Análise de Eletrocardiogramas e Comportamento em Camundongos da Gravidez ao Período de Lactação

Nossa pesquisa se concentra nas mudanças fisiológicas nas mães da gravidez à lactação e como elas afetam o comportamento materno e o desenvolvimento de seus filhotes. Procuramos determinar como a fisiologia de uma mãe se adapta para apoiar o crescimento e desenvolvimento saudáveis de sua prole. A implementação de territórios em camundongos prenhes permite o rastreamento contínuo de ECG desde a gravidez até a lactação, fornecendo uma visão da atividade automática durante um evento reprodutivo. Este método resulta em observações de comportamento mais naturais e os registros simultâneos de ECG oferecem uma compreensão clara das mudanças na fisiologia materna.

Nossa pesquisa melhorou os métodos de cirurgia e os métodos de observação de camundongos, tornando possível monitorar camundongos por um longo tempo.

Nossa pesquisa nos ajuda a entender como a resposta física da mãe durante a gravidez e lactação em termos de atividade automática. Nossa pesquisa pode levar a um melhor cuidado materno e apoio ao desenvolvimento de filhotes e pode inspirar novas abordagens para estudar a reprodução, não apenas em animais, mas também em humanos.

No futuro, planejamos investigar onde as mães que cometeram infanticídio ou negligência no ambiente natural têm diferenças na atividade autonômica e no comportamento materno da gravidez à lactação em comparação com as mães normais. Acreditamos que este protocolo também será útil para entender os fatores por trás da negligência e do infanticídio.

[Instrutor] Para começar, coloque o mouse anestesiado em uma posição de bruços no aquecedor do painel. Usando uma tesoura, faça uma incisão na pele entre as orelhas e, em seguida, insira uma pinça na incisão para separar a pele e o músculo ao redor do pescoço e do lado ventral, criando um espaço para a colocação do telémetro. Agora insira o telémetro através da incisão entre as orelhas e coloque-o no espaço criado no lado ventral. Use uma pinça para rolar e agrupar os fios positivo e negativo do telémetro e coloque esses fios no espaço do pescoço. Para fechar a incisão, use uma agulha de 13 milímetros e uma sutura de 20 centímetros. Em seguida, coloque o mouse em decúbito dorsal. Usando uma tesoura, faça uma pequena incisão ao redor da pele da clavícula e separe os músculos da pele do pescoço. Com uma pinça, extraia os eletrodos positivos e negativos da nuca. Em seguida, separe suavemente as glândulas salivares para expor a aparência em forma de V do músculo esternocleidomastóideo. Em seguida, ajuste o comprimento do eletrodo negativo para alcançar o músculo esternocleidomastóideo próximo à clavícula e remova cuidadosamente o tubo de eletrodo do eletrodo negativo. Agora passe a agulha de costura com uma sutura de 10 centímetros através da curva em forma de V do músculo esternocleidomastóideo para criar um laço. Passe o eletrodo de aço inoxidável do fio negativo através deste laço e posicione-o sob o músculo próximo à clavícula. Amarre levemente o laço para prender o eletrodo de aço inoxidável sem danificar o músculo esternocleidomastóideo. Além disso, posicione uma segunda sutura no lado cranial do músculo e amarre-a ao redor do tubo do eletrodo negativo para prendê-la. Em seguida, corte ao redor do processo xifóide e separe cuidadosamente a pele do músculo entre o processo xifóide e a clavícula. Em seguida, estenda o eletrodo positivo para alcançar o processo xifóide. Remova o tubo de chumbo do condutor positivo, certificando-se de que o eletrodo de aço inoxidável enrolado no interior seja esticado com uma pinça fina. Em seguida, use uma agulha de calibre 18 para criar um túnel sob o músculo ao redor do processo xifóide. Em seguida, coloque o eletrodo de aço inoxidável em uma agulha e passe-o pelo músculo ao redor do processo xifóide. Depois que a agulha for removida, use uma agulha de costura com uma sutura de 10 centímetros para suturar levemente o eletrodo de aço inoxidável enrolado no músculo ao redor do processo xifóide. Para proteger ainda mais o eletrodo positivo, posicione uma segunda sutura no lado cranial do apêndice xifóide e amarre-a ao redor do tubo do eletrodo positivo. Usando uma agulha de costura com sutura de 20 centímetros, feche todas as incisões. Após a implantação, coloque o mouse em uma gaiola limpa. Para começar, coloque o mouse com o telémetro na gaiola e posicione a gaiola na T-Base que atua como o receptor para a telemetria do mouse. Ligue o computador gravável e use o aplicativo de software de análise de dados instalado para coletar dados de eletrocardiograma do mouse. Em seguida, usando o aplicativo de prontuário de laboratório no computador gravável, registre o eletrocardiograma. Para analisar os dados do eletrocardiograma, inicie o LabChart e abra o arquivo de dados para o período de registro. Clique no botão HRV e ajuste as configurações de detecção de batimentos de acordo para analisar a variabilidade da frequência cardíaca. Em seguida, clique no botão HRV e selecione a visualização Beat Classifier. Escolha todas as batidas na visualização Classificador de batidas e selecione a visualização Relatório no botão VFC. Copie os dados da Exibição de Relatório e cole-os no Excel para análise posterior. A análise do eletrocardiograma mostrou que a freqüência cardíaca diminuiu gradativamente, enquanto o intervalo de freqüência respiratória aumentou gradativamente do GD 17 para o DP 21. A análise da VFC mostrou que a razão de baixa para alta frequência aumentou acentuadamente de PD 0 para PD 21.