Um modelo de estresse social integrado múltiplo para transtornos psiquiátricos em camundongos C57BL / 6J fêmeas

Esta pesquisa tem como objetivo entender como o estresse social crônico leva a sintomas psiquiátricos em camundongos fêmeas, estabelecendo um modelo de estresse social multiintegrado. A maioria dos modelos atualmente disponíveis para transtornos psiquiátricos foi estabelecida usando animais machos. Este protocolo apresenta um novo modelo de camundongo projetado para estudar esses distúrbios em camundongos fêmeas. Este estudo desenvolveu um modelo animal confiável que nos permite investigar os mecanismos neurofisiológicos subjacentes aos transtornos psiquiátricos em camundongos fêmeas.

[Narrador] Para começar, coloque um tubo de acrílico de 10 centímetros de comprimento e 26 milímetros de diâmetro interno em cada gaiola de camundongos fêmeas e candidatos a vencedores para permitir que eles se aclimatem e aprendam a passar por ele ao longo de três dias. Para treinar ratos para a competição de tubos, segure suavemente a cauda de cada rato e coloque-a sobre a mesa. Em seguida, segure o mouse pela cauda e coloque-o em uma extremidade do tubo. Solte a cauda assim que o mouse entrar no tubo e deixe-o passar voluntariamente. Agora, coloque o mouse na extremidade oposta do tubo e repita o mesmo procedimento. Depois de repetir todo o processo mais uma vez, retorne o mouse à sua gaiola inicial. Para a triagem do vencedor, prepare um tubo de acrílico de 30 centímetros de comprimento e 26 milímetros de diâmetro interno e desenhe uma linha intermediária visível no tubo. Segure os dois ratos candidatos a vencedores pela cauda e coloque-os em extremidades opostas do tubo. Permita que eles entrem e se encontrem no ponto médio e, em seguida, solte-os simultaneamente e inicie o cronômetro. Identifique o vencedor como o rato que empurra o outro para fora do tubo e atribua-lhe um ponto. Devolva os dois ratos para a gaiola de casa. Classifique os ratos com base em suas pontuações totais. Para triagem de agressor CD1, coloque um camundongo macho C57 diretamente na gaiola doméstica de um macho CD1 por três minutos. Registre a latência até o primeiro ataque, o número de ataques e a duração dos comportamentos agressivos dentro do período de três minutos como indicadores de agressividade e repita o procedimento de triagem por mais dois dias. Para o fracasso da competição social, coloque um mouse de estresse social integrado múltiplo ou MISS e um mouse vencedor em extremidades opostas do tubo, para que eles caminhem para frente e se encontrem no ponto médio. O mouse MISS será empurrado para fora do tubo pelo vencedor. Troque as posições dos dois mouses e repita a interação. Em seguida, devolva os camundongos MISS e vencedores para suas gaiolas domésticas. Para a modelagem de estresse de derrota social vicária modificada, coloque um camundongo MISS fêmea dentro da gaiola de um agressor CD1, confinado sob uma cobertura de acrílico perfurada para permitir a observação vicária de interações agressivas. Introduza um camundongo intruso C57 macho na gaiola para ser atacado fisicamente pelo camundongo CD1 por 10 minutos. Após 10 minutos, remova o intruso macho e permita que a fêmea MISS rata e mais cinco minutos de exposição sensorial ao camundongo CD1. Após cinco minutos, substitua o camundongo CD1 por um novo camundongo intruso C57 macho e repita todo o procedimento três vezes. Em seguida, retorne o mouse MISS para sua gaiola inicial. Em seguida, para modelar o estresse de superlotação inevitável, coloque uma manga opaca dentro de uma gaiola padrão contendo roupa de cama. Introduza 12 a 15 camundongos fêmeas, todos camundongos MISS ou misturados com outras fêmeas na manga por 30 minutos diários. Para isolamento social, alojar camundongos MISS individualmente quando não estiverem passando por falha na competição social, estresse de derrota vicária ou estresse de superlotação pelo restante do período de modelagem de 10 dias. O teste de preferência por sacarose, que avalia a anedonia medindo a preferência por uma solução doce em vez de água, mostrou que a preferência por sacarose foi significativamente menor em camundongos expostos a MISS em comparação com controles ingênuos. A ingestão total de líquidos no teste de preferência por sacarose, incluindo água e sacarose, não diferiu significativamente entre camundongos MISS e virgens, indicando que a preferência reduzida por sacarose não foi devido ao consumo alterado de líquidos. O teste de suspensão da cauda, que avalia o desespero comportamental medindo a imobilidade passiva, revelou que os camundongos expostos ao MISS tiveram tempos de imobilidade significativamente mais longos do que os camundongos ingênuos. Além disso, o teste de campo aberto usado para avaliar a ansiedade medindo o tempo gasto no centro de uma arena aberta mostrou que os camundongos expostos ao MISS passaram significativamente menos tempo na zona central em comparação com os camundongos ingênuos. O labirinto em cruz elevado, que mede a ansiedade evitando os braços abertos, mostrou que os camundongos expostos ao MISS passaram significativamente menos tempo nos braços abertos do que os controles ingênuos.