mg/mL, 0,75 mg/mL, 0,5 mg/mL e 0,25 mg/mL.</li>
	<li>Aplicar o modelo de regressão para estimar o rendimento das amostras.</li>
</ol>

<ol><li>Pyka, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+progress+of+selected+drugs+in+TLC%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Detection progress of selected drugs in TLC.</a> BioMed Research International. 2014, 732078(2014).</li>
<li>Hess, A. V. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digitally+enhanced+thin-layer+chromatography%3A+An+inexpensive%2C+new+technique+for+qualitative+and+quantitative+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Education%22%5BJournal%5D)">Digitally enhanced thin-layer chromatography: An inexpensive, new technique for qualitative and quantitative analysis.</a> Journal of Chemical Education. 84 (5), 842-847 (2007).</li>
<li>Ullah, Q., Mohammad, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitamins+determination+by+TLC%2FHPTLC-a+mini-review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Planar+Chromatography+-+Modern+TLC%22%5BJournal%5D)">Vitamins determination by TLC/HPTLC-a mini-review.</a> Journal of Planar Chromatography - Modern TLC. 33 (5), 429-437 (2020).</li>
<li>Chen, Z., Tao, H., Liao, L., Zhang, Z., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quick+identification+of+xanthine+oxidase+inhibitor+and+antioxidant+from+Erycibe+obtusifolia+by+a+drug+discovery+platform+composed+of+multiple+mass+spectrometric+platforms+and+thin-layer+chromatography+bioautography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Separation+Science%22%5BJournal%5D)">Quick identification of xanthine oxidase inhibitor and antioxidant from Erycibe obtusifolia by a drug discovery platform composed of multiple mass spectrometric platforms and thin-layer chromatography bioautography.</a> Journal of Separation Science. 37 (16), 2253-2259 (2014).</li>
<li>Duncan, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chiral+separations%3A+A+comparison+of+HPLC+and+TLC%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Liquid+Chromatography%22%5BJournal%5D)">Chiral separations: A comparison of HPLC and TLC.</a> Journal of Liquid Chromatography. 13 (14), 2737-2755 (1990).</li>
<li>Sherma, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thin-layer+chromatography+in+food+and+agricultural+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+A%22%5BJournal%5D)">Thin-layer chromatography in food and agricultural analysis.</a> Journal of Chromatography A. 880 (1-2), 129-147 (2000).</li>
<li>Bocheńska, P., Pyka, A., Bocheńska, P., Bocheńska, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+acetylsalicylic+acid+in+pharmaceutical+drugs+by+TLC+with+densitometric+detection+in+UV%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Liquid+Chromatography%22%5BJournal%5D)">Determination of acetylsalicylic acid in pharmaceutical drugs by TLC with densitometric detection in UV.</a> Journal of Liquid Chromatography. 35 (10), 1346-1363 (2012).</li>
<li>Poole, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Planar+chromatography+at+the+turn+of+the+century%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+A%22%5BJournal%5D)">Planar chromatography at the turn of the century.</a> Journal of Chromatography A. 856 (1-2), 399-427 (1999).</li>
<li>Rapid Johnson, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((simple+quantitation+in+thin-layer+chromatography+using+a+flatbed+scanner%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Education%22%5BJournal%5D)">simple quantitation in thin-layer chromatography using a flatbed scanner.</a> Journal of Chemical Education. 77 (3), 368-372 (2000).</li>
<li>El-Gindy, A., Ashour, A., Abdel-Fattah, L., Shabana, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+derivative+spectrophotometric%2C+TLC-densitometric%2C+and+HPLC+determination+of+acebutolol+HCL+in+presence+of+its+acid-induced+degradation+product%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+and+Biomedical+Analysis%22%5BJournal%5D)">First derivative spectrophotometric, TLC-densitometric, and HPLC determination of acebutolol HCL in presence of its acid-induced degradation product.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 24 (4), 527-534 (2001).</li>
<li>Elkady, E. F., Mahrouse, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversed-phase+ion-pair+HPLC+and+TLC-densitometric+methods+for+the+simultaneous+determination+of+ciprofloxacin+hydrochloride+and+metronidazole+in+tablets%5BTitle%5D)+AND+%22Chromatographia%22%5BJournal%5D)">Reversed-phase ion-pair HPLC and TLC-densitometric methods for the simultaneous determination of ciprofloxacin hydrochloride and metronidazole in tablets.</a> Chromatographia. 73 (3-4), 297-305 (2011).</li>
<li>Musharraf, S. G., Ul Arfeen,, Shoaib, Q., M, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+validation+of+TLC-densitometric+method+for+the+quantification+of+a+steroidal+drug%2C+danazol+in+its+pharmaceutical+formulations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Planar+Chromatography+-+Modern+TLC%22%5BJournal%5D)">Development and validation of TLC-densitometric method for the quantification of a steroidal drug, danazol in its pharmaceutical formulations.</a> Journal of Planar Chromatography - Modern TLC. 25 (4), 331-337 (2012).</li>
</ol>

Todos os autores declaram que não têm conflitos de interesse.

O presente estudo descreveu uma nova abordagem, o iluminador azul-LED, para quantificar compostos sem o uso de equipamentos caros e especializados, como HPTLC, HPLC e GC, e o método foi comparado com os métodos de bioensaio e UV detectados para avaliar o desempenho de quantificação. Como resultado, concluiu-se que o método de iluminação azul-LED é um protocolo relativamente seguro e eficaz usado para quantificar o rendimento de compostos alvo na placa TLC.
Estudos prévios relataram vários méto...

A cromatografia em camada fina (TLC) é amplamente utilizada como técnica qualitativa e quantitativa no campo da química orgânica 1,2,3. As principais vantagens do TLC são que ele fornece detecção rápida, requisitos de amostra flexíveis e não requer equipamentos especializados4. Até o momento, embora muitas abordagens avançadas tenham sido estabelecidas, o TLC ainda é o principal método para identificar amostras desconhecidas em uma mistura. No entanto, o desafio dessa abordagem é a falta de equipamentos seguros e baratos para quantificar o rendimento da amostra, especialmente para o desenvolvimento de laboratórios com orçamentos limitados. O presente estudo, portanto, teve como objetivo desenvolver um método eficiente, seguro e barato de combinação com CPT para estimar o rendimento das amostras.
Ao contrário do TLC de alta eficiência (HPTLC), da cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e da cromatografia gasosa (GC) com requisitos rigorosos de amostra, demorado e envolvimento de várias etapas para o preparo da amostra1,5, o TLC mostrou várias vantagens. Em primeiro lugar, para a preparação da amostra, a HPLC e a CG não podem detectar o extracto bruto porque o extracto bruto pode ligar a coluna de HPLC e GC. Em segundo lugar, quando as amostras não são adequadas aos raios UV (importante para a análise por HPLC) ou com baixa volatilidade (importante para a análise de CG), o TLC pode ser aplicado a essas amostras, e o uso de reagente de visualização torna as amostras isoladas visíveis em camadas finas 6,7,8. Em terceiro lugar, para usuários em geral, HPLC e GC geralmente exigem um pré-treinamento de tempo relativamente longo antes de trabalhar de forma independente, em comparação com o TLC. Além disso, a análise quantitativa de TLC, conhecida como TLC de alto desempenho (HPTLC), pode digitalizar as informações em uma placa TLC com um scanner altamente sensível. No entanto, o custo do sistema HPTLC é relativamente caro. Como tal, o desenvolvimento de uma abordagem econômica e rápida para quantificar amostras na placa TLC é um tópico importante.
Métodos semelhantes foram desenvolvidos para quantificação do rendimento de TLC; por exemplo, Johnson9 relatou uma técnica que permite a quantificação das amostras em uma placa TLC usando um scanner de mesa conectado a um computador. Em 2001, El-Gindy et al.10 desenvolveram o método densitométrico TLC-, que foi utilizado para detectar o composto com densidade óptica, e a técnica também foi aplicada por Elkady et al.11. Em 2007, Hess2 apresentou o método digitalmente aprimorado-TLC (DE-TLC) aplicado para detectar o rendimento de um composto em uma placa TLC usando uma câmera digital combinada com luz UV. Hess também comparou as diferenças de custo entre o método HPTLC e DE-TLC e concluiu que o método DE-TLC poderia ser usado em laboratórios de ensino médio e universitário devido ao seu custo acessível2. No entanto, o custo do método densitométrico TLC ainda era caro, e a operação da luz ultravioleta requer pré-treinamento adequado no caso de os usuários ficarem expostos à radiação ultravioleta. Portanto, compatível com TLC, é desejável o desenvolvimento de um método eficiente, seguro e barato para quantificar o rendimento da amostra.
O presente estudo descreveu um protocolo para detecção da amostra em uma placa TLC utilizando o iluminador azul-LED, e desenvolveu um modelo de regressão com alta confiabilidade (alto valor R-quadrado) para medir as dimensões das bandas e, em seguida, determinar o rendimento do composto. Finalmente, verificou-se que o método de iluminação azul-LED é relativamente seguro (vs. Método de detecção UV), barato (vs. GC, HPLC e HPTLC) e abordagem eficaz (vs. método de bioensaio) para quantificação do rendimento.

<table><tbody><tr><td>Ágar bacteriológico americano</td><td>Condalab</td><td>1802.00</td><td></td></tr><tr><td>Aspergillus terreus&nbsp; </td><td></td><td>ATCC 20542</td><td></td></tr><tr><td>Iluminador Blue-LED</td><td>Centrífuga MICROTEK</td><td>Bio-1000F</td><td></td></tr><tr><td>Thermo</td><td>Scientific&nbsp;</td><td>HERAEUS Megafuge 8</td><td></td></tr><tr><td>Lâmpada UV compacta</td><td>UVP</td><td>UVGL-25</td><td></td></tr><tr><td>Acetato de etila</td><td>MACRON</td><td>MA-H078-10</td><td></td></tr><tr><td>Papel de filtro 125mm</td><td>ADVANTEC</td><td>60311102</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>Freeware</td><td>https://imagej.nih.gov/ij/download.html</td></tr><tr><td>Lovastatina padrão</td><td>ACROS</td><td>A0404262</td><td></td></tr><tr><td>MiBio Fluo&nbsp;</td><td>MICROTEK</td><td>V1.04</td><td></td></tr><tr><td>n-Hexano</td><td>C-ECHO</td><td>HH3102-000000-72EC</td><td></td></tr><tr><td>OriginPro</td><td>OriginLab</td><td>9.1</td><td>https://www.originlab.com/origin</td></tr><tr><td>Caldo de dextrose de batata H</td><td>STBIO MEDIA</td><td></td><td></td></tr> 110533 <tr><td>Evaporador rotativo</td><td>EYELA</td><td>SB-1000</td><td></td></tr><tr><td>Ácido sulfúrico</td><td>Fluka</td><td>30743-2.5L-GL</td><td></td></tr><tr><td>TLC gel de sílica 60 F254</td><td>MERCK</td><td>1.05554.0001</td><td></td></tr><tr><td>Ácido trifluoroacético</td><td>Alfa Aesar</td><td>10229873</td><td></td></tr><tr><td>máquina de vibração ultrassônica</td><td>DELTA</td><td>DC600</td><td></td></tr></tbody></table>

estimando o rendimento de compostos na placa tlc através da técnica de iluminação blue-led

Estimating the Yield of Compounds on the TLC Plate via the Blue-LED Illumination Technique

A cromatografia em camada fina (TLC) é uma técnica analítica acessível que tem sido amplamente utilizada em pesquisas em química orgânica para quantificar o rendimento de amostras desconhecidas. O presente estudo desenvolveu um método eficaz, barato e seguro para estimar o rendimento de amostras em uma placa TLC utilizando o iluminador azul-LED. A lovastatina extraída de Aspergillus terreus foi o composto de exemplo utilizado no presente estudo. Modelos de regressão baseados no padrão de lovastatina foram utilizados para avaliar o rendimento de lovastatina. Três métodos foram comparados: bioensaio, detecção de UV e iluminação azul-LED. O resultado mostrou que o método de iluminação azul-LED é significativamente mais eficaz no tempo do que os métodos de detecção UV e bioensaio. Além disso, a iluminação LED-azul foi uma opção relativamente segura devido à preocupação com os riscos biológicos no método de bioensaio (por exemplo, infecção microbiana) e a exposição ultravioleta no método de detecção UV. Em comparação com os métodos caros que exigem instrumentos especializados e treinamento de longo prazo antes de trabalhar de forma independente, como GC, HPLC e HPTLC, o uso do iluminador blue-LED foi uma opção econômica para estimar o rendimento de amostras de uma placa TLC.

Este estudo apresentou o método de iluminação azul-LED para estimar o rendimento de compostos, e este método foi validado e comparado com os métodos de bioensaio e UV-detectados (Tabela 1). Os modelos de regressão foram desenvolvidos com base nas dimensões das bandas e concentração dos padrões para três métodos, respectivamente, para predizer o rendimento das amostras. Primeiramente, nos resultados do método de bioensaio, o R-quadrado entre as dimensões da zona de inibição e os padrões de lovastatina foi...

O presente protocolo desenvolveu um método para estimar o rendimento de compostos na placa TLC utilizando a técnica de iluminação azul-LED. As vantagens dessa abordagem são que ela é segura, eficaz, barata e permite que o pesquisador meça várias amostras simultaneamente.

Estimando o rendimento de compostos na placa TLC através da técnica de iluminação Blue-LED

Thin-layer chromatography (TLC) is an accessible analytical technique that has been extensively used in organic chemistry research to quantify the yield ...

Este protocolo desenvolveu um método para estimar o rendimento de compostos na placa TLC usando a técnica de iluminação azul-LED. As vantagens deste método são que a técnica de iluminação azul-LED é um método seguro, eficaz e barato, e permite ao pesquisador medir várias amostras ao mesmo tempo. Este método também pode ser aplicado à bioquímica e química de produtos naturais.Para começar, seque a cultura a 40 graus Celsius por 24 horas. Transfira a cultura seca para um tubo de 50 mililitros usando pinças esterilizadas e adicione 15 mililitros de acetato de etila. Agitar a mistura vigorosamente por vórtice durante um minuto e incubar o tubo durante uma hora a 40 graus Celsius com agitação a 200 RPM.Em seguida, sonicate a mistura usando um banho ultra-sônico de 40 kilohertz a 40 graus Celsius por uma hora. Em seguida, centrifugar a mistura a 5.000 G por um minuto à temperatura ambiente e filtrar através de um papel de filtro de 11 micrômetros. Extrair o filtrado com um volume igual de água estéril numa ampola separatória.Após a separação de fases, colete a camada orgânica, evapore-a em um evaporador rotativo e dissolva o resíduo em dois mililitros de acetato de etila. Embale a coluna com sílica gel de fase normal como fase estacionária e use acetato de etila n-hexano e ácido trifluoroacético como fase móvel. Carregue dois mililitros do extracto na coluna e adicione o solvente de fase móvel a um caudal de um mililitro por minuto para eluír o extracto.Depois de verificar o efluente por TLC para confirmar a presença de lovastatina, evaporar em um evaporador rotativo a 45 graus Celsius até que o solvente seja removido. Dissolva o resíduo em um mililitro de acetato de etila e, em seguida, misture com um volume igual de 1% de ácido trifluoroacético. Centrifugar a mistura a 5.000 G por um minuto à temperatura ambiente e coletar a camada orgânica em um novo tubo de vidro.Usando uma pipeta capilar spot cinco microlitros de amostras e padrões de lovastatina na linha de base da placa TLC, deixando uma borda de um centímetro nas laterais da placa TLC. Em seguida, seque a placa TLC em um exaustor por cinco minutos à temperatura ambiente. Coloque a placa suavemente por pinça em uma câmara de vidro saturada contendo o solvente de fase móvel.Cubra a câmara com uma tampa de vidro e deixe a placa se desenvolver completamente. Remova a placa da câmara quando a linha de solventes atingir um centímetro do topo da placa. Marque a linha de solvente com um lápis e seque a placa no exaustor por 10 minutos à temperatura ambiente.Após a secagem, mergulhe imediatamente a placa em solvente de ácido sulfúrico a 10% e, em seguida, seque no exaustor por 10 minutos à temperatura ambiente. Em seguida, coloque a placa no painel de aquecimento até que as manchas marrons apareçam. Transfira a placa para o iluminador LED azul e digitalize usando freeware compatível.Os resultados obtidos a partir do método de bioensaio demonstraram que o quadrado R entre as dimensões da zona de inibição e os padrões de lovastatina foi de 0,99, e o rendimento da amostra foi de 0,56 miligramas, conforme previsto pelo modelo de regressão. O método de detecção de UV mostra que o quadrado R entre os padrões de lovastatina e a dimensão das bandas na placa TLC foi de 0,97, e o rendimento amostral previsto pelo modelo de regressão foi de 0,53 miligramas. No entanto, as bordas da banda estavam borradas e bandas de intensidade de sinal relativamente baixas foram observadas.Para o método de iluminação azul-LED, o quadrado R entre os padrões de lovastatina e a dimensão da banda na placa TLC foi de 0,98, e o rendimento da amostra foi de 0,54 miligramas, conforme previsto pelo modelo de regressão. O rendimento previsto utilizando o iluminador LED-azul foi mais próximo do método de bioensaio e bandas claras foram obtidas. Se a placa estiver superaquecida, a visualização da lovastatina pode ser difícil de observar.

estimating-yield-compounds-on-tlc-plate-via-blue-led-illumination

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Composição de extratos de lipídios polares e da composição de ácidos graxos de glycerolipids individuais são determinados em um experimento simples e robusto perfil lipídico. Para este fim, glycerolipids são isolados por cromatografia em camada delgada e submetido a transmetilação de seus grupos acil. Graxos methylesters acila são quantificados por cromatografia gás-líquido.

Arabidopsis thaliana Profiling Glycerolipid Polar por cromatografia em camada delgada (TLC) Juntamente com Cromatografia gás-líquido (GLC)

Este vídeo demonstra um ensaio enzimático baseado em cromatografia em camada fina para determinar a atividade da pirofosfoquinase usando nucleotídeos radiomarcados. O método fornece informações sobre a síntese de nucleotídeos e reações de fosfotransferência.

Ensaio de atividade enzimática baseado em cromatografia em camada fina: uma técnica para determinar a atividade da pirofosfoquinase in vitro usando cromatografia em camada fina

Métodos são descritos para-cromatografia em camada delgada (TLC) separação de extratos de plantas e contatar bioautografia para identificar metabólitos antibacterianos. Os métodos são aplicados para o rastreio de compostos fenólicos de trevo vermelho que inibem bactérias produtoras de amoníaco hiper (HAB) nativas para o rúmen de bovinos.

Cromatográfica em camada delgada (TLC) Separações e Bioensaios de extratos de plantas para identificar compostos antimicrobianos

A derivação de um flavonol é crucial para sua aplicação na saúde e na indústria alimentícia. Aqui, nós fornecemos um protocolo detalhado para a biossíntese de um flavonol de um flavanone e discutimos as etapas cruciais e suas vantagens sobre outras aproximações.

Biossíntese de um flavonol de um Flavanone estabelecendo uma cascata Bienzimática de um pote

Este método descreve o uso de uma nova metodologia de alta produtividade, baseada em reações químicas de gotículas, para a rápida e econômica otimização dos radiofarmacêuticos usando quantidades de nanomole de reagentes.

Otimização de reações radioquímicas usando Arrays droplet

Aqui, é apresentado um protocolo para a rotulagem metabólica da levedura com ácido acético de 14C, que é acoplado à cromatografia de camada fina para a separação de lipídios neutros.

Análise da Síntese Lipídica Neutra em Saccharomyces cerevisiae por Rotulagem Metabólica e Cromatografia de Camada Fina

Demonstramos injeção intraperitoneal em peixe-zebra adulto. Usamos a 10 mL NanoFil micro controlado por um controlador MICRO4 e III UltraMicroPump. Esta demonstração inclui o uso de água fria como um anestésico.

Injeção intraperitoneal em Zebrafish Adulto

Produção de C. elegans Transgenes via Recombineering com o GalK Marcador selecionável

Este artigo detalha os procedimentos envolvidos na análise da superexpressão e GTPases pequenas células epiteliais polarizadas utilizando a técnica de microinjeção.

Analisando a função de GTPases Pequenas pela microinjeção de Plasmids em Polarized Células Epiteliais

Informações espaço-temporais sobre proteínas dinâmicas dentro de células vivas são cruciais para a compreensão da biologia. Um tipo de microscopia de super-resolução chamada microscopia de iluminação rápida estruturada em 3D (f3D-SIM) revela informações únicas sobre o anel Z citocinético em bactérias: tanto sua aparência semelhante a um grânulo quanto a dinâmica rápida do FtsZ dentro do anel.

Super-resolution Imaging do Z Anel Cytokinetic em bactérias vivas Usando o Fast-estruturados 3D Iluminação Microscopy (F3D-SIM)

Aprenda a estimar o rendimento de compostos em placas TLC usando iluminação blue-LED. Este método seguro, eficaz e econômico permite medir múltiplas amostras simultaneamente em pesquisas de bioquímica e produtos naturais.

Estimando o rendimento de compostos na placa TLC através da técnica de iluminação Blue-LED

Explorar mais vídeos