Name: Uma técnica modificada para induzir a síndrome dos ovários policísticos em camundongos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 49 s
Description: Aprenda uma técnica modificada para induzir síndrome dos ovários policísticos em camundongos usando mini-bombas de letrozol. Este método permite simular fisiologia da SOP e estudar mecanismos de doenças endócrinas.

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<meta charset="utf8"></head><body>Indução da síndrome dos ovários policísticos em camundongos por meio da liberação controlada de letrozol

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</ol>

<table><tbody><tr><td>Seringa</td><td>Bofeng Biotech</td><td>BD300841</td><td>1ML (estéril)</td></tr><tr><td>Tubo de centrifugação</td><td>Biological Hope</td><td>1850-K</td><td>15ML (estéril)</td></tr><tr><td>Pipeta</td><td>Eppendorf</td><td>3123000268-A</td><td>100&mu; L-1000&mu; L (estéril)</td></tr> <tr><td>Pipeta</td><td>TopPette</td><td>7010101008</td><td>10&mu; L-100&mu; L (estéril)</td></tr> <tr><td>Letrozole em pó</td><td>Sigma</td><td>L6545-50MG</td><td>Drogas de ação primária (estéril)</td></tr> <tr><td>PEG (Poli (etilenoglicol))</td> <td>Solarbio</td><td>P8250</td><td>Usado para dissolução (estéril)</td></tr> <tr><td>Solução salina fisiológica estéril</td><td>Biosharp</td><td>BL158A</td> Bombas osmóticas <td>de armazenamento de mini-bomba</td></tr><tr><td></td><td>ALZET</td><td>1004</td><td>Armazenamento de letrozol e liberação sustentada (estéril)</td></tr><tr><td>Dimetilsulfóxido Biosharp</td><td></td><td>BS087</td><td>Usado para dissolução (estéril)</td></tr> <tr><td>Máquina de anestesia para pequenos animais</td><td>RWD&nbsp;</td><td>R500IP</td><td>Usado para anestesia</td></tr><tr><td>Isoflurano&nbsp;</td><td>RWD</td><td>20071302</td><td>Usado para anestesia</td></tr><tr><td>Hemostáticos</td><td>Biosharp</td><td>BS-HF-S-125</td><td>Tesoura de instrumento cirúrgico</td></tr><tr><td></td><td>Biosharp</td><td>BS-SOR-S-100P</td><td>Instrumento cirúrgico</td></tr><tr><td>Porta-agulhas</td><td>ShangHaiJZ</td><td>J32010</td><td>Instrumento cirúrgico</td></tr><tr><td>Fórceps</td><td>RWD&nbsp;</td><td>F12028</td><td>Instrumento cirúrgico</td></tr><tr><td>Agulha e sutura absorvível 4-0</td><td>JINGHUAN</td><td>CR413</td><td>Instrumento cirúrgico</td></tr><tr><td>Cotonetes de iodopovidona</td><td>SingleLady</td><td>GB26368-2010</td><td>Desinfecção da pele</td></tr><tr><td>Creme depilatório</td><td>ZIKER BIOTECHNOLOGY</td><td>ZK-L2701&nbsp;</td><td>Agente de depilação para animais de laboratório</td></tr><tr><td>Luvas de nitrilo</td><td>Biosharp</td><td>BC040-L</td><td>Usado para operação asséptica</td></tr><tr><td>Gaze estéril</td><td>ZHENDE</td><td>BA69087</td><td>Usado para limpar líquidos</td></tr><tr><td>C57BL / 6J Ratos</td><td>Shanghai Model Organisms Center</td><td>N / A</td><td>Idade: 4 semanas</td></tr><tr><td>Lubrificante para olhos de animais de estimação</td><td>BAITE</td><td>SHF021153</td><td>Usado para lubrificante de olho de rato</td></tr><tr><td>Injeção de meloxicam</td><td>MEIDAJIA</td><td>R21064-21</td><td>Usado para analgesia de camundongo (estéril)</td></tr></tbody></table>

uma técnica modificada para induzir a síndrome dos ovários policísticos em camundongos

A Modified Technique for Inducing Polycystic Ovary Syndrome in Mice

O protocolo experimental e algumas etapas críticas são mostrados na Figura 1 e na Figura 2. Os níveis séricos de testosterona são exibidos na Figura 3A. Camundongos tratados com mini-bomba de letrozol (doravante denominados camundongos LTZ) exibiram níveis séricos de testosterona significativamente elevados em comparação com camundongos controle fêmeas. Enquanto isso, a análise histológica dos ovários mostrou que os camundongos LTZ apresentaram ovários policísticos com uma redução significativa no número de corpos lúteos (Figura 3B, C), indicando anovulação. Além disso, os camundongos LTZ exibiram aciclicidade estral significativa em comparação com os camundongos controle fêmeas (Figura 3D). A avaliação do peso corporal revelou que os camundongos LTZ eram mais pesados que os camundongos controle (Figura 3E). Os resultados dos testes de tolerância à glicose e os cálculos da AUC demonstraram que os camundongos LTZ desenvolveram intolerância à glicose em comparação com os camundongos controle (Figura 3F, G). O ensaio lipídico sérico indicou que os camundongos LTZ exibiram uma alteração no perfil lipídico sérico em comparação com os camundongos controle (Figura 3H).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66637/66637fig01.jpg"> Figura 1: Materiais e etapas críticas para a preparação da minibomba. (A) Ilustração esquemática mostrando a preparação de mini-bombas de letrozol. (B) A minibomba foi desbloqueada por um tubo fino preso à tampa. (C) Uma agulha correspondente à bomba foi conectada à extremidade da agulha de uma seringa de 1 mL. (D) A solução de letrozol foi aspirada lentamente sem borbulhar. (E) A solução de letrozol foi injetada lentamente a partir do fundo da bomba. (F) As bombas cheias foram tampadas e armazenadas em solução salina com a extremidade da tampa voltada para cima. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66637/66637fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66637/66637fig02.jpg"> Figura 2: Materiais e etapas críticas de implantação das bombas nos camundongos para indução da SOP. (A) Ilustração esquemática mostrando a implantação de minibombas de letrozol. (B) Equipamento de anestesia: bomba de ar, máquina de anestesia, caixa de indução e filtros de gás. (C) Os camundongos anestesiados foram fixados e esterilizados. (D) Um corte de 0,5 cm perto da linha média dorsal. (E) A pele foi liberada para dar espaço para a inserção da minibomba. (F) Uma mini-bomba foi retirada da solução salina com pinça limpa e estéril. (G) A minibomba foi implantada sob a pele previamente liberada. (H) A pele foi fechada com pontos 4-0. (I) O camundongo implantado foi autorizado a se recuperar. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66637/66637fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66637/66637fig03.jpg"> Figura 3: Caracterização dos fenótipos reprodutivos e metabólicos nos modelos de camundongos implantados com mini-bomba de letrozol. (A) Os níveis plasmáticos de testosterona nos camundongos tratados com LTZ foram significativamente maiores do que nos camundongos controle (n = 9 animais por grupo). (B) Análise histológica dos ovários. A seta indica corpos lúteos. Barra de escala: 1 mm. (C) Número de corpos lúteos nos grupos indicados (n = 9 animais por grupo). (D) Os camundongos LTZ mostraram aciclicidade em comparação com os camundongos fêmeas controle. (E) O peso corporal nos grupos indicados (n = 10 animais por grupo). (F, G) Resultados do teste de tolerância à glicose nos grupos indicados (n = 8 animais por grupo). (H) Níveis séricos de lipídios nos grupos indicados (n = 8 animais por grupo). Os dados são expressos como média ± SEM. A AUC indica a área sob a curva; E, estágio estral; LDL-C, colesterol de lipoproteína de baixa densidade; HDL-C, colesterol de lipoproteína de alta densidade; P, estágio de proestro; M/D, estágio de metaestro/diestro; CT, colesterol total; e TG, triglicerídeos. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66637/66637fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

Uma técnica modificada para induzir a síndrome dos ovários policísticos em camundongos

Polycystic ovary syndrome (PCOS) is one of the leading causes of infertility in women. Animal models are widely used to study the etiologic mechanisms of ...

a-modified-technique-for-inducing-polycystic-ovary-syndrome-in-mice

Research

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Medicina

Este artigo descreve uma maneira de preparar e inserir pastilhas de diidrotestosterona (DHT) para modelar a Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP) em camundongos. O protocolo de exemplo demonstra o procedimento em camundongos usado para estudos reprodutivos e metabólicos.

Tratamento subcutâneo de diidrotestosterona (DHT): modelo de camundongo da síndrome dos ovários policísticos (SOP)

Descrevemos o desenvolvimento de um modelo de mouse SOP, como magro com diidrotestosterona pelota para estudar a fisiopatologia da síndrome do ovário Policístico e a prole dessas barragens, como síndrome do ovário Policístico.

Um modelo de Mouse hiperandrogénicas para estudar a síndrome do ovário policístico

Muitos modelos de roedores de endometriose são limitados pela complexidade técnica, reprodutibilidade e/ou necessidade de animais imunocomprometidos ou ratos repórteres especiais. Apresentamos um sistema simplificado de indução de lesão utilizando qualquer camundongo experimental com um sistema de pontuação objetiva e independentemente verificável e sem necessidade de cirurgia de ovariectomia ou sobrevivência.

Um modelo de murina síndico de endometriose usando ratos naturalmente ciclistas

Este estudo descreve a medição direta da produção de glicose hepática em um modelo de rato com síndrome do ovário policístico usando um rastreador de glicose isotópico estável via veia da cauda em estados ricos em jejum e glicose em conjunto.

Avaliação da Produção de Glicose Hepática em um Modelo de Rato da Síndrome do Ovário Policístico

Aqui, descrevemos o método de geração de um modelo de decidualização artificial usando a rata ovariectomizada, um experimento clássico de decidualização endometrial no campo de pesquisa da decidualização endometrial.

Geração de um Modelo de Decidualização Artificial em Camundongos com Ovariectomia para Pesquisa em Decidualização Endometrial

O método de manipulação cervical apresentado pode induzir pseudogestantes em camundongos sem a necessidade de fêmeas reprodutoras com machos vasectomizados. A indução da pseudogravidez é necessária para o sucesso da transferência não cirúrgica de embriões e da inseminação artificial não cirúrgica, ambas também apresentadas.

Indução de pseudogravidez em camundongos fêmeas sem a necessidade de machos vasectomizados antes da transferência não cirúrgica de embriões ou inseminação artificial

O hormônio folículo-estimulante (FSH) em vários tecidos e órgãos extragonadais está associado à patogênese de múltiplas doenças. O modelo de camundongos ovariectomizados e tratados com FSH (OVF) pode ser usado para explorar as ações extragonadais do FSH.

Explorando os efeitos independentes do hormônio folículo-estimulante in vivo em um modelo de camundongo

O procedimento cirúrgico utilizado para induzir o enfarte do miocárdio experimental em ratos começa com toracotomia esquerda entre a terceira e quarta das nervuras, a fim de visualizar a superfície anterior do coração e do pulmão esquerdo. A artéria coronária esquerda é ligada, a caixa é fechada e o rato é deixado a recuperar-se espontaneamente.

Técnica modificada para ligação da artéria coronária em ratos

Cariotipagem espectral (SKY) é uma técnica avançada citogenética para identificar as aberrações cromossômicas e cromossômicas. Essa técnica leva vantagem das sondas cromossômicas de pintura, que permitem a classificação de todos os cromossomos. SKY também pode identificar aberrações cromossômicas e defeitos complexos de segregação em camundongos e humanos, com várias doenças, incluindo doença renal policística.

Cariotipagem espectral para o Estudo de Anomalias cromossômicas em humanos e camundongos com doença renal policística

Este vídeo mostra dois modelos de desenvolvimento íntima placas nas artérias murino e enfatiza as diferenças de hiperplasia miointimal e aterosclerose.

Induzir miointimais Hiperplasia Versus aterosclerose em camundongos: uma introdução de dois modelos válidos

Aprenda uma técnica modificada para induzir síndrome dos ovários policísticos em camundongos usando mini-bombas de letrozol. Este método permite simular fisiologia da SOP e estudar mecanismos de doenças endócrinas.

Uma técnica modificada para induzir a síndrome dos ovários policísticos em camundongos

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