Name: Tomografia por Emissão de Pósitrons Usando 64-Cobre como Traçador para o Estudo de Doenças Relacionadas ao Cobre (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-04-28T12:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 52 s
Description: Aprenda a realizar imagem por PET com cobre-64 para visualizar a distribuição de cobre em pacientes com doença de Wilson. Esta técnica não invasiva permite quantificar a concentração de cobre em diferentes órgãos e monitorar os efeitos do tratamento.

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Apoiado por uma bolsa da The Memorial Foundation of Manufacturer Vilhelm Pedersen & Wife. A fundação não teve nenhum papel no planejamento ou em qualquer outra fase do estudo.

Alguns ensaios clínicos usando este protocolo PET/CT ou PET/MRI de 64foram aprovados pelo Comitê de Ética Regional da Região Midt, Dinamarca [1-10-72-196-16 (EudraCT 2016-001975-59), 1-10-72-41-19 (EudraCT 2019-000905-57), 1-10-72-343-20 (EudraCT 2020-005832-31), 1-10-72-25-21 (EudraCT 2021-000102-25) e 1-10-72-15-22 (EudraCT 2021-005464-21)]. Consentimento informado por escrito foi obtido dos participantes no momento da inscrição. Os critérios de inclusão para todas as participantes foram idade >18 anos e para o sexo feminino o uso de contracepção segura. Os critérios de exclusão para pacientes com doença de Wilson foram cirrose descompensada, escore Model for End-stage Liver Disease (MELD) >11 ou escore de Nazer modificado >6. Os critérios de exclusão para todas as participantes foram hipersensibilidade conhecida a 64ou outros ingredientes na fórmula traçadora, gravidez, amamentação ou desejo de engravidar antes do final do estudo.
1. Preparação de 64CuCl2
<ol><li>Dissolver o sólido 64CuCl2 em ácido clorídrico (0,1 M) e adicionar tampão acetato de sódio (0,5 M) para aumentar o pH para ~5. Formular com soro fisiológico e filtrar esterilizar a solução, passando-a através de um filtro de 0,22 μm (ver Tabela de Materiais). NOTA: O tampão acetato de sódio (0,5 M) é produzido a partir de acetato de sódio trihidratado e água estéril que é passada através de um filtro esterilizante de 0,22 μm.</li>
	<li>Para o controle de qualidade da solução de 64CuCl2 produzida, realizar medição de pH, teste de endotoxina bacteriana, determinação da pureza radioquímica e identificação radionuclídica 7,8.</li>
	<li>Armazene o produto em um recipiente de chumbo à temperatura ambiente e mantenha-o em quarentena até que todas as especificações de controle de qualidade tenham sido satisfatoriamente atendidas. NOTA: Para o presente estudo, 64CuCl2 foram produzidos com uma pureza radionuclídica ≥99% e uma pureza radioquímica ≥95%. O sólido 64CuCl2, utilizado como matéria-prima, foi obtido de uma fonte comercial (ver Tabela de Materiais).</li>
</ol>2. Preparação do scanner PET
<ol><li>Execute uma verificação de qualidade (QC)9 no scanner, seguindo o protocolo do fabricante (consulte a Tabela de Materiais). NOTA: Os CQ devem ser realizados diariamente pela manhã antes dos exames do paciente.</li>
</ol>3. Desenho do traçador para injeção intravenosa (IV) e por administração oral (PO)
<ol><li>Use luvas de plástico e retire a tampa do recipiente de chumbo.</li>
	<li>Use pinças longas para desinfetar a membrana de borracha do frasco de vidro contendo traçador dentro do recipiente de chumbo com um cotonete de desinfecção.</li>
	<li>Use uma pinça para inserir uma cânula curta (~0,5 mm x 16 mm) na membrana para evitar o transbordamento do vácuo dentro do frasco.</li>
	<li>Use uma pinça para inserir uma cânula mais longa para desenhar. Esta cânula deve ser longa o suficiente para alcançar o fundo do frasco (geralmente 50 mm).</li>
	<li>Certifique-se de que o calibrador de dose (ver Tabela de Materiais) está calibrado para 64. Calcule um volume aproximado para desenhar para o primeiro sorteio. OBS: A partir dos relatórios de controle de qualidade química, a quantidade de atividade e o volume do líquido estarão disponíveis, permitindo o cálculo de um volume aproximado a ser sacado.</li>
	<li>Use luvas de plástico, insira uma seringa de plástico de tamanho adequado na cânula longa e desenhe o volume calculado. Este volume dependerá da concentração de 64 no produto e de quanto 64é decidido para o protocolo (ver Cálculos de dose nos resultados representativos).</li>
	<li>Use uma pinça para segurar a cânula enquanto move a seringa para o calibrador de dose para medir a radioatividade.</li>
	<li>Continue desenhando até que a quantidade de radioatividade apropriada seja atingida. Aproximadamente 5% do traçador permanecerá na seringa e cânula após a injeção. NOTA: O 64não deve ser diluído em água salgada, pois o traçador pode precipitar. Assim, a seringa não pode ser enxaguada com água salina após a injeção (isto não é relevante para a administração PO).</li>
	<li>Com a pinça, aplique uma cânula com tampa (cânula de ~16 mm) para fechar a seringa e guarde-a em um recipiente de chumbo até a aplicação.</li>
</ol>4. Aplicação do marcador
<ol><li>Injeção intravenosa<ol><li>Insira uma cânula intravenosa (~22 G, 25 mm), de preferência em uma veia cubital, e enxágue com água salina para garantir a colocação correta. NOTA: Uma planilha com o nome do participante, um carimbo ou assinatura para liberação do controle de qualidade do traçador e pontos de tempo e radioatividade para desenho, injeção e sobras do traçador devem estar disponíveis.</li>
		<li>Meça a radioatividade na seringa usando o calibrador de dose disponível e anote o tempo e a atividade na planilha.</li>
		<li>Transporte a seringa em um recipiente de chumbo até a cabeceira do leito do participante.</li>
		<li>Se ocorrer algum transbordamento da injeção, coloque um guardanapo sob o cotovelo do participante para que a radioatividade derramada possa ser medida.</li>
		<li>Com uma pinça, retire a tampa/cânula da seringa e, com luvas plásticas, conecte a seringa ao acesso IV. Observe o tempo na planilha e injete em um movimento constante. NOTA: Como mencionado anteriormente, a seringa não deve ser enxaguada com soro fisiológico, pois o traçador pode precipitar.</li>
		<li>Retire a seringa do acesso IV, coloque a tampa/cânula e coloque-a no recipiente de chumbo com o guardanapo, se necessário.</li>
		<li>Enxaguar o acesso IV com água salina.</li>
		<li>Observe o tempo e a radioatividade restante na seringa na planilha. NOTA: A atividade injetada é calculada como a diferença entre a atividade da seringa antes e depois da injeção, mas usando o protocolo PET scan para corrigir a deterioração. Assim, todos os três momentos (medidas de sorteio, injeção e sobras) e a radioatividade medida no sorteio e as medidas de sobras são inseridos no protocolo PET scan quando o participante é escaneado (ver passo 5).</li>
		<li>Destinar as sobras de material de forma adequada, de acordo com as normas de segurança institucional.</li>
		<li>Remova o acesso IV. Caso surjam reações alérgicas, deixe o acesso IV por 30 min.</li>
	</ol></li>
	<li>Administração oral NOTA: Uma planilha com o nome do participante, um carimbo ou assinatura para liberação do controle de qualidade do traçador e pontos de tempo e radioatividade para desenho, administração e sobras do traçador devem estar disponíveis.<ol><li>Em um copo plástico descartável e macio, despeje cerca de 100 mL de água ou cordial; o 64é insípido. Um canudo plástico descartável e um pequeno saco plástico descartável devem estar disponíveis.</li>
		<li>Meça a radioatividade na seringa usando o calibrador de dose disponível e anote o tempo e a atividade na planilha.</li>
		<li>Transporte a seringa em um recipiente de chumbo até a cabeceira do leito do participante. O participante deve estar sentado em uma cama ou cadeira.</li>
		<li>Retire a tampa/cânula da seringa com uma pinça e, usando luvas plásticas, injete o traçador no copo, tomando cuidado para não derramar nenhum. Retire um pouco da água/cordial e injete-a no copo novamente.</li>
		<li>Coloque um canudo plástico no copo (isso é para minimizar o risco de transbordamento quando o participante bebe).</li>
		<li>Anote o tempo na planilha e deixe o participante beber. O copo deve estar o mais vazio possível.</li>
		<li>Coloque o copo e o canudo vazios no saco plástico descartável com a seringa vazia e coloque-os no recipiente de chumbo.</li>
		<li>Observe o tempo e meça a radioatividade restante na seringa. Observação na planilha. NOTA: A atividade injetada é calculada como a diferença entre a atividade da seringa antes e depois da injeção, mas usando o protocolo PET scan para corrigir a deterioração. </li></ol></li>Assim, todos os três momentos (sorteio, injeção e sobras) e a radioatividade medida no sorteio e na medição de sobras são inseridos no protocolo PET scan quando o participante é escaneado (ver Scan).
		<li>Destinar as sobras de material de forma adequada, de acordo com as normas de segurança institucional. NOTA: Observar o participante para reações alérgicas agudas por 30 minutos após a ingestão pode ser apropriado.</li>
	
</ol>5. Varreduras PET
<ol><li>Coloque o participante em decúbito dorsal no scanner.</li>
	<li>Execute uma tomografia computadorizada ou ressonância magnética de visão geral para planejar a região específica a ser examinada durante o PET scan.</li>
	<li>Observe o tempo de sorteio, injeção e medida de sobras, e a radioatividade no sorteio e na medida de sobras no protocolo PET.</li>
	<li>Execute a varredura PET seguindo as etapas abaixo. OBS: O protocolo PET scan deve ser padronizado em relação à duração do exame e aos parâmetros de reconstrução da imagem para todos os participantes de um mesmo estudo; relatos publicados devem ser seguidos10,11,12.<ol><li>Realizar varreduras PET estáticas com um tempo de varredura de 4,5 min/posição de leito por até 24 h após a administração do traçador e 10 min/leito por até 68 h após a administração do traçador (para maiores detalhes, consulte Exame sob os resultados representativos). NOTA: Durante a varredura PET dinâmica, o decaimento é continuamente registrado e, posteriormente, segmentado em uma estrutura de quadro. Isso permite a seleção de quadros de intervalos de tempo curtos para enfatizar a dinâmica da distribuição de 64e quadros de intervalos de tempo mais longos para priorizar a sensibilidade. Tipicamente, intervalos mais curtos são selecionados logo após a injeção e aumentados gradualmente a partir de10.</li>
	</ol></li>
</ol>6. Reconstrução de imagens
<ol><li>Reconstrua as imagens usando as melhores correções disponíveis para atenuação, dispersão, tempo de voo e função de dispersão de pontos. NOTA: Os parâmetros de reconstrução da imagem devem ser cuidadosamente selecionados para otimizar as propriedades da imagem, como recuperação de sinal e sinal-ruído. Para estudos multicêntricos, é fundamental padronizar a qualidade da imagem entre os centros.</li>
</ol>7. Análise dos dados
NOTA: O presente estudo descreve um método simples para quantificar o conteúdo de 64no fígado. O sinal PET é medido como valor padrão de captação (SUV), a concentração de radioatividade tecidual ajustada para o peso do participante da atividade injetada e/ou quilobecquerel (kBq) por mL de tecido.
<ol><li>Baixe dados para um programa adequado, por exemplo, arquivos Dicom, para PMOD. NOTA: Existem provavelmente muitos programas diferentes para analisar imagens PET, como Hermes ou PMOD (consulte Tabela de Materiais).</li>
	<li>Ajustar os tons da TC/RM para diferenciar as estruturas anatômicas.</li>
	<li>Certifique-se de que o exame anatômico e o PET scan estejam sobrepostos.</li>
	<li>Trabalhando no plano horizontal com a melhor ressonância magnética ou tomografia computadorizada, localize o fígado e as grandes estruturas.</li>
	<li>Coloque um volume apropriado de interesse (VOI) ou múltiplas VOIs no fígado. NOTA: UM VOI é uma área definida de tecido onde o SUV é medido. Um VOI consiste em múltiplas regiões de interesse (ROIs), que são áreas de tecido em um plano. Muitos programas têm VOIs esféricas como uma pré-configuração, o que significa que múltiplas ROIs (uma em cada plano) não precisam ser desenhadas para constituir uma VOI. O lobo direito do fígado tende a ser mais homogêneo e, portanto, uma boa posição para colocar VOIs.</li>
	<li>Coloque várias VOIs no lobo direito do fígado em diferentes planos horizontais para obter a medida mais precisa da atividade, pois o SUV pode variar um pouco (~5%) no lobo hepático direito. Calcule o SUV médio desses VOIs.</li>
	<li>Para quantificar o SUV, por exemplo, em todo o fígado, desenhe ROIs cobrindo todo o volume hepático em cada plano para estudos dosimétricos. NOTA: Evite grandes estruturas como artérias e veias ao usar este método.</li>
</ol>

<ol><li>Tümer, Z., Møller, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Menkes+disease%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Human+Genetics%22%5BJournal%5D)">Menkes disease.</a> European Journal of Human Genetics. 18 (5), 511-518 (2010).</li>
<li>Ala, A., Walker, A. P., Ashkan, K., Dooley, J. S., Schilsky, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wilson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Wilson's disease.</a> The Lancet. 369 (9559), 397-408 (2007).</li>
<li>Owen, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absorption+and+excretion+of+Cu64-labeled+copper+by+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology-Legacy+Content%22%5BJournal%5D)">Absorption and excretion of Cu64-labeled copper by the rat.</a> The American Journal of Physiology-Legacy Content. 207 (6), 1203-1206 (1964).</li>
<li>Osborn, S. B., Roberts, C. N., Walshe, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+of+radiocopper+by+the+liver.+A+study+of+patients+with+Wilson%27s+disease+and+various+control+groups%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Science%22%5BJournal%5D)">Uptake of radiocopper by the liver. A study of patients with Wilson's disease and various control groups.</a> Clinical Science. 24, 13-22 (1963).</li>
<li>Vierling, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incorporation+of+radiocopper+into+ceruloplasmin+in+normal+subjects+and+in+patients+with+primary+biliary+cirrhosis+and+Wilson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Incorporation of radiocopper into ceruloplasmin in normal subjects and in patients with primary biliary cirrhosis and Wilson's disease.</a> Gastroenterology. 74 (4), 652-660 (1978).</li>
<li>Gibbs, K., Walshe, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+with+radioactive+copper+%2864Cu+and+67Cu%29%3B+the+incorporation+of+radioactive+copper+into+caeruloplasmin+in+Wilson%27s+disease+and+in+primary+biliary+cirrhosis%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Science%22%5BJournal%5D)">Studies with radioactive copper (64Cu and 67Cu); the incorporation of radioactive copper into caeruloplasmin in Wilson's disease and in primary biliary cirrhosis.</a> Clinical Science. 41 (3), 189-202 (1971).</li>
<li>Kume, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+semi-automated+system+for+the+routine+production+of+copper-64%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Radiation+and+Isotopes%3A+Including+Data%2C+Instrumentation+and+Methods+for+Use+in+Agriculture%2C+Industry+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">A semi-automated system for the routine production of copper-64.</a> Applied Radiation and Isotopes: Including Data, Instrumentation and Methods for Use in Agriculture, Industry and Medicine. 70 (8), 1803-1806 (2012).</li>
<li>Ohya, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+preparation+of+high-quality+64Cu+for+routine+use%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Efficient preparation of high-quality 64Cu for routine use.</a> Nuclear Medicine and Biology. 43 (11), 685-691 (2016).</li>
<li>Koole, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EANM+guidelines+for+PET-CT+and+PET-MR+routine+quality+control%5BTitle%5D)+AND+%22Zeitschrift+f%C3%BCr+Medizinische+Physik%22%5BJournal%5D)">EANM guidelines for PET-CT and PET-MR routine quality control.</a> Zeitschrift für Medizinische Physik. , (2022).</li>
<li>Sandahl, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+Wilson%27s+disease+visualized%3A+A+human+64Cu+PET+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of Wilson's disease visualized: A human 64Cu PET study.</a> Hepatology. 76 (6), 1461-1470 (2022).</li>
<li>Munk, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+oral+zinc+regimens+on+human+hepatic+copper+content%3A+a+randomized+intervention+study%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Effect of oral zinc regimens on human hepatic copper content: a randomized intervention study.</a> Scientific Reports. 12 (1), 14714(2022).</li>
<li>Kjærgaard, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+and+oral+copper+kinetics%2C+biodistribution+and+dosimetry+in+healthy+humans+studied+by+64Cu%5Dcopper+PET%2FCT%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharmacy+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Intravenous and oral copper kinetics, biodistribution and dosimetry in healthy humans studied by 64Cu]copper PET/CT.</a> EJNMMI Radiopharmacy and Chemistry. 5 (1), 15(2020).</li>
<li>Brewer, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zinc+acetate+for+the+treatment+of+Wilson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Zinc acetate for the treatment of Wilson's disease.</a> Expert Opinion on Pharmacotherapy. 2 (9), 1473-1477 (2001).</li>
<li>Bush, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+copper+metabolism.+XVI.+Radioactive+copper+studies+in+normal+subjects+and+in+patients+with+hepatolenticular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Studies on copper metabolism. XVI. Radioactive copper studies in normal subjects and in patients with hepatolenticular degeneration.</a> Journal of Clinical Investigation. 34 (12), 1766-1778 (1955).</li>
<li>Murillo, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+value+of+64Cu+as+a+tool+to+evaluate+the+restoration+of+physiological+copper+excretion+after+gene+therapy+in+Wilson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy+-+Methods+%26+Clinical+Development%22%5BJournal%5D)">High value of 64Cu as a tool to evaluate the restoration of physiological copper excretion after gene therapy in Wilson's disease.</a> Molecular Therapy - Methods & Clinical Development. 26, 98-106 (2022).</li>
<li>Squitti, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Copper+dyshomeostasis+in+Wilson+disease+and+Alzheimer%27s+disease+as+shown+by+serum+and+urine+copper+indicators%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Trace+Elements+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Copper dyshomeostasis in Wilson disease and Alzheimer's disease as shown by serum and urine copper indicators.</a> Journal of Trace Elements in Medicine and Biology. 45, 181-188 (2018).</li>
</ol>

Os autores não têm conflitos de interesse.

O método é como qualquer outro método PET, mas a longa meia-vida de 12,7 h oferece a oportunidade de investigar fluxos de cobre a longo prazo (temos bons resultados de até 68 h após a injeção IV do traçador). Todas as etapas do protocolo devem ser manuseadas por pessoal familiarizado com PET, embora não sejam mais críticas do que qualquer outro exame PET.
Solucionando problemas Como muitas vezes usamos 64para investigações de longo prazo, o sinal PET será mais ru...

O cobre é um cofator catalítico vital que conduz múltiplos processos bioquímicos importantes essenciais para a vida, e defeitos na homeostase do cobre são diretamente responsáveis por doenças humanas. Mutações nos genes ATP7A ou ATP7B , que codificam as ATPases transportadoras de cobre, causam as doenças de Menke e Wilson, respectivamente. A doença de Menke (ATP7A) é uma rara desordem letal de hiperacúmulo intestinal de cobre com grave deficiência de cobre nos tecidos periféricos e déficits de enzimas dependentes de cobre1. A doença de Wilson (DM) (ATP7B) é uma doença rara caracterizada pela incapacidade de excretar cobre em excesso para a bile, resultando em sobrecarga de cobre e subsequente lesão de órgãos, afetando mais gravemente o fígado eo cérebro2.
Estudos sobre o metabolismo do cobre têm utilizado cobre radiomarcado (geralmente 64-cobre [64] ou 67-cobre) há décadas, e esses estudos têm se mostrado inestimáveis para nossa compreensão do metabolismo do cobre em mamíferos, incluindo o local de absorção e as vias de excreção 3,4,5,6. Anteriormente, contadores gama eram usados para detectar o sinal radioativo com uma resolução anatômica limitada, mas recentemente, a tomografia por emissão de pósitrons (PET) de 64combinada com tomografia computadorizada (TC) ou ressonância magnética (RM) foi introduzida em estudos em humanos e animais. Hoje, os scanners PET têm uma sensibilidade tão alta que é possível rastrear 64por até 70 h após a injeção. A meia-vida longa de 12,7 h para 64permite a avaliação a longo prazo dos fluxos de cobre. Essa melhora na resolução entrou recentemente no campo dos estudos do cobre, e estudos sobre o metabolismo normal e patológico do cobre, bem como estudos avaliando o impacto de tratamentos específicos, estão começando a surgir. Além disso, a introdução de scanners PET de corpo inteiro com um campo de visão alargado aumentará ainda mais a sensibilidade destes exames.
Este artigo metodológico visa permitir que clínicos e cientistas adicionem 64PET CT/MRI ao repertório de ferramentas existentes como um método robusto e fácil de usar para avaliar o metabolismo do cobre de maneira comparável entre os departamentos de medicina nuclear. A produção de cobre 64pode ser realizada usando diferentes métodos e geralmente é realizada em instalações especiais. Dentre as reações nucleares, o método de 64 Ni (p, n) 64 é amplamente utilizado, uma vez que um alto rendimento de produção de 64pode ser obtido com prótons de baixa energia nessa rota 7,8. Uma descrição detalhada dos métodos de produção está fora do escopo deste trabalho, e a disponibilidade será diferente por país e região.
Neste artigo, descrevemos primeiramente a preparação da radioquímica necessária e do traçador. Em seguida, são demonstrados os princípios para o preparo dos equipamentos de PET/CT ou PET/RM.

<table><tbody><tr><td>Filtro de esterilização de 0,22 micrômetros</td><td>Merck Life Science</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cânula 21 G 50 mm</td><td>BD Microlance</td><td>301155</td><td></td></tr><tr><td>Cânula 25 G 16 mm</td><td>BD Microlance</td><td>300600</td><td></td></tr><tr><td>Calibrador de dose</td><td>Capintec CRC-PC calibrador</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PET / CT scanner</td><td>Siemens: Biograph</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PET / MR scanner</td><td>GE Signa</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PMOD versão 4.0</td><td>PMOD Technologies LLC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solução salina 0,9% NaCl</td><td>Fresenius Kabi</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Acetato de sódio trihidratado BioUltra</td><td>Sigma Aldrich</td><td>71188</td><td></td></tr><tr><td>Solid 64CuCl2</td><td>Danish Technical University Ris&oslash;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Água estéril</td><td>Fresenius Kabi</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Venflon 22 G 25 mm</td><td>BD Venflon Pro Safety</td><td>393280</td><td></td></tr></tbody></table>

tomografia por emissão de pósitrons usando 64-cobre como traçador para o estudo de doenças relacionadas ao cobre

Positron Emission Tomography Using 64-Copper as a Tracer for the Study of Copper-Related Disorders

O cobre é um oligoelemento essencial, atuando em catálise e sinalização em sistemas biológicos. O cobre radiomarcado tem sido usado há décadas no estudo do metabolismo básico do cobre humano e animal e de distúrbios relacionados ao cobre, como a doença de Wilson (DM) e a doença de Menke. Uma adição recente a este kit de ferramentas é a tomografia por emissão de pósitrons (PET) de 64 cobre (64), combinando a imagem anatômica precisa dos modernos scanners de tomografia computadorizada (TC) ou ressonância magnética (RM) com a biodistribuição do sinal traçador PET de 64. Isso permite o rastreamento in vivo dos fluxos e cinética de cobre, visualizando diretamente o tráfego e o metabolismo de órgãos de cobre humanos e animais. Consequentemente, a PET 64é adequada para avaliar os efeitos clínicos e pré-clínicos do tratamento e já demonstrou a capacidade de diagnosticar a DP com precisão. Além disso, 64estudos de PET/CT de provaram ser valiosos em outras áreas científicas, como pesquisa de câncer e acidente vascular cerebral. O presente artigo mostra como realizar 64PET/CT ou PET/RM em humanos. Os procedimentos para manuseio de 64, preparo do paciente e configuração do scanner são demonstrados aqui.

Cálculo da dose Com base nos cálculos dosimétricos, a dose efetiva de radioatividade para administração IV é de 62 ± traçador de 5 μSv/MBq10. Assim, recomenda-se uma dose de 50 MBq, dependendo do período de tempo. Até 75-80 MBq é aplicável para exames mais longos e fornece imagens de boa qualidade sem exceder uma dose eticamente aprovada. A dose efetiva para administração oral é de 113 ± traçador de 1 μSv/MBq, devido ao acúmulo intestinal do traçador. Assim, uma dose menor prec...

O presente protocolo descreve como realizar imagens de PET/CT e PET/RM de 64em humanos para estudar distúrbios relacionados ao cobre, como a doença de Wilson, e o efeito do tratamento no metabolismo do cobre.

Tomografia por Emissão de Pósitrons Usando 64-Cobre como Traçador para o Estudo de Doenças Relacionadas ao Cobre

Copper is an essential trace element, functioning in catalysis and signaling in biological systems. Radiolabeled copper has been used for decades in ...

Este método já se mostrou significativo no estudo da doença de Wilson, pois podemos visualizar a distribuição do cobre nos pacientes. O benefício da imagem PET de cobre está na capacidade de monitorar sua biodistribuição dentro do corpo, facilitando a visualização não invasiva e a quantificação da concentração de cobre em vários órgãos. Esta técnica pode ser usada no diagnóstico da doença de Wilson e em ambientes de pesquisa para testar os efeitos do tratamento.No futuro, a técnica também poderá ser usada em ambientes clínicos para monitoramento do efeito do tratamento e, talvez, em outras doenças com metabolismo de cobre perturbado. Para começar, use luvas de plástico. Usando pinças longas, desinfete completamente a membrana de borracha do marcador contendo garrafa de vidro dentro do recipiente de chumbo com um cotonete de desinfecção.Insira uma cânula curta na membrana usando uma pinça para evitar o transbordamento do vácuo dentro do frasco. Com uma pinça, insira uma cânula mais longa na membrana para desenhar a solução traçadora. Introduza uma seringa de plástico de tamanho adequado na cânula longa e retire o volume calculado do traçador.Usando uma pinça, prenda uma cânula com uma tampa para fechar a seringa e transfira cuidadosamente a seringa para o calibrador de dose para medir a radioatividade. Armazene-o em um recipiente de chumbo até o uso. Medir a radioatividade na seringa utilizando o calibrador de dose.Observe a hora e a atividade na planilha. Usando luvas de plástico, remova cuidadosamente a tampa e a cânula da seringa usando uma pinça estéril. Conecte a seringa ao acesso IV do paciente.Observe a hora na planilha. E injete o traçador em um movimento constante. Após a injeção, remova a seringa do acesso intravenoso.Substitua a tampa e a cânula na seringa e mantenha-a assim até que a radioatividade restante seja medida. Lavar o acesso IV com solução salina para limpar qualquer marcador restante. Observe o tempo novamente.Em seguida, meça a radioatividade restante presente na seringa e anote na planilha. Para administração oral, que é outra maneira de administrar o traçador, despeje 100 mililitros de cordial em um copo plástico macio descartável. Usando uma pinça, retire a tampa e a cânula da seringa.Em seguida, enquanto estiver usando luvas de plástico, injete cuidadosamente o marcador no copo sem derramar. Retire uma pequena quantidade do cordial na seringa e injete-o de volta no copo para garantir a mistura adequada. Coloque um canudo plástico no copo e entregue o copo ao participante.Observe a hora na planilha. E permita que o participante beba a mistura. Coloque o copo, o canudo e a seringa vazios em um saco plástico descartável e coloque-os no recipiente de chumbo, se possível.Observe o tempo e meça a radioatividade que sobrou no saco descartável com a seringa, o copo plástico e o canudo. Coloque o participante em decúbito dorsal no scanner. Ajuste a posição do scanner antes de iniciar a digitalização.Realize uma visão geral, tomografia computadorizada ou ressonância magnética para planejar a região específica a ser examinada durante o PET scan. No protocolo PET scan, anote o tempo de sorteio, a injeção, a medição das sobras e os níveis de radioatividade na medida do sorteio e das sobras. Baixe os dados de digitalização como arquivos DICOM e transfira-os para um programa de análise, como o PMOD.Ajuste as configurações de tom dos exames para diferenciar as estruturas anatômicas. Trabalhando no plano horizontal, localize o fígado e as grandes estruturas. Colocar volume de interesse apropriado ou múltiplas VOIs no lobo direito do fígado em diferentes planos horizontais para obter as medidas de valor de captação padrão mais precisas, considerando que o valor pode variar em 5% dentro do lobo hepático direito.Calcule o valor padrão médio de captação desses VOIs. Em um estudo, comparando indivíduos saudáveis e pacientes com doença de Wilson, a distribuição de cobre foi monitorada em seis e 20 horas após a injeção. Nos pacientes, o cobre estava se acumulando no fígado.Enquanto em indivíduos saudáveis, o cobre é visível em segmentos intestinais com sinais mais elevados, indicando excreção biliar de cobre. 64 Varreduras de cobre foram realizadas utilizando um traçador administrado por via oral em dois indivíduos separados com doença de Wilson com e sem tratamento com zinco. O tratamento com zinco reduz efetivamente a absorção de cobre no trato intestinal e, subsequentemente, reduz o acúmulo de cobre no fígado.Em um indivíduo saudável, quatro semanas de tratamento com zinco reduziram o conteúdo de cobre no fígado para cerca de 50% do conteúdo pré-tratamento no grupo. Lembre-se de procurar grandes estruturas no fígado ao colocar os VOIs. E lembre-se de ajustar o tamanho do VOI ao tamanho do órgão para evitar transbordamento de outros órgãos.O procedimento pode ser combinado com coleta de sangue arterial para realizar análise cinética. E além do sangue, a atividade do cobre-64 também pode ser medida na urina e nas fezes.

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Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Fonte: Jamadar, S. et. al. Administração de radiotraçador para tomografia por emissão de pósitrons de alta resolução temporal do cérebro humano: aplicação ao FDG-fPET. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a quantificação do metabolismo da glicose cerebral usando tomografia por emissão de pósitrons (PET). O participante é infundido com o marcador F-18 fluorodesoxiglicose (FDG) durante a varredura. O FDG se acumula em neurônios ativos e emite pósitrons após o decaimento do F-18. Esses...

Tomografia por emissão de pósitrons do cérebro humano usando um radiotraçador

A cicloadição de Diels-Alder de demanda inversa de elétrons bioortogonal foi aproveitada para criar uma estratégia de imagem PET pré-direcionada eficaz e modular para o câncer. Neste protocolo, as etapas desta metodologia são descritas no contexto de um sistema modelo que emprega o anticorpo direcionado ao câncer colorretal huA33 e um radioligante marcado com 64.

Aproveitando a demanda Bioorthogonal Inverse Electron Diels-Alder para Pretargeted PET Imagem

Seguindo a preparação de um anticorpo monoclonal 64 Cu-modificados se ligar a um receptor de células T de murino transgico, as células T são radiomarcados in vivo, analisadas para a viabilidade, funcionalidade, estabilidade rotulagem e apoptose, e transferidas adoptivamente para ratinhos com uma via aérea hipersensibilidade de tipo retardado reacção para imagem não invasivo por tomografia de emissão de positrões / tomografia computadorizada (PET / CT).

Murino Linfócitos Rotulagem por<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-Antibody Receptor Segmentação para<em&gt; In Vivo</em&gt; Tráfico celular por PET / CT

Aqui, apresentamos um protocolo para obter68Ga núcleo dopado com óxido de ferro nanopartículas através de rápido orientado para o microondas síntese. A metodologia processa PET/nanopartículas de MRI (T1) com eficiência superior a 90% e a pureza radioquímica de 99% em uma síntese de 20 min de radioativos.

Síntese de nanopartículas de núcleo dopado com óxido de ferro Ga 68para tomografia por emissão de pósitrons Dual/imagem latente de ressonância magnética de (T1)

O locus coeruleus é um pequeno aglomerado de neurônios envolvidos em uma variedade de processos fisiológicos. Aqui, descrevemos um protocolo para preparar seções de cérebro de rato para estudos de proteínas e metais neste núcleo.

Localização do Locus Coeruleus no cérebro do rato

Este protocolo tem o objetivo de monitorar as alterações in vivo da mielina (desmielinização e remielinização) por meio da tomografia de emissão de pósitrons (PET) em um modelo animal de esclerose múltipla.

Tomografia de emissão de pósitrons para medição in vivo de conteúdo de mielina no modelo de rato de lysolecithin de esclerose múltipla

Este artigo detalha a metodologia para radiomarcação de um anticorpo monoclonal anti-CD19 humano-específico e como usá-lo para quantificar células B no sistema nervoso central e tecidos periféricos de um modelo de esclerose múltipla em camundongos usando imagens PET in vivo, contagem gama ex vivo e abordagens de autorradiografia.

Imagem de células B CD19+ em um modelo experimental de encefalomielite autoimune em camundongos usando tomografia por emissão de pósitrons

Medidas quantitativas do metabolismo de oxigênio e glicose por PET são tecnologias estabelecidas, mas detalhes de protocolos práticos são escassamente descritos na literatura. Este artigo apresenta um protocolo prático implementado com sucesso em um scanner de tomografia computadorizada por emissão de pósitrons de última geração.

Estudos multi-traçadores do metabolismo cerebral de oxigênio e glicose usando um scanner de tomografia computadorizada por emissão de pósitrons por tempo de voo

Estratégia de genética molecular para encontrar mutações de novo causando doenças comuns, tais como autismo e esquizofrenia.

A estratégia para identificar mutações de novo em Distúrbios comuns, tais como autismo e esquizofrenia

O uso de suínos domésticos e em miniatura na ciência tem aumentado significativamente nos últimos anos. Ao demonstrar como executar a intubação, cateterismo vesical transuretral, artéria femoral e cateterização da veia, bem como a perfusão transcardial, pretendemos aumentar ainda mais o valor de Göttingen minipigs na pesquisa biomédica.

Básico Técnicas Cirúrgicas na Minipig Göttingen: Intubação, cateterismo vesical, cateterização veia femoral e perfusão Transcardial

Aprenda a realizar imagem por PET com cobre-64 para visualizar a distribuição de cobre em pacientes com doença de Wilson. Esta técnica não invasiva permite quantificar a concentração de cobre em diferentes órgãos e monitorar os efeitos do tratamento.

Tomografia por Emissão de Pósitrons Usando 64-Cobre como Traçador para o Estudo de Doenças Relacionadas ao Cobre

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