Name: Triagem in vitro baseada em LED para avaliação de moléculas fotoativáveis na inativação fotodinâmica bacteriana (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-24T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: Aprenda a triagem de fotossensibilizantes para inativação fotodinâmica bacteriana usando placas de 96 poços e painel LED. Este método econômico permite avaliar simultaneamente diferentes compostos flavylium contra Staphylococcus aureus.

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<ol><li>Correia, J. H., Rodrigues, J. A., Pimenta, S., Dong, T., Yang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+review%3A+principles%2C+photosensitizers%2C+applications%2C+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy review: principles, photosensitizers, applications, and future directions.</a> Pharmaceutics. 13 (9), 1332(2021).</li>
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<li>Lima, E., Reis, L. V., Silva, A. L. C., Carvalho, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy%3A+From+the+basics+to+the+current+progress+of+N-heterocyclic-bearing+dyes+as+effective+photosensitizers%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy: From the basics to the current progress of N-heterocyclic-bearing dyes as effective photosensitizers.</a> Molecules. 28 (13), 5103(2023).</li>
<li>Pérez-Laguna, V., Pérez-Artiaga, L., Royo-Díaz, D., Gilaberte, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+combination+of+photodynamic+therapy+and+antimicrobial+compounds+to+treat+skin+and+mucosal+infections%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Photochem+Photobiol+Sci%22%5BJournal%5D)">A combination of photodynamic therapy and antimicrobial compounds to treat skin and mucosal infections: A systematic review.</a> Photochem Photobiol Sci. 18 (5), 1020-1029 (2019).</li>
<li>Babilas, P., Karrer, S., Szeimies, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+in+dermatology%3A+state-of-the-art%5BTitle%5D)+AND+%22Photodermatol+Photoimmunol+Photomed%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy in dermatology: state-of-the-art.</a> Photodermatol Photoimmunol Photomed. 26 (3), 118-132 (2010).</li>
<li>Pérez-Laguna, V., Pérez-Artiaga, L., Gilaberte, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+combined+with+antibiotics+or+antifungals+against+microorganisms+that+cause+skin+and+soft+tissue+infections%3A+a+planktonic+and+biofilm+approach+to+overcome+resistances%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy combined with antibiotics or antifungals against microorganisms that cause skin and soft tissue infections: a planktonic and biofilm approach to overcome resistances.</a> Pharmaceutics. 14 (6), 1-16 (2021).</li>
<li>Almenara-Blasco, M., López-Roca, A., Pérez-Sanchez, A., Valiente, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+photodynamic+therapy+for+dermatological+infections%3A+current+insights+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Photobiol%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial photodynamic therapy for dermatological infections: current insights and future prospects.</a> Front Photobiol. 2, 773502(2024).</li>
<li>de Oliveira, A. B., Reis, C., Soares, M. T., Batista, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+for+treating+infected+skin+wounds%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis+from+randomized+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Photodiagnosis+Photodyn+Ther%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy for treating infected skin wounds: a systematic review and meta-analysis from randomized clinical trials.</a> Photodiagnosis Photodyn Ther. 40 (5), 103-118 (2022).</li>
<li>Correia, P., Oliveira, S. R., Batista, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-activated+amino-substituted+dyes+as+dual-action+antibacterial+agents%3A+bio-efficacy+and+AFM+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Dyes+Pigm%22%5BJournal%5D)">Light-activated amino-substituted dyes as dual-action antibacterial agents: bio-efficacy and AFM evaluation.</a> Dyes Pigm. 224, 111975(2024).</li>
<li>Oliveira, H., Santos, A. R., Costa, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoactivated+cell-killing+amino-based+flavylium+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Photoactivated cell-killing amino-based flavylium compounds.</a> Sci Rep. 11 (1), 22005(2021).</li>
<li>Sharma, S., Singh, V., Kaur, S., Mehta, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+biofilm%3A+A+review+on+formation%2C+infection%2C+antibiotic+resistance%2C+control+measures%2C+and+innovative+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Microbial biofilm: A review on formation, infection, antibiotic resistance, control measures, and innovative treatment.</a> Microorganisms. 11 (6), 1614(2023).</li>
<li>Barolet, D., Christiaens, F., Misery, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-emitting+diodes+%28LEDs%29+in+dermatology%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cutan+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">Light-emitting diodes (LEDs) in dermatology.</a> Semin Cutan Med Surg. 27 (3), 227-238 (2009).</li>
<li>Algorri, J. F., López-Higuera, J. M., Rodríguez-Cobo, L., Cobo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+light+source+technologies+for+photodynamic+therapy+of+skin+cancer+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Advanced light source technologies for photodynamic therapy of skin cancer lesions.</a> Pharmaceutics. 15 (7), 2075(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Espectrofotômetro Cary 60 UV-Vis</td><td>Agilent</td><td>G6860A</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil Sulfóxido</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>Cuvetes descartáveis PMMA</td><td>BRAND GMBH + CO KG</td><td>759030</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorfs (500 mL)</td><td>Fisher Scientific</td><td>15625367</td><td></td></tr><tr><td>Tubos Falcon (15 mL)</td><td>Tubos Corning</td><td>430791</td><td></td></tr><tr><td>Falcon ( 50 mL)</td><td>Corning</td><td>430291</td><td></td></tr><tr><td>Painel LED IP65 50W</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micropippete (100 uL)</td><td>Transferpette S</td><td>705874</td><td></td></tr><tr><td>Micropippete (1000 uL)</td><td>Transferpette S</td><td>705880</td><td></td></tr><tr><td>Mueller Hinton agar&nbsp;</td><td>Oxoid</td><td>CM0405</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta multicanal</td><td>Transferpette</td> de 12 canais S <td></td><td></td></tr><tr><td>Nunc MicroWell MicroWell Microplacas de 96 poços</td><td>Thermo Scientific</td><td>260844</td><td></td></tr><tr><td>Phospate Comprimidos salinos tamponados pH 7.4</td><td>Panreac Applichem</td><td>A9177</td><td></td></tr><tr><td>Pipetas sorológicas (10 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>170356N</td><td></td></tr><tr><td>Pipetas sorológicas (5 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>170366N</td><td></td></tr><tr><td>Prato de Cultura de Tecidos</td><td>TPP Techno Plastic Products AG</td><td>93150</td><td></td></tr></tbody></table>

triagem in vitro baseada em led para avaliação de moléculas fotoativáveis na inativação fotodinâmica bacteriana

LED-Based In Vitro Screening for Assessing Photoactivable Molecules in Bacterial Photodynamic Inactivation

Compostos flavílicos à base de aminoácidos (Figura 2): 7-dietilamino-4′-dimetilaminoflavílio (7NEt24′NMe2), 7-dietilamino-2-(dimetilaminoestiril)-1-benzopirílio (7NEt2st4′NMe2), 7-dietilamino-4′-aminoflavilium (7NEt24′NH2) e 7-dietilamino-4′-hidroxiflavílio (7NEt24′OH), cuja natureza responsiva à luz foi discutida anteriormente12,13, foram incubados com ...

Triagem in vitro baseada em LED para avaliação de moléculas fotoativáveis na inativação fotodinâmica bacteriana

The rise of multi-drug-resistant infections and the lack of new antibiotic classes have renewed interest in alternative therapies like photodynamic ...

led-based-vitro-screening-for-assessing-photoactivable-molecules

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Fonte: Cheng, C., et al. Inativação de patógenos via fotólise de luz visível de riboflavina-5'-fosfato. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra um método para avaliar os efeitos fototóxicos do mononucleotídeo de flavina (FMN) em bactérias patogênicas. As culturas bacterianas são expostas a concentrações crescentes de FMN e iluminadas com luz visível para gerar espécies reativas de oxigênio (ROS) que danificam os componentes celulares. As bactérias sobreviventes são então quantificadas para...

Inativação de bactérias usando mononucleotídeo de flavina ativado por luz

Fonte: Cheng, C., et al. Inativação de patógenos via fotólise de luz visível de riboflavina-5'-fosfato. J. Vis. Exp. (2022).Neste vídeo, uma mistura de reação tamponada contendo L-metionina, nitro azul de tetrazólio (NBT) e mononucleotídeo de flavina (FMN) é irradiada com luz violeta para induzir a produção de espécies reativas de oxigênio (ROS). Isso leva à inativação bacteriana e à formação de formazan detectável espectrometricamente.

Quantificação da inativação bacteriana induzida por luz através da geração de espécies reativas de oxigênio

Fonte: Zhao, K., et al. Um modelo In Vitro para Estudar o Efeito da Terapia Fotodinâmica Mediada por Ácido 5-Aminolevulínico no Biofilme de Staphylococcus aureus . J. Vis. Exp. (2018)O vídeo demonstra um protocolo de terapia fotodinâmica para avaliar os efeitos antibacterianos em biofilmes bacterianos Gram-positivos. Os biofilmes são divididos em quatro grupos: dois recebem um precursor fotosensimizador e dois recebem um tampão. Todos são incubados no escuro, seguidos por exposição à luz...

Tratamento ativado pela luz de biofilmes bacterianos usando um precursor fotosensimizador

As infecções causadas por cepas bacterianas multirresistentes (MDR) surgiram como uma séria ameaça à saúde pública, necessitando do desenvolvimento de terapias alternativas. Apresentamos um protocolo para avaliar a eficácia da terapia antimicrobiana com luz azul (aBL) para infecções por Acinetobacter baumannii MDR em queimaduras de camundongos usando imagens de bioluminescência.

In Vivo Investigation of Antimicrobial Therapy luz azul para-multirresistente Acinetobacter baumannii queimadura Infecções Usando bioluminescência Imagiologia

Este manuscrito descreve um protocolo para estudar o efeito antimicrobiano da terapia fotodinâmica 5-aminolevulínico mediada por ácido (ALA-PDT) sobre um biofilme de Staphylococcus aureus . Este protocolo pode ser usado para desenvolver um modelo in vitro para estudar o tratamento de biofilmes bacterianos com PDT no futuro.

Um modelo In Vitro para estudar o efeito da terapia fotodinâmica 5 ácido aminolevulínico-mediada no biofilme de Staphylococcus aureus

A terapia fotodinâmica (PDT) é um procedimento médico que envolve a incubação de uma forma exógena aplicada fotossensibilizador (PS) seguido de fotoativação de luz visível para induzir apoptose. Apresentamos um protocolo em vitro PDT projetado para simular o PDT que pode ser usado para estudar as diferenças em incubação de PS e parâmetros de tratamento com luz.

Uma abordagem In Vitro para terapia fotodinâmica

Aqui, apresentamos um protocolo para inativar bactérias patogênicas com espécies reativas de oxigênio produzidas durante a fotólise do mononucleotídeo de flavina (FMN) sob irradiação de luz azul e violeta de baixa intensidade. A fotólise FMN demonstra ser um método simples e seguro para processos sanitários.

Inativação de Patógenos via Fotólise de Luz Visível de Riboflavina-5′-Fosfato

A crescente incidência de albicanos candida resistentes a medicamentos é um sério problema de saúde em todo o mundo. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) pode oferecer uma estratégia para combater infecções fúngicas resistentes a medicamentos. O presente protocolo descreve a eficácia da APDT mediada por Rose bengala em uma cepa c. albicans resistente a multidrogas in vitro.

Terapia fotodinâmica mediada por Rose Bengala para inibir a candida albicans

Aqui, descrevemos um dispositivo novo, simples e de baixo custo para realizar com sucesso ensaios de terapia fotodinâmica in vitro (TFD) usando cultura de células HeLa bidimensionais e verteporfina como fotossensibilizador.

Um dispositivo de terapia fotodinâmica interno construído internamente e baseado em diodo emissor de luz para melhorar a citotoxicidade da verteporfina em um modelo de cultura de células 2D

Este protocolo apresenta um conjunto de experimentos adotados para a avaliação de peptídeos anticâncer fotocomutáveis, que podem ser utilizados na triagem pré-clínica destes compostos. Isso inclui a avaliação da citotoxicidade em culturas de células 2D e 3D, a avaliação da eficiência de fotoisomerização ex vivo (tecido modelo) e a eficácia in vivo .

Avaliação in vitro e in vivo de compostos biologicamente ativos fotocontrolados - potenciais candidatos a fármacos para a fotofarmacologia do câncer

Este manuscrito apresenta um novo e inovador dispositivo de iluminação impresso em 3D para estudar a terapia fotodinâmica mediada por Rosa Bengala in vitro.

Desenvolvimento de um Dispositivo Inovador de Iluminação Baseado em LED para Aplicação In Vitro de Terapia Fotodinâmica com Rosa Bengala

Aprenda a triagem de fotossensibilizantes para inativação fotodinâmica bacteriana usando placas de 96 poços e painel LED. Este método econômico permite avaliar simultaneamente diferentes compostos flavylium contra Staphylococcus aureus.

Triagem in vitro baseada em LED para avaliação de moléculas fotoativáveis na inativação fotodinâmica bacteriana

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