Name: Extração de feromônios sexuais voláteis e ensaio de quimioatração em Caenorhabditis elegans (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-08-09T14:35:00.000+00:00
Duration: 6 min 49 s
Description: Aprenda a extrair feromônios sexuais voláteis e realizar ensaios de quimioatração em Caenorhabditis elegans. Este método reprodutível permite estudar mecanismos moleculares e neuronais da comunicação química em nematoides.

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<meta charset="utf8"></head><body>Extração e quantificação de respostas voláteis de feromônios sexuais em C. elegans

<table><tbody><tr><td>10 cm Petri dishes</td><td>Falcon</td><td>25373-100</td><td>Falcon bacteriological Petri dish 100 x 15 mm</td></tr><tr><td>6 cm Petri dishes</td><td>Falcon</td><td>25373-085</td><td>Falcon bacteriological Petri dish 60 x 15 mm</td></tr><tr><td>C. remanei (EM464)</td><td>CGC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Eppendorf</td><td>centrifuge 5418</td><td>&nbsp;Any brand should work.</td></tr><tr><td>Chemoattraction assay plates</td><td>Homemade solution</td><td>N/A</td><td>1.5% agar, 25 mM NaCl, 1.5 mM Tris-base, and 3.5 mM Tris-Cl</td></tr><tr><td>Cholesterol</td><td>Alfa Aesar</td><td>57-88-5</td><td></td></tr><tr><td>Dissecting Microscope</td><td>Leica</td><td>LeicaMZ75</td><td>&nbsp;Any brand should work.</td></tr><tr><td>E. Coli OP50</td><td>CGC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Koptec</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>fog-2(q71) (JK574)</td><td>CGC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>him-5(e1490)(CB4088)</td><td>CGC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Household bleach</td><td>Clorox Germicidal bleach concentrated</td><td></td><td>&nbsp;Bleach</td></tr><tr><td>M9 buffer</td><td>Homemade solution</td><td>N/A</td><td>3 g KH2PO4, 11.3 g Na2HPO4.7H2O, 5 g NaCl, H2O to 1 L. Sterilize by autoclaving. Add 1 mL 1 M MgSO4 after cool down to room temperature.</td></tr><tr><td>Magnesium Sulfate, Anhydrous, Powder</td><td>Macron</td><td>M1063-500GM-EA</td><td></td></tr><tr><td>Microwave</td><td>TOSHIBA</td><td>N/A</td><td>&nbsp;Any brand should work.</td></tr><tr><td>N2</td><td>CGC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Sigma-aldrich</td><td>S318-3</td><td>1 M</td></tr><tr><td>NGM plates solution</td><td>Homemade solution</td><td>N/A</td><td>2.5 g Peptone, 18 g agar, 3 g NaCl, H2O to 1 L.Sterilize by autoclaving. Once the autoclave is done (2 h), wait until the temperature of the medium drops to 65 &deg;C. Put on a hotplate at 65 &deg;C and stir. Then add the following, waiting 5 min between each to avoid crystallization: 1 mL CaCl2 (1 M), 1 mL MgSO4 (1 M), 25 mL K3PO4 (1 M, pH=6), 1 mL Cholesterol ( 5 mg/mL in ethanol).</td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Bemis</td><td>13-374-10</td><td>Bemis Parafilm M Laboratory Wrapping Film</td></tr><tr><td>Peptone</td><td>VWR</td><td>97063-324</td><td></td></tr><tr><td>Pipet- aid</td><td>Drummond Scientific&nbsp;</td><td>4-000-100</td><td>&nbsp;Any brand should work.</td></tr><tr><td>Plastic paper&nbsp;</td><td>Octago</td><td>Waterproof Screen Printing Inkjet Transparency Film</td><td>https://www.amazon.com/Octago-Waterproof-Transparency-Printing-Printers/dp/B08HJQWFGD</td></tr><tr><td>Potassium chloride</td><td>Sigma-aldrich</td><td>SLBP2366V</td><td></td></tr><tr><td>Potassium phosphate</td><td>Spectrum</td><td>7778-77-0</td><td></td></tr><tr><td>Pipette</td><td>Eppendorf</td><td>SKU: EPPR4331; MFG#: 2231300006</td><td>20 - 200 &micro;L, 100 - 1000 &micro;L, any brand should work.</td></tr><tr><td>Rotator</td><td>Labnet</td><td>SKU: LI-H5500</td><td>&nbsp;Labnet H5500 Mini LabRoller with Dual Direction Rotator. Any brand should work.</td></tr><tr><td>Sodium chloride</td><td>VWR</td><td>7647-14-5</td><td></td></tr><tr><td>sodium phosphate dibasic</td><td>Sigma-aldrich</td><td>SLCG3888</td><td></td></tr><tr><td>Tris-base</td><td>Sigma-aldrich</td><td>77-86-1</td><td></td></tr><tr><td>Tris-Cl&nbsp;</td><td>Roche</td><td>1185-53-1</td><td></td></tr><tr><td>Tryptone</td><td>VWR</td><td>97063-390</td><td></td></tr><tr><td>Vortex</td><td>Scientific industries</td><td>Vortex-Genie 2</td><td>&nbsp;Any brand should work.</td></tr><tr><td>WormLab system&nbsp;</td><td>MBF Bioscience</td><td>N/A</td><td>https://www.mbfbioscience.com/help/WormLab/Content/home.htm; https://www.mbfbioscience.com/products/wormlab/</td></tr><tr><td>Wormpicker</td><td>Homemade&nbsp;</td><td>N/A</td><td>made with platinum and glass pipet tips</td></tr></tbody></table>

extração de feromônios sexuais voláteis e ensaio de quimioatração em caenorhabditis elegans

Volatile Sex Pheromone Extraction and Chemoattraction Assay in Caenorhabditis elegans

Extração de feromônios sexuais voláteis e ensaio de quimioatração em Caenorhabditis elegans

Chemical communication is vital in organismal health, reproduction, and overall well-being. Understanding the molecular pathways, neural processes, and ...

volatile-sex-pheromone-extraction-chemoattraction-assay

Research

JoVE Journal

Behavior

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C. elegans Ensaio de quimiotaxia: um método para testar a quimiossensação em vermes

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C. elegans Chemotaxis Assay

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Usando um Chip olfativo Microfluidic adaptado para a imagem da atividade Neuronal em resposta aos Pheromones em neurônios de cabeça masculino C. Elegans

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Medindo a orientação e a motilidade do esperma dentro do intervalo reprodutivo hermafrodita dos elegans de Caenorhabditis

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Medição não invasiva contínua das atividades cardíaca e comportamental de lagostins

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Aprenda a extrair feromônios sexuais voláteis e realizar ensaios de quimioatração em Caenorhabditis elegans. Este método reprodutível permite estudar mecanismos moleculares e neuronais da comunicação química em nematoides.

Extração de feromônios sexuais voláteis e ensaio de quimioatração em Caenorhabditis elegans

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