A Simple, Rapid, and Effective Method for Tumor Xenotransplantation Analysis in Transparent Zebrafish Embryos

Monika Verma; Michele Rhodes; Susan Shinton; David L. Wiest

doi:10.3791/66164

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Pesquisa do Câncer

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Um método simples, rápido e eficaz para análise de xenotransplante tumoral em embriões transparentes de peixe-zebra

A Simple, Rapid, and Effective Method for Tumor Xenotransplantation Analysis in Transparent Zebrafish Embryos

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A Simple, Rapid, and Effective Method for Tumor Xenotransplantation Analysis in Transparent Zebrafish Embryos

Um método simples, rápido e eficaz para análise de xenotransplante tumoral em embriões transparentes de peixe-zebra

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06:10 min

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July 12, 2024

DOI:

10.3791/66164-v

DOI:

10.3791/66164-v

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06:10 min

July 12, 2024

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Monika Verma¹, Michele Rhodes¹, Susan Shinton¹, David L. Wiest¹

¹Nuclear Dynamics and Cancer Program,Fox Chase Cancer Center

Transcrição

Procuramos obter informações moleculares sobre o controle da hematopoiese normal e maligna e, em seguida, explorar essas percepções para desenvolver novas terapias para o tratamento de cânceres de sangue. Os xenoenxertos tumorais são uma ferramenta indispensável para avaliar o impacto de uma alteração genética ou tratamento no comportamento tumoral. No entanto, os xenoenxertos de camundongos são caros, demorados e de escopo limitado.

O uso de peixe-zebra para xenotransplante de tumor supera todas essas desvantagens. Neste protocolo, demonstramos um processo de montagem fácil e rápido para xenotransplante, o que aumenta o rendimento. Além disso, empregamos coloração celular para conhecer a qualidade do inóculo e, em seguida, citometria de fluxo para avaliar a progressão do tumor, avaliando ou quantificando a carga da doença.

Pretendemos usar essa abordagem para identificar novas maneiras de bloquear a função da cascata Ras / MAP quinase, que impulsiona a grande maioria dos cânceres humanos. E faremos isso não tentando bloquear a atividade catalítica da cascata Ras / MAP quinase, mas sim impedindo sua capacidade de fosforilar os substratos causadores de câncer que ela modifica.

Summary

Descrevemos um protocolo de xenotransplante na gema de embriões transparentes de peixe-zebra que é otimizado por um método de estadiamento simples e rápido. As análises pós-injeção incluem sobrevida e avaliação da carga da doença de células xenotransplantadas por citometria de fluxo.