Name: Técnica menos invasiva para fratura mandibular não estabilizada em modelos de camundongos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-27T13:25:00.000+00:00
Duration: 4 min 13 s
Description: Aprenda uma técnica menos invasiva para fratura mandibular não estabilizada em camundongos, minimizando perda óssea e lesão tecidual. Este método permite analisar detalhadamente o processo de reparo ósseo endocondral mandibular.

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<meta charset="utf8"></head><body>Protocolo padronizado de fratura mandibular para reparo ósseo em camundongos

<ol><li>Thompson, Z., Miclau, T., Hu, D., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+intramembranous+ossification+during+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ortho+Res%22%5BJournal%5D)">A model for intramembranous ossification during fracture healing.</a> J Ortho Res. 20 (5), 1091-1098 (2002).</li>
<li>Bahney, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+biology+of+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ortho+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular biology of fracture healing.</a> J Ortho Res. 37 (1), 35-50 (2019).</li>
<li>Yu, Y. Y., Lieu, S., Hu, D., Miclau, T., Colnot, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Site+specific+effects+of+zoledronic+acid+during+tibial+and+mandibular+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Site specific effects of zoledronic acid during tibial and mandibular fracture repair.</a> PLoS One. 7 (2), e31771(2012).</li>
<li>Landry, P. S., Marino, A. A., Sadasivan, K. K., Albright, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+soft-tissue+trauma+on+the+early+periosteal+response+of+bone+to+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">Effect of soft-tissue trauma on the early periosteal response of bone to injury.</a> J Trauma. 48 (3), 479-483 (2000).</li>
<li>Colnot, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+cell+fate+decisions+within+periosteum+and+bone+marrow+during+bone+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Miner+Res%22%5BJournal%5D)">Skeletal cell fate decisions within periosteum and bone marrow during bone regeneration.</a> J Bone Miner Res. 24 (2), 274-282 (2009).</li>
<li>Julien, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+contribution+of+skeletal+muscle+mesenchymal+progenitors+to+bone+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Direct contribution of skeletal muscle mesenchymal progenitors to bone repair.</a> Nat Commun. 12 (1), 2860(2021).</li>
<li>McGuire, C., Boudreau, C., Prabhu, N., Hong, P., Bezuhly, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Piezosurgery+versus+conventional+cutting+techniques+in+craniofacial+surgery%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Piezosurgery versus conventional cutting techniques in craniofacial surgery: A systematic review and meta-analysis.</a> Plast Reconstr Surg. 149 (1), 183-195 (2022).</li>
<li>Wong, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrocyte-to-osteoblast+transformation+in+mandibular+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Chondrocyte-to-osteoblast transformation in mandibular fracture repair.</a> J Orthop Res. 39 (8), 1622-1632 (2021).</li>
<li>Vercellotti, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technological+characteristics+and+clinical+indications+of+piezoelectric+bone+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Stomatol%22%5BJournal%5D)">Technological characteristics and clinical indications of piezoelectric bone surgery.</a> Minerva Stomatol. 53, 207-214 (2004).</li>
<li>Wong, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrocyte-to-osteoblast+transformation+in+mandibular+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Chondrocyte-to-osteoblast transformation in mandibular fracture repair.</a> J Orthop Res. 39 (8), 1622-1632 (2021).</li>
<li>Tian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1%CE%B1+regulates+osteoclast+activation+and+mediates+osteogenesis+during+mandibular+bone+repair+via+CT-1%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Dis%22%5BJournal%5D)">HIF-1α regulates osteoclast activation and mediates osteogenesis during mandibular bone repair via CT-1.</a> Oral Dis. 28 (2), 428-441 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Buprenorfina : Buprecare 0.3 mg/kg</td><td>Elevador de Cuidados</td><td></td><td></td></tr><tr><td>com Animais OBWEGESER largura 6mm Comprimento 17,5cm&nbsp;</td>Pinça <td>Collin Medical</td><td>HA 5905</td><td></td></tr>: <tr><td>Placa de Almofada MORIA 11 cm N&deg; 5</td><td>MORIA</td><td>9906</td><td></td></tr><tr><td>Mesa de aquecimento Bioseblab 55 cm x 33 cm</td><td>Porta-agulhas Bioseblab</td><td>707</td><td></td></tr><tr><td>: Porta-agulhas Micro Halsey - Metal&nbsp;</td><td>LABODERM</td><td>21.100</td><td></td></tr><tr><td>Neo Transparente&nbsp;</td><td>Merck Millipore, Darmstadt, Alemanha</td><td>109843&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de Gel Ocry 10 g (lubrificante para os olhos)</td><td>tvm lab&nbsp; &nbsp;</td><td>3.70045E+12</td><td></td></tr><tr><td>Piezotome 2 ASS FINAL</td><td>ACTEON</td><td>X57402</td><td></td></tr><tr><td>Inserção de piezotomo Piezocision PZ3</td><td>ACTEON</td><td>F87574</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura micro&nbsp;</td><td>MORIA</td><td>MC52</td><td></td></tr><tr><td>Suturas de seda PERMA HAND SEIDE&nbsp; / MERSILK</td><td>ETHICON</td><td>REF 18501G&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura reta</td><td>MORIA</td><td>4877A</td><td></td></tr><tr><td>Vetflurano (isoflurano) 250 ml</td><td>VIRBAC</td><td>VET066 (Centravet)</td><td></td></tr></tbody></table>

técnica menos invasiva para fratura mandibular não estabilizada em modelos de camundongos

Less-Invasive Technique for Non-stabilized Mandibular Fracture in Mouse Models

Quanto aos procedimentos cirúrgicos in vivo , para realizar de forma otimizada este procedimento de fratura mandibular não estabilizada em um modelo de camundongo, são necessários aprendizado e treinamento específicos.
Esta técnica de fratura mandibular não estabilizada permite o estudo do processo de reparo ósseo endocondral. Após a eutanásia, amostras mandibulares foram coletadas em paraformaldeído a 4% (24 h). Após descalcificação total com EDTA pH 8, os cortes foram incluídos em parafina. Cortes seriados sagitais foram realizados, desparafinados em solução de desparafinização e, em seguida, reidratados antes da coloração Sirus Red/Alcian Blue, usando protocolos padrão. As imagens histológicas confirmaram a formação de um calo mole com um molde cartilaginoso (Figura 5). A cicatrização óssea é concluída 4 semanas após a fratura, conforme mostrado por análises de microtomografia computadorizada. Sugerimos estudar o processo de reparo ósseo em diferentes pontos-chave, desde o início da formação do calo (por exemplo, a cada 7 dias (dia 7, 14, 21) ou mais, dependendo do objetivo do estudo) até o final da cicatrização óssea (ou seja, dia 28), com análises histomorfológicas e morfométricas de micro-TC.
Com base em uma análise retrospectiva deste procedimento realizada em 58 camundongos do tipo selvagem (fundo C57BL / 6J), a taxa de sucesso do protocolo é de 86,3% e uma taxa de exclusão de 13,7%. A exclusão foi devido à morte espontânea prematura no pós-operatório imediato (3%), à decisão de eutanásia para camundongos com escore crítico (1%; escore &gt; 3 e/ou em caso de perda de peso &gt; 20%), ou em caso de posição anormal da osteotomia, com divisão anormal do ângulo mandibular (5%), ou quando a fratura foi no nível molar (n=1/58). Infecção foi observada neste último caso, com a divisão anormal da fratura ao nível molar (n= 1/58; Tabela 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig01.jpg"> 
Figura 1: Imagem da abordagem cutânea submandibular do ramo ascendente inferior. A borda inferior da mandíbula é fraturada com inserção de piezótomo, permitindo perda óssea mínima (seta). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig02.jpg"> 
Figura 2: Coloração da mandíbula de camundongo. Vista lateral de uma mandíbula de camundongo do tipo selvagem de 6 semanas de idade (corada com coloração vermelha de alizarina / azul alcian): 1. Côndilo, 2. Processo coronóide, 3. Incisura coronóide, 4. Processo angular, 5. Borda posterior do ramo, 6. Borda basilar (ou inferior) da mandíbula. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig03.jpg"> 
Figura 3: Raio-X do crânio do camundongo. Radiografias laterais do crânio de um camundongo selvagem de 6 semanas de idade (visão sagital) mostrando o aspecto da mandíbula de um camundongo não fraturado (esquerda) e o aspecto da mandíbula de um camundongo fraturado e a direção da fratura mandibular não estabilizada (setas), da borda inferior até a incisura coronoide, colocada anteriormente ao côndilo (direita). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig04.jpg"> 
Figura 4. Raio-X do crânio do rato em condições abaixo do ideal. Radiografias laterais do crânio de um camundongo selvagem de 6 semanas de idade (visão sagital) mostrando fratura anormal do ângulo mandibular (setas). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig05.jpg"> 
Figura 5: Resultados representativos. Resultados no dia 14 pós-fratura em um camundongo do tipo selvagem (C57BL / 6J). Vistas coronais 3D representativas de uma tomografia computadorizada μ reconstruída do local da fratura mandibular, mostrando o calo ósseo (setas brancas). Imagens representativas da cartilagem calosa (coloração Sirus Red/Alcian Blue) confirmando a presença de um processo de reparo ósseo endocondral. Abreviaturas: B = Osso, C = Cartilagem. Barra de escala: 200 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig05large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspecto animal</td>
			<td>Normal</td>
			<td>Redução do banheiro</td>
			<td>Cabelos despenteados, costas arqueadas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Comportamento</td>
			<td>Normal</td>
			<td>Hipomobilidade</td>
			<td>Hipomobilidade, redução da ingestão de alimentos, perda de peso &gt; 10%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sinais clínicos</td>
			<td>Normal</td>
			<td>Inflamação da cicatriz</td>
			<td>Cicatriz aberta, infecção</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1. Escala de pontuação de bem-estar pós-operatório. 
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>n = 58 ratos</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa de sucesso</td>
			<td>86.3 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa de exclusão :</td>
			<td>13.7 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Morte espontânea prematura</td>
			<td>3%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pontuação crítica &lt; 3 e/ou perda de peso &gt; 20%</td>
			<td>1%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fratura anormal dividida no ângulo mandibular</td>
			<td>5%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Divisão anormal da fratura, no nível molar</td>
			<td>1.7 %</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 2. Taxas de sucesso e exclusão do protocolo.

Técnica menos invasiva para fratura mandibular não estabilizada em modelos de camundongos

Non-stabilized fractures can be made at mandibular sites in mice, thus making it possible to analyze bone repair using an endochondral ossification mode. ...

less-invasive-technique-for-non-stabilized-mandibular-fracture-mouse

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Este artigo descreve um método para a estabilização de fracturas de ossos longos que é baseado na aplicação de fixadores externos modificados...

Criando Fraturas rigidamente estabilizadas para a Avaliação ossificação intramembranosa, Distração Osteogênica, ou Cura de defeitos críticos Sized

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