Modelo de rato de remodelamento cardíaco do lado direito e arritmia usando bandagem da artéria pulmonar

Este projeto tem como objetivo provocar remodelamento cardíaco grave à direita para avaliar se o perfil inflamatório miocárdico induzido está associado à suscetibilidade a arritmias cardíacas. A flexão do trato da artéria pulmonar leva com sucesso à insuficiência cardíaca direita e alterações fisiológicas responsáveis pelo desenvolvimento de distúrbios do ritmo cardíaco, incluindo fibrilação atrial ou FA. A maioria dos modelos in vivo disponíveis de inflamação induzida envolve estado inflamatório sistêmico genético ou induzido por drogas. Ao contrário do conhecido modelo de cardiopatia do lado esquerdo por infarto do miocárdio ou constrição da aorta, faltava prova de conceito para estudar arritmias e inflamações especificamente localizadas no lado direito do coração.

Estudos clínicos e fundamentais recentes convergiram para designar a inflamação como um importante denominador comum da maioria dos fatores de risco para FA. Além disso, a fisiopatologia da FA na insuficiência cardíaca direita é pouco compreendida. Nossa abordagem ajuda a caracterizar o papel da inflamação no desenvolvimento de FA na insuficiência cardíaca direita Em comparação com a insuficiência cardíaca direita induzida experimentalmente por drogas, incluindo a abordagem monocrotalina, que leva à inflamação pulmonar, nossos métodos ajudaram a focar na inflamação associada à insuficiência cardíaca direita para estudar arritmias atriais e ventriculares.

Nossos achados ajudarão a entender e descrever melhor os mecanismos que orquestram a associação entre insuficiência cardíaca direita e a ativação da inflamação, levando à fibrilação atrial. Para começar, embote a ponta e dobre a agulha de calibre 19 em um ângulo de 90 a 110 graus usando uma pinça. Depois de anestesiar o rato, intube-o com um tubo endotraqueal.

Para iniciar uma toracotomia do lado esquerdo, usando uma pinça afiada, faça um pequeno orifício na linha hemiclavicular do músculo localizado entre a terceira e a quarta costelas e complete o orifício usando uma pinça com pontas embotadas. Introduza a pinça curva na abertura e deslize-a ao longo da parede interna esquerda do músculo entre as duas costelas para levantar levemente a parede torácica esquerda e evitar tocar nos pulmões ao cortar o músculo. Use a pinça introduzida como guia para fazer uma incisão longitudinalmente ao longo das costelas, aproximadamente um centímetro, com uma tesoura de íris.

Expanda a incisão intercostal para um a dois centímetros à esquerda do rato usando uma tesoura de ponta redonda. Reposicione seus afastadores sob as costelas para manter a ferida aberta. Observe a parte inferior do timo e uma porção do lobo esquerdo do pulmão.

Separe os lobos do timo usando dissecção romba com fórceps. Disseque a fina camada do pericárdio e o tecido adiposo aderido sem tocar na membrana pleural. Segure o pulmão do lado esquerdo usando gaze úmida.

Em seguida, exponha a porção superior do coração, o átrio esquerdo, o tronco pulmonar e o arco aórtico. Agora, insira a pinça curva em posição fechada no espaço entre o apêndice atrial esquerdo e o tronco pulmonar para alcançar o outro lado do vaso. Visualize a ponta da pinça através da membrana conjuntiva cranialmente ao tronco pulmonar.

Usando uma segunda pinça, disseque sobre a ponta e perfure cuidadosamente a membrana para criar uma pequena abertura. Ligeiramente aberta, a pinça curva posicionada sob o tronco pulmonar para agarrar um fio de seda 5 0. Retraia a pinça para trazer o fio de um lado para o outro do tronco pulmonar.

Em seguida, execute a constrição do tronco pulmonar praticando primeiro um nó duplo solto da seda 5 0 perto da artéria. Insira a agulha de calibre 19 ao longo do recipiente e sob a linha. Em seguida, aperte o primeiro nó e fixe-o com um segundo nó simples antes de remover a agulha de calibre 19.

Faça um nó final simples e corte o fio de seda 5 0 restante em torno de 0,5 a um centímetro do nó. Para fechar a caixa torácica, execute um padrão de ponto de cruz usando um fio de sutura sintético absorvível 5 0. Aplique algumas gotas de solução salina a 0,9% sobre a área da ferida.

Em seguida, comprima cada lado da parede torácica para remover as bolhas de ar e restabelecer a pressão negativa torácica. Reposicione os músculos peitorais e limpe o soro fisiológico restante com uma gaze estéril. Usando uma seringa, aplique um bloco de respingos de lidocaína na superfície e na área circundante da ferida.

Feche a pele usando um fio de sutura sintético absorvível 5 0 com uma agulha em um padrão subcuticular contínuo. Após remover a inalação de isoflurano, mantenha o rato sob ventilação mecânica com fluxo de oxigênio. Vire o rato para o lado direito ou posição ventral para facilitar a respiração.

Assim que o rato começar a se mover sozinho, transfira-o da almofada de aquecimento para uma nova gaiola estéril para recuperação. Durante o período pós-operatório, coloque a gaiola sobre uma almofada de aquecimento para manter a temperatura corporal e monitorar o rato. Após a cirurgia de PAB e o período de recuperação pós-operatória, colocar o rato anestesiado em um sistema de aquisição de imagens para ecocardiografia transtorácica.

Use o mapeamento de cores em uma visão bidimensional do eixo curto paraesternal posicionando a sonda 12S no nível da válvula aórtica. Clique no botão doppler colorido na máquina de eco para visualizar o padrão de fluxo sanguíneo cruzando a área da PAB no tronco pulmonar. Realize o doppler de onda contínua na visão bidimensional do eixo curto paraesternal para registrar as propriedades do fluxo sanguíneo que atravessa a área do PAB, incluindo a velocidade de pico e o gradiente de pressão média.

Aplique uma visão apical bidimensional de quatro câmaras posicionando a sonda 12S ao nível do ápice do coração. Demonstre o aumento do átrio direito, ou AR, e do ventrículo direito, ou VD, após a cirurgia e determine a dimensão horizontal da AR no final da sístole cardíaca. Aplique o mapeamento de cores em uma visão apical bidimensional de quatro câmaras para revelar a regurgitação tricúspide devido ao PAB, adquirindo loops de cinema na máquina de eco.

Para estudar a excursão sistólica do plano do anel tricúspide, realize a ecocardiografia em modo M na incidência apical de quatro câmaras, cruzando a conjunção do anel tricúspide e a parede lateral do VD. Use a imagem doppler tecidual na incidência apical de quatro câmaras no nível da conjunção do anel tricúspide e da parede lateral do VD para a medição da contratilidade sistólica da parede lateral do VD para avaliar o desempenho sistólico do VD. Registre o fluxo transtricúspide diastólico usando doppler de onda pulsada na visão apical de quatro câmaras para estudar a velocidade de pico na onda de enchimento inicial, onda de enchimento atrial e a razão da onda de enchimento precoce pela onda de enchimento atrial.

Realize a ecocardiografia em modo M na visão do eixo longo paraesternal ao nível da válvula aórtica. Meça a via de saída do VD no final da diástole cardíaca e a dimensão do átrio esquerdo no final da sístole cardíaca. Usando os seguintes conjuntos de limites de simulação, aplique uma rajada de tensão equivalente a quatro vezes a tensão limite para avaliar a vulnerabilidade da fibrilação atrial.

Identifique e quantifique a ocorrência de taquiritmias cardíacas, incluindo fibrilação atrial ou flutter atrial, após cada explosão. Em comparação com o grupo simulado, os ratos PAB exibiram velocidade de pico e gradiente médio da artéria pulmonar significativamente maiores, confirmando o aumento da pressão da artéria pulmonar. O aumento da espessura do VD e a dilatação da AR foram confirmados por meio de ecocardiografia e análise histológica pós-PAB.

A pressão sistólica do VD foi significativamente aumentada e a taxa de contratilidade do VD foi diminuída em ratos PAB em comparação com sham. A PAB induziu um aumento significativo no diâmetro do átrio direito, enquanto o diâmetro do átrio esquerdo permaneceu inalterado. Disfunção da valva tricúspide levando à regurgitação foi observada em ratos PAB, caracterizada por extravasamento de sangue para a AR durante a sístole.

O intervalo RR e a duração da onda P foram significativamente aumentados em ratos PAB em comparação com sham, indicando frequência cardíaca e condução atrial alteradas. O intervalo QT foi significativamente prolongado em ratos PAB, sugerindo contratilidade ventricular prejudicada. Os ratos PAB exibiram uma indutibilidade e duração significativamente maiores da fibrilação atrial em comparação com os ratos simulados.