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JoVE Journal Neuroscience
Isolation of Hypothalamic Microglia from Freshly Perfused Adult Mouse Brain by Magnetic-Activated Cell Sorting

Isolamento da microglia hipotalâmica do cérebro de camundongo adulto recém-perfundido por classificação de células ativadas por magnetismo

Full Text
1,565 Views
05:53 min
September 6, 2024

DOI: 10.3791/66769-v

Evangelia Kyriakidou*1, Giulia Cutugno*1, Camille Allard1, Agnes Nadjar1

1University of Bordeaux, INSERM, Neurocentre Magendie

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Descrevemos um protocolo para isolar células microgliais do hipotálamo de camundongo (ou pequenas estruturas cerebrais equivalentes) usando classificação de células ativadas magneticamente (MACS), em um tempo relativamente curto. A microglia hipotalâmica classificada por MACS pode ser usada para análise ex vivo e pode ser plaqueada para realizar ensaios in vitro .

Nosso objetivo é explorar como a nutrição afeta a função cerebral, com ênfase na interação entre a microglia e os neurônios. E nos concentramos especificamente no hipotálamo, que é uma estrutura fundamental no controle do comportamento alimentar e do equilíbrio energético. A maioria dos estudos utiliza camundongos gênicos para direcionar especificamente os processos microgliais e, em seguida, combinar essa abordagem com observações histológicas ou metabólicas, mas em todo o nível estrutural, mas ainda teremos que atingir a resolução no nível celular.

Isolar a microglia de pequenas estruturas cerebrais é muito desafiador, e nosso protocolo garante um alto rendimento e pureza de células valiosas, o que permite o estudo do efeito da dieta no metabolismo e na função microglial. Nosso protocolo nos permite alcançar pureza e rendimento relativamente altos em um curto período de tempo e com muitas células viáveis, mesmo para pequenas estruturas como o hipotálamo. Nossa pesquisa explora o papel da comunicação dos neurônios da microglia na resiliência ou vulnerabilidade para desenvolver condições metabólicas, e sabemos que os indivíduos são extremamente diversos na maneira como respondem à dieta.

E nossos dados sugerem que a microglia pode desempenhar um papel nessa diversidade.

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