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Isolamento, expansão e diferenciação de progenitores fibroadipogênicos do modelo de camundongo es...
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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Fibro-Adipogenic Progenitor Isolation, Expansion, and Differentiation from the Spiny Mouse Model

Isolamento, expansão e diferenciação de progenitores fibroadipogênicos do modelo de camundongo espinhoso

Full Text
3,335 Views
07:00 min
November 15, 2024

DOI: 10.3791/66717-v

Bruce Lin1, Hesham Soliman1,2, Fabio M. V. Rossi1, Marine Theret1

1School of Biomedical Engineering and Department of Medical Genetics,University of British Columbia, 2Aspect Biosystems

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo descreve o isolamento de progenitores fibroadipogênicos (FAPs) do músculo esquelético e cardíaco de camundongos espinhosos (Acomys) por meio de dissociação enzimática e classificação de células ativadas por fluorescência. As FAPs obtidas a partir deste protocolo podem ser efetivamente expandidas e diferenciadas para miofibroblastos e adipócitos.

Nossa visão abrangente é entender e compreender melhor a comunicação celular e o comportamento celular que levam à metástase tecidual e como os processos celulares são desregulados no reparo alimentar. Para isso, estamos usando vários modelos, dos quais um é o mouse espinhoso. Um dos principais problemas com esse novo modelo de mouse é a falta de ferramentas para estudá-lo.

Aqui, fornecemos um novo protocolo, que contém digestão enzimática confiável e coloração de anticorpos. Permitindo-nos classificar com sucesso os progenitores fibroadipogênicos e cultivá-los in vitro para uma análise mais aprofundada de seu destino. Testamos várias combinações e concentrações de enzimas, bem como vários anticorpos, e nosso método fornece referências para o protocolo mais confiável e robusto.

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