Name: Coleta Simultânea de Cérebro Murino Fetal e Soro para Avaliar os Efeitos da Dieta Materna na Nutrição e Neurodesenvolvimento na Neurofibromatose Tipo 1 (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-17T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 44 s
Description: Aprenda a coletar simultaneamente cérebro e soro de embriões de camundongo para estudar neurodesenvolvimento fetal e os efeitos da dieta materna na Neurofibromatose Tipo 1. Este método reduz o uso de animais.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Colhendo simultaneamente o cérebro e o soro do feto murino

<ol><li>Listernick, R., Darling, C., Greenwald, M., Strauss, L., Charrow, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optic+pathway+tumors+in+children%3A+the+effect+of+neurofibromatosis+type+1+on+clinical+manifestations+and+natural+history%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Optic pathway tumors in children: the effect of neurofibromatosis type 1 on clinical manifestations and natural history.</a> J Pediatr. 127 (5), 718-722 (1995).</li>
<li>Fisher, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+molecular+and+clinical+analysis+of+low-grade+gliomas+in+children+with+neurofibromatosis+type+1+%28NF1%29%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol%22%5BJournal%5D)">Integrated molecular and clinical analysis of low-grade gliomas in children with neurofibromatosis type 1 (NF1).</a> Acta Neuropathol. 141 (4), 605-617 (2021).</li>
<li>Cimino, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expanded+analysis+of+high-grade+astrocytoma+with+piloid+features+identifies+an+epigenetically+and+clinically+distinct+subtype+associated+with+neurofibromatosis+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol%22%5BJournal%5D)">Expanded analysis of high-grade astrocytoma with piloid features identifies an epigenetically and clinically distinct subtype associated with neurofibromatosis type 1.</a> Acta Neuropathol. 145 (1), 71-82 (2023).</li>
<li>Lucas, C. -H. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplatform+molecular+analyses+refine+classification+of+gliomas+arising+in+patients+with+neurofibromatosis+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol%22%5BJournal%5D)">Multiplatform molecular analyses refine classification of gliomas arising in patients with neurofibromatosis type 1.</a> Acta Neuropathol. 144 (4), 747-765 (2022).</li>
<li>Fisher, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+neurofibromatosis+type+1-associated+plexiform+neurofibromas%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro-Oncol%22%5BJournal%5D)">Management of neurofibromatosis type 1-associated plexiform neurofibromas.</a> Neuro-Oncol. 24 (11), 1827-1844 (2022).</li>
<li>Packer, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plexiform+neurofibromas+in+NF1%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Plexiform neurofibromas in NF1.</a> Neurology. 58 (10), 1461-1470 (2002).</li>
<li>Evans, D. G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Malignant+peripheral+nerve+sheath+tumours+in+neurofibromatosis+1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Genet%22%5BJournal%5D)">Malignant peripheral nerve sheath tumours in neurofibromatosis 1.</a> J Med Genet. 39 (5), 311(2002).</li>
<li>Prudner, B. C., Ball, T., Rathore, R., Hirbe, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+management+of+malignant+peripheral+nerve+sheath+tumors%3A+Current+practice+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Neurooncol+Adv%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and management of malignant peripheral nerve sheath tumors: Current practice and future perspectives.</a> Neurooncol Adv. 2, Suppl 1 i40-i49 (2020).</li>
<li>Ma, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+molecular+basis+for+neurofibroma-associated+skeletal+manifestations+in+NF1%5BTitle%5D)+AND+%22Genet+Med%22%5BJournal%5D)">A molecular basis for neurofibroma-associated skeletal manifestations in NF1.</a> Genet Med. 22 (11), 1786-1793 (2020).</li>
<li>Ozarslan, B., Russo, T., Argenziano, G., Santoro, C., Piccolo, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutaneous+findings+in+neurofibromatosis+Type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Cutaneous findings in neurofibromatosis Type 1.</a> Cancers. 13 (3), 463(2021).</li>
<li>Hyman, S. L., Shores, A., North, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nature+and+frequency+of+cognitive+deficits+in+children+with+neurofibromatosis+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">The nature and frequency of cognitive deficits in children with neurofibromatosis type 1.</a> Neurology. 65 (7), 1037-1044 (2005).</li>
<li>Morris, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disease+burden+and+symptom+structure+of+autism+in+neurofibromatosis+type+1%3A+a+study+of+the+International+NF1-ASD+Consortium+Team+%28INFACT%29%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Disease burden and symptom structure of autism in neurofibromatosis type 1: a study of the International NF1-ASD Consortium Team (INFACT).</a> JAMA Psychiatry. 73 (12), 1276-1284 (2016).</li>
<li>Geoffray, M. -M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+cognitive%2C+behavioural+and+academic+difficulties+in+NF1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Psychiatr+Res%22%5BJournal%5D)">Predictors of cognitive, behavioural and academic difficulties in NF1.</a> J Psychiatr Res. 140, 545-550 (2021).</li>
<li>Monroe, C. L., Dahiya, S., Gutmann, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+clinical+heterogeneity+in+neurofibromatosis+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Rev+Pathol%22%5BJournal%5D)">Dissecting clinical heterogeneity in neurofibromatosis type 1.</a> Ann Rev Pathol. 12 (1), 53-74 (2017).</li>
<li>Kehrer-Sawatzki, H., Mautner, V. -F., Cooper, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+genotype-phenotype+relationships+in+patients+with+large+NF1+deletions%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">Emerging genotype-phenotype relationships in patients with large NF1 deletions.</a> Hum Genet. 136 (4), 349-376 (2017).</li>
<li>Hou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+cognitive+development+in+children+with+neurofibromatosis+type+1+and+plexiform+neurofibromas%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Predictors of cognitive development in children with neurofibromatosis type 1 and plexiform neurofibromas.</a> Dev Med Child Neurol. 62 (8), 977-984 (2020).</li>
<li>Biotteau, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sporadic+and+familial+variants+in+NF1%3A+an+explanation+of+the+wide+variability+in+neurocognitive+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Sporadic and familial variants in NF1: an explanation of the wide variability in neurocognitive phenotype.</a> Front Neurol. 11, 368(2020).</li>
<li>Rodriguez, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+adiposity+prior+to+pregnancy+is+associated+with+ADHD+symptoms+in+offspring%3A+evidence+from+three+prospective+pregnancy+cohorts%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Obes+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Maternal adiposity prior to pregnancy is associated with ADHD symptoms in offspring: evidence from three prospective pregnancy cohorts.</a> Int J Obes (Lond). 32 (3), 550-557 (2008).</li>
<li>Andersen, C. H., Thomsen, P. H., Nohr, E. A., Lemcke, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+body+mass+index+before+pregnancy+as+a+risk+factor+for+ADHD+and+autism+in+children%29%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Child+Adolesc+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Maternal body mass index before pregnancy as a risk factor for ADHD and autism in children).</a> Eur Child Adolesc Psychiatry. 27 (2), 139-148 (2018).</li>
<li>Pugh, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gestational+weight+gain%2C+prepregnancy+body+mass+index+and+offspring+attention-deficit+hyperactivity+disorder+symptoms+and+behaviour+at+age+10%5BTitle%5D)+AND+%22Bjog%22%5BJournal%5D)">Gestational weight gain, prepregnancy body mass index and offspring attention-deficit hyperactivity disorder symptoms and behaviour at age 10.</a> Bjog. 123 (13), 2094-2103 (2016).</li>
<li>Mina, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+exposure+to+maternal+very+severe+obesity+is+associated+with+impaired+neurodevelopment+and+executive+functioning+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Prenatal exposure to maternal very severe obesity is associated with impaired neurodevelopment and executive functioning in children.</a> Pediatr Res. 82 (1), 47-54 (2017).</li>
<li>Oken, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+maternal+prenatal+weight+and+offspring+cognition+and+behavior%3A+Results+from+the+Promotion+of+Breastfeeding+Intervention+Trial+%28PROBIT%29+Cohort%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Netw+Open%22%5BJournal%5D)">Analysis of maternal prenatal weight and offspring cognition and behavior: Results from the Promotion of Breastfeeding Intervention Trial (PROBIT) Cohort.</a> JAMA Netw Open. 4 (8), e2121429-e2121429 (2021).</li>
<li>Buss, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+executive+function+mediates+the+association+between+maternal+pre-pregnancy+body+mass+index+and+child+ADHD+symptoms%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Impaired executive function mediates the association between maternal pre-pregnancy body mass index and child ADHD symptoms.</a> PLOS ONE. 7 (6), e37758(2012).</li>
<li>Li, Y. -M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+between+maternal+obesity+and+autism+spectrum+disorder+in+offspring%3A+a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Autism+Dev+Disord%22%5BJournal%5D)">Association between maternal obesity and autism spectrum disorder in offspring: a meta-analysis.</a> J Autism Dev Disord. 46 (1), 95-102 (2016).</li>
<li>Dow, C., Galera, C., Charles, M. -A., Heude, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+pre-pregnancy+BMI+and+offspring+hyperactivity-inattention+trajectories+from+3+to+8+years+in+the+EDEN+birth+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Child+Adolesc+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Maternal pre-pregnancy BMI and offspring hyperactivity-inattention trajectories from 3 to 8 years in the EDEN birth cohort study.</a> Eur Child Adolesc Psychiatry. 32 (10), 2057-2065 (2023).</li>
<li>Fast, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+attention-deficit%2Fhyperactivity+disorder+and+autism+in+12-year-old+children%3A+A+population-based+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Devl+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Prevalence of attention-deficit/hyperactivity disorder and autism in 12-year-old children: A population-based cohort.</a> Devl Med Child Neurol. 66 (4), 493-500 (2023).</li>
<li>Carter, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+obesity+and+diabetes+during+pregnancy+and+early+autism+screening+score+at+well-child+visits+in+standard+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22Autism%22%5BJournal%5D)">Maternal obesity and diabetes during pregnancy and early autism screening score at well-child visits in standard clinical practice.</a> Autism. 28 (4), 975-984 (2023).</li>
<li>West, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationships+between+maternal+body+mass+index+and+child+cognitive+outcomes+at+3+years+of+age+are+buffered+by+specific+early+environments+in+a+prospective+Canadian+birth+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dev+Orig+Health+Dis%22%5BJournal%5D)">Relationships between maternal body mass index and child cognitive outcomes at 3 years of age are buffered by specific early environments in a prospective Canadian birth cohort.</a> J Dev Orig Health Dis. 14 (1), 42-52 (2023).</li>
<li>Gutmann, D. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurofibromatosis+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Dis+Primers%22%5BJournal%5D)">Neurofibromatosis type 1.</a> Nat Rev Dis Primers. 3, 17004(2017).</li>
<li>Martins, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lower+fasting+blood+glucose+in+neurofibromatosis+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr+Connect%22%5BJournal%5D)">Lower fasting blood glucose in neurofibromatosis type 1.</a> Endocr Connect. 5 (1), 28-33 (2016).</li>
<li>Martins, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+insulin+sensitivity+in+individuals+with+neurofibromatosis+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Increased insulin sensitivity in individuals with neurofibromatosis type 1.</a> Arch Endocrinol Metab. 62 (1), 41-46 (2018).</li>
<li>Brossier, N. M., Thondapu, S., Cobb, O. M., Dahiya, S., Gutmann, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal%2C+spatial%2C+and+genetic+constraints+contribute+to+the+patterning+and+penetrance+of+murine+Neurofibromatosis-1+optic+glioma%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro+Oncol%22%5BJournal%5D)">Temporal, spatial, and genetic constraints contribute to the patterning and penetrance of murine Neurofibromatosis-1 optic glioma.</a> Neuro Oncol. 23 (4), 625-637 (2020).</li>
<li>de Lurdes Pinto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technical+Report%3A+Mouse+fetal+blood+collection+taking+the+best+out+of+the+old+needle-syringe+method%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Technical Report: Mouse fetal blood collection taking the best out of the old needle-syringe method.</a> Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 35 (1), 5(2008).</li>
<li>Musillo, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bdnf-Nrf-2+crosstalk+and+emotional+behavior+are+disrupted+in+a+sex-dependent+fashion+in+adolescent+mice+exposed+to+maternal+stress+or+maternal+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Bdnf-Nrf-2 crosstalk and emotional behavior are disrupted in a sex-dependent fashion in adolescent mice exposed to maternal stress or maternal obesity.</a> Transl Psychiatry. 13 (1), 399(2023).</li>
<li>Encinas, J. M., Vaahtokari, A., Enikolopov, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluoxetine+targets+early+progenitor+cells+in+the+adult+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Fluoxetine targets early progenitor cells in the adult brain.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (21), 8233-8238 (2006).</li>
<li>Anastasaki, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+induced+pluripotent+stem+cell+engineering+establishes+a+humanized+mouse+platform+for+pediatric+low-grade+glioma+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol+Commun%22%5BJournal%5D)">Human induced pluripotent stem cell engineering establishes a humanized mouse platform for pediatric low-grade glioma modeling.</a> Acta Neuropathol Commun. 10 (1), 120(2022).</li>
<li>Cai, H. -J., Xie, C. -L., Chen, Q., Chen, X. -Y., Chen, Y. -H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+hepatic+low-density+lipoprotein+receptor+activity+and+serum+cholesterol+level+in+the+human+fetus%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">The relationship between hepatic low-density lipoprotein receptor activity and serum cholesterol level in the human fetus.</a> Hepatology. 13 (5), 852-857 (1991).</li>
<li>Toonen, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NF1+germline+mutation+differentially+dictates+optic+glioma+formation+and+growth+in+neurofibromatosis-1%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">NF1 germline mutation differentially dictates optic glioma formation and growth in neurofibromatosis-1.</a> Hum Mol Genet. 25 (9), 1703-1713 (2016).</li>
<li>Guo, X., Pan, Y., Gutmann, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+and+genomic+alterations+differentially+dictate+low-grade+glioma+growth+through+cancer+stem+cell-specific+chemokine+recruitment+of+T+cells+and+microglia%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro+Oncol%22%5BJournal%5D)">Genetic and genomic alterations differentially dictate low-grade glioma growth through cancer stem cell-specific chemokine recruitment of T cells and microglia.</a> Neuro Oncol. 21 (10), 1250-1262 (2019).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Meyer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+three+commonly+used+blood+sampling+techniques+on+the+welfare+of+laboratory+mice%3A+Taking+the+animal%27s+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Impact of three commonly used blood sampling techniques on the welfare of laboratory mice: Taking the animal's perspective.</a> PLOS ONE. 15 (9), e0238895(2020).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Jung, J., Garnett, E., Rector, K., Jariwala, P., Devaraj, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+collection+tube+type+on+glucose+stability+in+whole+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Clin+Lab+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of collection tube type on glucose stability in whole blood.</a> Ann Clin Lab Sci. 50 (4), 557-559 (2020).</li>
<li>Bonetti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+sample+tube+should+be+used+for+routine+glucose+determination%5BTitle%5D)+AND+%22Prim+Care+Diabetes%22%5BJournal%5D)">Which sample tube should be used for routine glucose determination.</a> Prim Care Diabetes. 10 (3), 227-232 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#5/45 Fórceps</td><td>Dumont&nbsp;</td><td>11251-35 Forma da</td><td>Ponta: Angular 45&deg;</td></tr><tr><td>4200 Tapestation</td><td>Agilent</td><td>G2991BA</td><td>Verifique a integridade e a qualidade do RNA, medição dos valores de RIN</td></tr><tr><td>Recipiente de nitrogênio líquido de bancada</td><td>Thermo Fisher</td><td>2122</td><td>Ou outro recipiente crio-seguro</td></tr><tr><td>Controle Chow</td><td>PicoLab</td><td>5053</td><td>Dietas de pesquisa D12328 (baixo teor de gordura, baixo teor de açúcar) também podem ser usadas.</td></tr><tr><td>Pinça Curvada</td><td>Cole Parmer</td><td>UX-10818-25</td><td>Forma da ponta: curvada 90&deg;</td></tr><tr><td>Cabo de lâmina de dissecação</td><td>Cole-Parmer Essentials</td><td>10822-20</td><td>SS Siegel-Type, lâminas #10 a #15</td></tr><tr><td>Tesoura de Dissecção EMS SuperCut</td><td>Microscópio eletrônico sciences</td><td>72996-01</td><td>5&frac12; " (139,7 mm), anticorpo GFAP reto</td></tr><tr><td></td><td>Abcam</td><td>ab7260</td><td>diluído 1:350. Bloco com soro a 10% contendo 0,3 M de glicina.</td></tr><tr><td>Lâminas Cirúrgicas de Aço Carbono Glassvan, Tamanho 11</td><td>As lâminas MYCO medical</td><td>2001T-11</td><td>#11 permitem corte reto e plano</td></tr><tr><td>Colher de laboratório Micro</td> Az <td>Scilab</td><td>A2Z-VL001</td><td>em aço inoxidável, autoclavável</td></tr><tr><td>Tesoura Micro</td><td>Rubis</td><td>78180-1C3</td><td>modelo 1C300</td></tr><tr><td>Minivette&nbsp; POCT neutro</td><td>Sarstedt</td><td>17.2111.050</td><td>volume nominal: 50 &micro; L, sem preparação</td></tr><tr><td>Nanorop</td><td>Thermo Fisher</td><td>13-400-519</td><td>Medir a concentração de RNA, proporções 260/280</td></tr><tr><td>Dieta obesogênica</td><td>Researchdiets.com</td><td>D12331</td> Reagente de colesterol total <td>com alto teor de gordura e sacarose</td></tr><tr><td></td><td>Thermo Fisher</td><td>TR13421</td><td>Detecção colorimétrica</td></tr><tr><td>&beta;-anticorpo de actina</td><td>Sinalização celular</td><td>8457</td><td>Diluir 1:1.000.</td></tr></tbody></table>

coleta simultânea de cérebro murino fetal e soro para avaliar os efeitos da dieta materna na nutrição e neurodesenvolvimento na neurofibromatose tipo 1

Concurrent Collection of Fetal Murine Brain and Serum to Assess Effects of Maternal Diet on Nutrition and Neurodevelopment in Neurofibromatosis Type 1

Para ilustrar a qualidade do tecido cerebral obtido por meio dessa técnica, mostramos amostras de cérebros fetais de camundongos Nestin-CFPnuc35, imunomarcados para GFAP por uma técnica relatada anteriormente32. As células Nestin+ são vistas revestindo o ventrículo lateral (Figura 2A), com filamentos GFAP+ estendendo-se da superfície. Não observamos diferenças entre a expressão de Nestin ou GFAP no ventrículo lateral de camundongos DC versus Ob-expostos em cepas heterozigóticas WT ou Nf1 (Figura 2A, B). Em seguida, avaliamos a qualidade do tecido microdissecado. Primeiro realizamos western blotting36 para a proteína de manutenção β-actina no tecido microdissecado isolado dos ventrículos laterais de DC versus camundongos obexpostos. Todas as amostras apresentaram forte expressão de β-actina (Figura 2C), como esperado. Em seguida, isolamos o RNA do tecido microdissecado de acordo com a metodologia relatada anteriormente32. O RNA isolado exibiu alta pureza (260/280 ≥ 2) e integridade (valores de RIN ≥ 9), indicativos de RNA não degradado de alta pureza (Figura 2D).
Em seguida, comparamos os diferentes métodos de isolamento sérico. Usando nosso método minivette, coletamos rotineiramente volumes maiores de soro não hemolisado, enquanto a drenagem por gravidade e a punção torácica resultaram em coleta de volume altamente variável e hemólise em muitas amostras (Figura 3A, B). Para ilustrar a qualidade do soro obtido por meio dessa técnica, medimos os níveis séricos totais de colesterol usando o reagente de colesterol total de acordo com as instruções do fabricante. Os níveis de colesterol fetal estavam dentro da faixa esperada para filhotes no final da gestação com base em estudos anteriores em fetos humanos37. Os níveis foram aumentados em camundongos expostos a Ob em comparação com expostos a CD para filhotes heterozigotos do tipo selvagem (Figura 3C, à esquerda) e heterozigotos Nf1 (Figura 3C, à direita). Observe que o painel direito mostra dados combinados de duas cepas heterozigóticas Nf1 diferentes com mutações germinativas identificadas pelo paciente (R681X, C383X) 32 , 38 , 39 como perfis semelhantes foram observados em ambas as cepas.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66226/66226fig01.jpg"> Figura 1: Resumo gráfico do fluxo de trabalho. Os filhotes são isolados primeiro de mães grávidas. O soro é então colhido dos filhotes. Por fim, cérebros inteiros são isolados de filhotes e, se desejado, microdissecados para regiões de interesse. Gráfico criado com BioRender.com. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66226/66226fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66226/66226fig02.jpg"> Figura 2: Resultados ilustrativos, tecido cerebral. (A) Cérebros criosseccionados de camundongos Nestin-CFPnuc , que expressam uma proteína fluorescente ciano localizada nuclearmente sob o controle do promotor Nestin, foram colhidos com este método e imunomarcados para GFAP (vermelho) de acordo com a metodologia relatada anteriormente32. As células nestin-positivas são visualizadas por meio da expressão endógena de Nestin-CFPnuc (verde). Os núcleos foram contracorados com bis-benzimida (azul). Não houve diferenças significativas entre os cérebros DC e WT obexpostos. Barra de escala = 100 μm. (B) Nestin-CFPnuc; Os filhotes de Nf1mut/+ foram avaliados de forma semelhante. A distribuição da GFAP e da Nestin-CFP mostrou-se semelhante à WT e não variou com as condições alimentares. Barra de escala = 100 μm. (C) A proteína foi isolada do tecido microdissecado do VE. O Western blotting foi realizado de acordo com a metodologia relatada anteriormente36 com 20 μg de proteína carregada por pista. Forte expressão de β-actina foi detectável em todas as amostras. (D) O RNA foi isolado do tecido microdissecado de acordo com a metodologia relatada anteriormente32. A qualidade do RNA foi avaliada por meio de razões 260/280 e valores de RIN. Todas as amostras apresentaram excelentes razões 260/280 (≥2) e valores de RIN (≥9), indicando bom isolamento de RNA não degradado. Abreviaturas: CFP = proteína fluorescente ciano; GFAP = proteína glial fibrilar ácida; WT = tipo selvagem; VE = ventrículo lateral; RIN = número de integridade do RNA. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66226/66226fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66226/66226fig03.jpg"> Figura 3: Resultados ilustrativos e soro. (A) O soro foi coletado de cada um dos métodos descritos. A coleta com o minivette permitiu a coleta rotineira de soro não hemolisado em comparação com a drenagem assistida por gravidade e punção torácica. (B) Os volumes típicos de coleta de soro são mostrados. A coleção Minivette permitiu uma coleta mais reprodutível de volumes maiores de soro. Significância estatística determinada por ANOVA one-way com comparações múltiplas. Barras de erro: MEV. (C) O colesterol sérico total foi medido a partir de DC vs WT obexposto (esquerda) e Nf1-heterozigoto (direita) soro fetal combinado; Os animais obexpostos apresentaram colesterol sérico mais elevado em ambos os genótipos. Significância estatística determinada pelo teste t. Barras de erro: SEM. Abreviações: WT = tipo selvagem; CD = dieta controle; Ob = dieta obesogênica. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66226/66226fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Tabela Suplementar S1: Composições Dietéticas. A composição das dietas controle e obesogênica utilizadas neste manuscrito é mostrada. NOTA: Para uma dieta com baixo teor de gordura e sem sacarose que controla melhor os componentes dietéticos individuais em D12331, a dieta D12328 (researchdiets.com) pode ser preferida. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66226/66226_S_Table1Rev.zip" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>

Coleta Simultânea de Cérebro Murino Fetal e Soro para Avaliar os Efeitos da Dieta Materna na Nutrição e Neurodesenvolvimento na Neurofibromatose Tipo 1

Maternal diet-induced obesity has been demonstrated to alter neurodevelopment in offspring, which may lead to reduced cognitive capacity, hyperactivity, ...

concurrent-collection-fetal-murine-brain-serum-to-assess-effects

Research

JoVE Journal

Genetics

Genética

Morte fetal e perinatal é uma característica comum quando se estuda alterações genéticas que afetam o desenvolvimento cardíaco. De alta freqüência ultra-sonografia tem melhorado 2-D resolução e pode fornecer excelentes informações sobre o desenvolvimento cardíaco precoce e é um método ideal para detectar o impacto sobre a estrutura e função cardíaca antes da morte.

Ecocardiografia Fetal murino

O delineamento experimental proposto aqui se concentrar em estudar os efeitos da exposição ao álcool na apoptose e da aplicação de peptídeo neurotrófico durante a gravidez no cérebro fetal. Uma descrição detalhada da criação para a coleção de cérebros fetais é descrito. As técnicas para a determinação da apoptose são também descritos em detalhe.

Métodos experimentais para testar os efeitos de Peptide Neurotrophic, ADNF-9, contra a apoptose induzida pelo álcool durante a gravidez em camundongos C57BL / 6

A função dos neurônios de mamíferos nascido de adultos continua a ser uma área ativa de pesquisa. A radiação ionizante inibe o nascimento de novos neurônios. Usando computador guiada por tomografia irradiação focal (CFIR), segmentação anatômica tridimensional de populações específicas progenitoras neurais agora pode ser usado para avaliar o papel funcional da neurogênese adulta.

Interrogatório funcional do Adulto Hypothalamic Neurogenesis com Focal Radiológica Inibição

Nós descrevemos um protocolo de imuno-histoquímica para estudar o perfil de ativação dos neurônios do hipocampo após a exposição a uma tarefa de aprendizagem espacial em um modelo de rato caracterizado por déficits cognitivos de origem do desenvolvimento neurológico. Este protocolo pode ser aplicado a ambos os modelos genéticos ou farmacológicos de ratinho caracterizadas por disfunções cognitivas.

A visualização imuno-histoquímica de Hippocampal Neuron Atividade Após Spatial Aprendizagem em um rato modelo de desordens do desenvolvimento neurológico

Mecanismos epigenéticos são frequentemente alterados no glioma. Imunoprecipitação da cromatina pode ser usada para estudar as consequências de alterações genéticas no glioma que resultam de mudanças nas modificações do histone que regulam a transcrição de gene e a estrutura da cromatina. Este protocolo descreve imunoprecipitação da cromatina nativa na neurospheres de tumor murino de cérebro.

Imunoprecipitação da cromatina nativa usando Neurospheres de Tumor de cérebro murino

Aqui, apresentamos um protocolo para isolar núcleos de cérebro em cérebro de ratos neonatal, em conjunto com a primeira mamada do colostro. Esta técnica permite o estudo do stress de insuficiência de nutrientes no cérebro como modulada por sinalização do enterócito.

Avaliação de estresse celular e inflamação em discreta secretoras de ocitocina núcleos de cérebro em ratos Neonatal antes e depois da primeira mamada do colostro

A combinação de microscopia eletrônica de transmissão e transdução no útero é uma poderosa abordagem para o estudo de mudanças morfológicas na ultraestrutura fina do sistema nervoso durante o desenvolvimento. Este método combinado permite insights profundos sobre mudanças em detalhes estruturais subjacentes neuroplasticidade no que diz respeito a sua representação topográfica.

Avaliação dos parâmetros de neuroplasticidade ultraestrutural depois no Utero transdução da medula espinhal e cérebro de rato em desenvolvimento

Desenvolvemos um modelo de coioamnionite para simular a exposição fetal à inflamação materna (FEMI) sem complicações de organismos vivos para examinar os efeitos do FEMI no desenvolvimento do trato intestinal da prole. Isso permite o estudo de causas mecanicistas para o desenvolvimento de lesões intestinais após a coioamnionite.

Um modelo murino de exposição fetal à inflamação materna para estudar os efeitos da coioamnionite aguda no desenvolvimento intestinal recém-nascido

Este protocolo descreve o método para reduzir a ingestão dietética de ácido fólico ou colina em camundongos fêmeas antes da gravidez com o objetivo de investigar o impacto da dieta materna nos resultados de saúde da prole.

Modificando os níveis de ácido fólico ou colina na dieta materna para estudar o impacto das deficiências nos resultados de saúde da prole

O artigo fornece um protocolo abrangente para gerar um modelo de camundongos de ativação imunológica materna (MIA) para estudar os efeitos da inflamação gestacional precoce no neurodesenvolvimento, incluindo métricas-chave para garantir confiabilidade e reprodutibilidade.

Geração do modelo de camundongo de ativação imunológica materna gestacional precoce para avaliar a inflamação pré-natal no neurodesenvolvimento

Aprenda a coletar simultaneamente cérebro e soro de embriões de camundongo para estudar neurodesenvolvimento fetal e os efeitos da dieta materna na Neurofibromatose Tipo 1. Este método reduz o uso de animais.

Coleta Simultânea de Cérebro Murino Fetal e Soro para Avaliar os Efeitos da Dieta Materna na Nutrição e Neurodesenvolvimento na Neurofibromatose Tipo 1 (Vídeo) | JoVE Journal

Coleta Simultânea de Cérebro Murino Fetal e Soro para Avaliar os Efeitos da Dieta Materna na Nutrição e Neurodesenvolvimento na Neurofibromatose Tipo 1

Explorar mais vídeos