Quantificação da Infiltração Gordurosa do Músculo Esquelético Baseada na Decelularização

Estamos interessados em crosstalk entre o músculo contraído e os adipócitos que se formam entre as fibras musculares em lesão e doença chamada tecido adiposo intramuscular, ou IMAT. A engenharia genética em células de camundongos é uma ferramenta poderosa para dissecar mecanisticamente o crosstalk do músculo gorduroso. A análise da sinalização via transcriptômica e proteômica identifica mediadores, e então a liberação de fármacos baseados em biomateriais pode intervir nessas vias.

Um dos principais desafios é isolar e quantificar os adipócitos do IMAT. Especialmente em modelos animais pequenos, o sinal IMAT é eliminado por análise muscular inteira, como transcriptômica ou lipidômica, e a quantificação de IMAT por imagem não invasiva sofre de washout semelhante, já que a maioria dos voxels contém uma mistura de músculo e IMAT. Recentemente, utilizamos essa técnica descrita neste artigo para demonstrar que o IMAT prejudica diretamente a contratilidade muscular.

Com medidas precisas de deposição de IMAT, mostramos que ele não apenas substitui o material contrátil, mas impede uma contração no restante do músculo magro. Este protocolo aborda os desafios da quantificação do IMAT. O padrão atual para medir o IMAT em pequenos animais é a histologia de corte único, que não é abrangente ou não invasiva, que é cara e de baixa resolução.

Acreditamos que isso tenha limitado nossa compreensão do crosstalk muscular IMAT. Esta técnica fornece um método abrangente e barato para avaliar o IMAT por visualização qualitativa e quantificação em várias escalas. Esperamos que a simplicidade desta técnica encoraje mais investigadores a medir o IMAT em seus modelos animais.

Além disso, esta técnica fornecerá uma ferramenta de maior precisão para os pesquisadores interessados em IMAT para descobrir relações mais sutis entre adipócitos IMAT e outras células.