January 26th, 2024
Este protocolo descreve em detalhes como construir um microscópio de fluorescência de lâmina de luz de objetiva única e seu uso para visualizar redes de citoesqueleto.
Nosso trabalho visa avançar no conhecimento sobre a relação entre a dinâmica do trabalho trans, a estrutura local e as propriedades mecânicas em materiais distantes do equilíbrio. A visualização de materiais distantes do equilíbrio, como redes de citoesqueleto, requer a capacidade de obter imagens de amostras tridimensionais densas com qualidade de imagem comparável em todo o volume da amostra, ao mesmo tempo em que causa danos mínimos por meio do fotoclareamento, uma tarefa tecnicamente desafiadora para a qual a microscopia de fluorescência é mais adequada. Os sistemas de microscópio de fluorescência fornecem excelentes capacidades de seccionamento óptico, o que permite a obtenção de imagens dessas amostras espessas e tridimensionais para longas escalas de tempo com o mínimo de fotoclareamento.
Em particular, o sistema de folha de luz de objetivo único que apresentaremos é compatível com as amostras tradicionais montadas em slides, tornando-o uma ferramenta muito versátil. A esmagadora maioria dos guias de folha de luz de objetivo único são escritos para usuários com ampla experiência em óptica. Para tornar a configuração complexa de estilo de folha de luz de objetivo único mais acessível, este guia detalhado fornece etapas que um usuário com um curso de óptica de nível básico pode seguir.
Este estudo visa aprimorar a compreensão da dinâmica do trabalho trans em materiais longe do equilíbrio, focando especificamente em redes do citoesqueleto. A pesquisa detalha a construção e aplicação de um microscópio de fluorescência com luz em feixe único para visualização ideal dessas amostras tridimensionais densas.
High-resolution visualization of dense, three-dimensional cytoskeleton networks is critical for early discovery and mechanistic de-risking in cell biology-driven drug discovery. The customizable single-objective light-sheet fluorescence microscope (SOLS) enables reproducible, low-photobleaching imaging of complex biological assemblies, supporting predictive confidence in target validation and phenotypic screening. This accessible instrumentation bridges the gap between advanced optical sectioning and practical R&D workflows, enhancing portfolio decision-making at the discovery inflection point.
The SOLS microscope integrates into the discovery-to-preclinical continuum by enabling quantitative imaging of 3D cytoskeleton models, supporting both hypothesis-driven research and scalable assay development.