31 de maio de 2024
Este estudo apresenta o ensaio de migração bidimensional (2D) e o ensaio tridimensional (3D) de brotamento esferóide, juntamente com seus respectivos métodos de análise a jusante, incluindo extração de RNA e imunocitoquímica, como ensaios adequados para estudar a angiogênese in vitro.
A angiogênese é um processo característico envolvido na embriologia e no desenvolvimento de doenças, incluindo crescimento tumoral e doença ocular vasoproliferativa. Neste projeto, pretendemos apresentar uma estrutura abrangente de técnicas in vitro que podem ser usadas para estudar a angiogênese em nível molecular em um ambiente muito controlado e para rastrear possíveis opções terapêuticas. Traduzir in vitro para in vivo e, finalmente, para o ambiente clínico é um desafio devido ao risco de resultados falsos positivos ou falsos negativos.
Selecionar o ensaio de angiogênese correto é, portanto, crucial e conhecer suas limitações. Este estudo tem como objetivo oferecer diretrizes sobre como interpretar e estabelecer dois ensaios comuns de angiogênese. Recentemente, comparamos um ensaio de migração de ferida por arranhões 2D com um ensaio de brotamento de esferóides 3D.
Embora o ensaio 2D seja facilmente escalável, o ensaio 3D captura a angiogênese com mais detalhes, incluindo a formação de células do pedúnculo da ponta, a interação da matriz e o interruptor glicolítico. Esses dados oferecem aos cientistas diretrizes sobre qual ensaio escolher em seus projetos. Nosso laboratório continuará a caracterizar os principais aspectos dos ensaios in vitro apresentados, comparando-os diretamente com os ambientes in vivo, a fim de facilitar as traduções dos resultados in vitro para aplicações clínicas.
Este estudo apresenta um quadro abrangente de técnicas in vitro para estudar a angiogênese a nível molecular. Ele compara o ensaio de migração de feridas por raspagem em duas dimensões (2D) com o ensaio de brotamento esférico em três dimensões (3D).
Reliable in vitro angiogenesis models are essential for early-stage target validation and mechanistic de-risking in therapeutic discovery, especially for oncology and vascular disease portfolios. The scratch wound migration and spheroid sprouting assays provide scalable, quantitative platforms to interrogate endothelial cell behavior and molecular drivers under controlled conditions. These workflows enable robust screening and molecular analysis, supporting predictive confidence and translational continuity across discovery and preclinical inflection points.
These assays position within the discovery continuum from early hypothesis testing to preclinical model selection, enabling iterative target validation and mechanistic exploration.