Name: Análise de Eletrocardiogramas e Comportamento em Camundongos da Gravidez ao Período de Lactação (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 40 s
Description: Aprenda a analisar ECG e comportamento materno em camundongos da gravidez à lactação usando telemetria contínua. Este método permite observações naturais simultâneas de atividade autonômica e cuidado parental.

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<meta charset="utf8"></head><body>Mudanças autonômicas maternas de camundongos da gravidez para a criação de filhotes

<ol><li>Bowlby, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBowlby%2C+J+%22Attachment+and+loss.+Vol.+1%22">Attachment and loss. Vol. 1</a>. 1, Basic Books. New York. (1969).</li>
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<li>Sakamoto, T., Ishio, Y., Ishida, Y., Mogi, K., Kikusui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+maternal+licking%2Fgrooming+stimulation+increases+pain+sensitivity+in+male+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Anim%22%5BJournal%5D)">Low maternal licking/grooming stimulation increases pain sensitivity in male offspring.</a> Exp Anim. 70 (1), 13-21 (2021).</li>
<li>Champagne, F., Meaney, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Like+mother%2C+like+daughter%3A+Evidence+for+non-genomic+transmission+of+parental+behavior+and+stress+responsivity%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Like mother, like daughter: Evidence for non-genomic transmission of parental behavior and stress responsivity.</a> Prog Brain Res. 133, 287-302 (2001).</li>
<li>Terkel, J., Rosenblatt, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+behavior+induced+by+maternal+blood+plasma+injected+into+virgin+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Physiol+Psychol%22%5BJournal%5D)">Maternal behavior induced by maternal blood plasma injected into virgin rats.</a> J Comp Physiol Psychol. 65 (3), 479-482 (1968).</li>
<li>Amenomori, Y., Chen, C. L., Meites, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+prolactin+levels+in+rats+during+different+reproductive+states%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Serum prolactin levels in rats during different reproductive states.</a> Endocrinology. 86 (3), 506-510 (1970).</li>
<li>Yaguchi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+modulation+of+pulsatile+activities+of+oxytocin+neurons+in+lactating+wild-type+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Dynamic modulation of pulsatile activities of oxytocin neurons in lactating wild-type mice.</a> PloS One. 18 (5), e0285589(2023).</li>
<li>Kikusui, T., Isaka, Y., Mori, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+weaning+deprives+mouse+pups+of+maternal+care+and+decreases+their+maternal+behavior+in+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Early weaning deprives mouse pups of maternal care and decreases their maternal behavior in adulthood.</a> Behav Brain Res. 162 (2), 200-206 (2005).</li>
<li>Kodogo, V., Azibani, F., Sliwa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+pregnancy+hormones+and+hormonal+interaction+on+the+maternal+cardiovascular+system%3A+a+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Res+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Role of pregnancy hormones and hormonal interaction on the maternal cardiovascular system: a literature review.</a> Clin Res Cardiol. 108 (8), 831-846 (2019).</li>
<li>Burke, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulatory+and+renal+consequences+of+pregnancy+in+diabetic+NOD+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Circulatory and renal consequences of pregnancy in diabetic NOD mice.</a> Placenta. 32 (12), 949-955 (2011).</li>
<li>Feldman, R., Magori-Cohen, R., Galili, G., Singer, M., Louzoun, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mother+and+infant+coordinate+heart+rhythms+through+episodes+of+interaction+synchrony%5BTitle%5D)+AND+%22Infant+Behav+Dev%22%5BJournal%5D)">Mother and infant coordinate heart rhythms through episodes of interaction synchrony.</a> Infant Behav Dev. 34 (4), 569-577 (2011).</li>
<li>Yoshida, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infants+show+physiological+responses+specific+to+parental+hugs%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">Infants show physiological responses specific to parental hugs.</a> iScience. 23 (4), 100996(2020).</li>
<li>Wass, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parents+mimic+and+influence+their+infant%27s+autonomic+state+through+dynamic+affective+state+matching%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Parents mimic and influence their infant's autonomic state through dynamic affective state matching.</a> Curr Biol. 29 (14), 2415-2422 (2019).</li>
<li>Esposito, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infant+calming+responses+during+maternal+carrying+in+humans+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Infant calming responses during maternal carrying in humans and mice.</a> Curr Biol. 23 (9), 739-745 (2013).</li>
<li>Khandoker, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+effect+of+cholinergic+and+adrenergic+blocking+agents+on+maternal-fetal+heart+rates+and+their+interactions+in+mice+fetuses%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Open%22%5BJournal%5D)">Investigating the effect of cholinergic and adrenergic blocking agents on maternal-fetal heart rates and their interactions in mice fetuses.</a> Biol Open. 11 (4), (2022).</li>
<li>Widatalla, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+between+maternal+and+fetal+heart+rate+increases+with+fetal+mouse+age+in+typical+development+and+is+disturbed+in+autism+mouse+model+treated+with+valproic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Correlation between maternal and fetal heart rate increases with fetal mouse age in typical development and is disturbed in autism mouse model treated with valproic acid.</a> Front Psychiatry. 13, 998695(2022).</li>
<li>Mezzacappa, E. S., Tu, A. Y., Myers, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactation+and+weaning+effects+on+physiological+and+behavioral+responses+to+stressors%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Lactation and weaning effects on physiological and behavioral responses to stressors.</a> Physiol Behav. 78 (1), 1-9 (2003).</li>
<li>Slangen, B. F., Out, I. C., Janssen, B. J., Peeters, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+pressure+and+heart+rate+variability+in+early+pregnancy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Blood pressure and heart rate variability in early pregnancy in rats.</a> Am J Physiol. 273 (4), 1794-1799 (1997).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>24-h repetindo a</td><td></td> sutura de nylon <td>de Panasonic</td> WH3311BP <td></td></tr><tr><td>5-0</td><td>Natsume Seisakusho</td> <td>Co-23s-N2</td><td></td></tr><tr><td>Caixa da anestesia</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>KN-1010</td><td>W110&times; D110&vezes; H110mm</td></tr><tr><td>Máscara de anestesia</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>KN-1019-1</td><td></td></tr><tr><td>Máquina anestésica</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>KN-1071-E</td><td></td></tr><tr><td>C57BL6 / J camundongos</td><td>Clea Japan, Inc</td><td></td><td>Mouse de gravidez em 14 dias</td></tr><tr><td>Clip light</td><td>Yazawa corporation</td><td>CLX60X02WH</td><td></td></tr><tr><td>Configurator System</td><td>Adinstuments</td><td>TR190</td><td></td></tr><tr><td>gravador de acionamento</td><td>Transcend</td><td>TS-DP250A-32G</td><td></td></tr><tr><td>Suporte para alimentos</td><td>Clea Japan, Inc</td><td>CL-2802</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>FujiFilM</td><td>099-06571</td><td></td></tr><tr><td>LabChart Pro V8</td><td>Adinstuments</td><td>MLU260/8</td><td></td></tr><tr><td>LabChart8</td><td>Adinstuments</td><td>MLS060/8</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Biopotential Telemeter</td><td>Adinstuments</td><td>MT10B</td><td></td></tr><tr><td>Agulha 18 G 1 1/2</td><td>Terumo</td><td>NN-1838R</td><td></td></tr><tr><td>Aquecedor de painel</td><td>SANKO</td><td>4976285145407</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab 4/26</td><td>Adinstuments</td><td>PL2604</td><td></td></tr><tr><td>Mouse de computador gravável</td><td>Mouse de computador</td><td>K7-H</td><td></td></tr><tr><td>lâmpada vermelha</td><td>ELPA</td><td>LDG1R-G-GWP254</td><td></td></tr><tr><td>Máscara de borracha</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>Cartão SD KN-1019-M</td><td></td></tr><tr><td>(256GB)</td><td>Transcend</td><td>TS256GUSD350V</td><td>Pode gravar aproximadamente 24 h</td></tr><tr><td>Agulha de sutura 13 mm</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>C-24-540-NO.0</td><td></td></tr><tr><td>Agulha de sutura 7 mm</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>C-24-540-NO.0000</td><td></td></tr><tr><td>tBase</td><td>Adinstuments</td><td>MT110</td><td></td></tr></tbody></table>

análise de eletrocardiogramas e comportamento em camundongos da gravidez ao período de lactação

Analysis of Electrocardiograms and Behavior in Mice from Pregnancy to Lactation Period

Depois de implantar o telémetro na rata grávida, registramos os ECGs da gravidez à lactação em uma gaiola doméstica. A taxa de amostragem foi definida para 1 k/s. Para comparar o ECG de cada estado fisiológico da mãe camundongo, evitando a influência do ritmo circadiano, foram analisados os dados de 10 minutos de 23:32 a 23:42 no GD 17, parto, PD 0 e PD 21 do arquivo de dados de 2 h (Figura 3, Tabela 1). O horário das 23:32 às 23:42 foi escolhido por representar os 10 minutos antes do nascimento do primeiro filhote durante o parto. Este período de tempo específico foi selecionado para demonstrar a viabilidade de realizar a análise dos dados durante o parto, quando as contrações musculares estavam presentes. Durante todas as fases de análise, o camundongo exibiu comportamentos gerais (beber, cavar, comer, se limpar) e comportamentos maternos (construir ninhos, lamber / limpar), conforme observado em 6 dos 16 etogramas listados na Tabela 2.
Os ECGs da mãe foram registrados sem interferência no GD17 quando o feto estava dentro do corpo (Figura 3A) e durante o parto quando ocorreram alterações físicas, como contrações musculares (Figura 3B). Além disso, os ECGs foram registrados de forma estável desde o nascimento do filhote (PD 0) até o DP 21 (Figura 3C,D), apesar de vários comportamentos de amamentação. A análise do ECG mostrou que a freqüência cardíaca diminuiu gradualmente, enquanto o intervalo RR aumentou gradualmente do GD 17 para o PD 21 (Tabela 1). A análise da VFC mostrou que a relação LF/HF aumentou acentuadamente de PD 0 para PD 21 (Tabela 1).
Os etogramas dos comportamentos maternos e gerais registrados juntamente com o ECG foram subdivididos, conforme apresentado na Tabela 2. Também confirmamos que os ECGs podem ser medidos sem distúrbios da forma de onda quando as mães exibiram qualquer comportamento definido na Tabela 2, como alimentação (Figura 4A, C) e agachamento (Figura 4B, D).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig01.jpg"> 
Figura 1: Telemetria implantada no 14º dia de gestação em camundongo. (A) Dois cabos foram conectados a um telémetro. O preto representa chumbo negativo e o branco representa chumbo positivo. (B) Os fios negativo e positivo foram agrupados e colocados no pescoço. O telémetro foi colocado no lado ventral. (C) O chumbo foi removido do pescoço e o SCM foi exposto. (D) A telemetria foi posicionada no lado ventral. O SCM é representado em rosa. A clavícula e o processo xifóide são representados em cinza. A linha preta indica o chumbo negativo. A linha laranja indica o avanço positivo. A linha azul representa a posição da sutura. (E) O chumbo negativo foi conectado ao SCM. O eletrodo positivo foi conectado ao redor do músculo xifóide. (F) Todas as incisões (representadas pelo círculo vermelho) foram fechadas com sutura de 20 cm. (G) Configuração de captura de vídeo usando um gravador de unidade. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig02.jpg"> 
Figura 2: ECG registrado usando o software de análise de dados. (A) O ECG foi registrado por 3 s. (B) ECG para cada batimento cardíaco. (C) Linhas tracejadas vermelhas indicam áreas onde o ECG não foi registrado. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig03.jpg"> 
Figura 3: ECG durante a gravidez, parto e lactação. Os resultados do ECG do mesmo mouse ao mesmo tempo. (A) ECG no GD 17. (B) ECG durante o parto. (C) ECG na PD 0. (D) ECG na DP 21. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig04.jpg"> 
Figura 4: Registro de ECG durante a observação comportamental. Os ECGs foram registrados durante a construção do etograma do mesmo camundongo no PD 6. (A) Imagem da mãe comendo alimentos sólidos. (B) Imagem da mãe agachada sobre seus filhotes. (C) O ECG da mãe enquanto ingere. (D) O ECG da mãe agachada sobre seus filhotes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Tabela 1: Análise da variabilidade da frequência cardíaca com base no ECG da gravidez à lactação. A análise da variabilidade da frequência cardíaca (VFC) foi realizada com base nos dados do ECG mostrados na Figura 3. Todas as análises foram mostradas para o mesmo camundongo e ao mesmo tempo (23:32-23:42). RR médio, a média dos intervalos de batimento; Taxa média, a taxa média da batida; SDSD, o desvio padrão da diferença entre intervalos de batimento sucessivos; RMSSD, raiz quadrada média das diferenças sucessivas do intervalo RR; pRR50, a porcentagem de diferenças de intervalo de batimento maior que a duração de uma fixação; Total, a potência contida em toda a faixa de frequência; VLF, frequência muito baixa; LF, baixa frequência; HF, alta frequência; SD1; desvio padrão ao longo do eixo menor da distribuição de Poincaré; SD2, desvio padrão ao longo do eixo maior da distribuição de Poincaré. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/Table_1_Heart_rate_variability_analysis_V2.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
Tabela 2: Etogramas definidos. Todos os etogramas foram definidos com base em parâmetros como postura, tempo gasto e local visitado. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/Table%202%20Defined%20ethograms%20V2.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>

Análise de Eletrocardiogramas e Comportamento em Camundongos da Gravidez ao Período de Lactação

Changes in the mother-offspring relationship are presumably accompanied by dynamic changes in the autonomic nervous system. Although temporal measurements ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

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