Name: Uma estrutura de imagem multimodal para avançar a fenotipagem de células vivas de câncer de mama sem rótulos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-22T12:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 37 s
Description: Aprenda a realizar fenotipagem morfoquímica sem rótulos de células de câncer de mama usando microespectroscopia Raman confocal e microscopia de fase tomográfica. Esta abordagem não invasiva fornece análises bioquímicas e morfológicas detalhadas.

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<ol><li>Gosnell, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+non-invasive+cell+characterisation+and+discrimination+based+on+multispectral+autofluorescence+features%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Quantitative non-invasive cell characterisation and discrimination based on multispectral autofluorescence features.</a> Sci Rep. 6 (1), 23453(2016).</li>
<li>Bresci, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+morpho-molecular+phenotyping+of+living+cancer+cells+by+combined+Raman+spectroscopy+and+phase+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Label-free morpho-molecular phenotyping of living cancer cells by combined Raman spectroscopy and phase tomography.</a> Commun Biol. 7 (1), 1-13 (2024).</li>
<li>Rocha, R. A., Fox, J. M., Genever, P. G., Hancock, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomolecular+phenotyping+and+heterogeneity+assessment+of+mesenchymal+stromal+cells+using+label-free+Raman+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Biomolecular phenotyping and heterogeneity assessment of mesenchymal stromal cells using label-free Raman spectroscopy.</a> Sci Rep. 11 (1), 4385(2021).</li>
<li>Vicar, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+segmentation+methods+for+label-free+contrast+microscopy%3A+review+and+comprehensive+comparison%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Bioinform%22%5BJournal%5D)">Cell segmentation methods for label-free contrast microscopy: review and comprehensive comparison.</a> BMC Bioinform. 20 (1), 360(2019).</li>
<li>Kang, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+confocal+Raman+and+quantitative+phase+microscopy+system+for+biomedical+diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Combined confocal Raman and quantitative phase microscopy system for biomedical diagnosis.</a> Biomed Opt Express. 2 (9), 2484-2492 (2011).</li>
<li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+diffraction+phase+microscopy+and+Raman+imaging+for+label-free+morpho-molecular+assessment+of+live+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Integration of diffraction phase microscopy and Raman imaging for label-free morpho-molecular assessment of live cells.</a> J Biophotonics. 12 (4), e201800291(2019).</li>
<li>Zhao, W., Sun, D., Yue, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+multimodal+non-linear+optical+imaging+of+three-dimensional+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Phys%22%5BJournal%5D)">Label-free multimodal non-linear optical imaging of three-dimensional cell cultures.</a> Front Phys. 10, 1100090(2023).</li>
<li>Hanna, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy%3A+current+applications+in+breast+cancer+diagnosis%2C+challenges+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy: current applications in breast cancer diagnosis, challenges and future prospects.</a> Br J Cancer. 126 (8), 1125-1139 (2022).</li>
<li>Dodo, K., Fujita, K., Sodeoka, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy+for+chemical+biology+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Chem+Soc%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy for chemical biology research.</a> J Am Chem Soc. 144 (43), 19651-19667 (2022).</li>
<li>Puppels, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+single+living+cells+and+chromosomes+by+confocal+Raman+microspectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Studying single living cells and chromosomes by confocal Raman microspectroscopy.</a> Nature. 347 (6290), 301-303 (1990).</li>
<li>Elumalai, S., Managó, S., De Luca, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+microscopy%3A+progress+in+research+on+cancer+cell+sensing%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Raman microscopy: progress in research on cancer cell sensing.</a> Sensors (Basel). 20 (19), 5525(2020).</li>
<li>Chandra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unveiling+the+molecular+secrets%3A+a+comprehensive+review+of+Raman+spectroscopy+in+biological+research%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Omega%22%5BJournal%5D)">Unveiling the molecular secrets: a comprehensive review of Raman spectroscopy in biological research.</a> ACS Omega. 9 (51), 50049-50063 (2024).</li>
<li>Cacace, T., Bianco, V., Ferraro, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+phase+imaging+trends+in+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Opt+Laser+Eng%22%5BJournal%5D)">Quantitative phase imaging trends in biomedical applications.</a> Opt Laser Eng. 135, 106188(2020).</li>
<li>Nguyen, T. L., Pradeep, S., Judson-Torres, R. L., Reed, J., Teitell, M. A., Zangle, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+phase+imaging%3A+recent+advances+and+expanding+potential+in+biomedicine%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Quantitative phase imaging: recent advances and expanding potential in biomedicine.</a> ACS Nano. 16 (8), 11516-11544 (2022).</li>
<li>Kuś, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tomographic+phase+microscopy+of+living+three-dimensional+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Tomographic phase microscopy of living three-dimensional cell cultures.</a> J Biomed Opt. 19 (4), 046009(2014).</li>
<li>Memmolo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+minimized+data+reduction+in+single-cell+tomographic+phase+microscopy+using+3D+Zernike+descriptors%5BTitle%5D)+AND+%22Intell+Comput%22%5BJournal%5D)">Loss minimized data reduction in single-cell tomographic phase microscopy using 3D Zernike descriptors.</a> Intell Comput. 2, 0010(2023).</li>
<li>Jin, D., Zhou, R., Yaqoob, Z., So, P. T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tomographic+phase+microscopy%3A+principles+and+applications+in+bioimaging+%5BInvited%5D%5BTitle%5D)+AND+%22JOSA+B%22%5BJournal%5D)">Tomographic phase microscopy: principles and applications in bioimaging [Invited].</a> JOSA B. 34 (5), B64-B77 (2017).</li>
<li>Pirone, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stain-free+identification+of+cell+nuclei+using+tomographic+phase+microscopy+in+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Photonics%22%5BJournal%5D)">Stain-free identification of cell nuclei using tomographic phase microscopy in flow cytometry.</a> Nat Photonics. 16 (12), 851-857 (2022).</li>
<li>Bresci, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+morpho-molecular+imaging+reveals+early+therapy-induced+senescence+in+human+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Non-invasive morpho-molecular imaging reveals early therapy-induced senescence in human cancer cells.</a> Sci Adv. 9 (37), eadg6231(2023).</li>
<li>Ghislanzoni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+diffraction+tomography+and+Raman+confocal+microscopy+for+the+investigation+of+vacuoles+associated+with+cancer+senescent+engulfing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biosensors%22%5BJournal%5D)">Optical diffraction tomography and Raman confocal microscopy for the investigation of vacuoles associated with cancer senescent engulfing cells.</a> Biosensors. 13 (11), 973(2023).</li>
<li>Bischof, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodal+bioimaging+across+disciplines+and+scales%3A+challenges%2C+opportunities+and+breaking+down+barriers%5BTitle%5D)+AND+%22npj+Imageing%22%5BJournal%5D)">Multimodal bioimaging across disciplines and scales: challenges, opportunities and breaking down barriers.</a> npj Imageing. 2 (1), 1-6 (2024).</li>
<li>Kobayashi-Kirschvink, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prediction+of+single-cell+RNA+expression+profiles+in+live+cells+by+Raman+microscopy+with+Raman2RNA%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Prediction of single-cell RNA expression profiles in live cells by Raman microscopy with Raman2RNA.</a> Nat Biotechnol. 42 (11), 1726-1732 (2024).</li>
<li>Popescu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+imaging+of+cell+mass+and+growth+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Optical imaging of cell mass and growth dynamics.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 295 (2), C538-C544 (2008).</li>
<li>Kim, K., Lee, S., Yoon, J., Heo, J., Choi, C., Park, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+label-free+imaging+and+quantification+of+lipid+droplets+in+live+hepatocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional label-free imaging and quantification of lipid droplets in live hepatocytes.</a> Sci Rep. 6 (1), 36815(2016).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Stringer, C., Pachitariu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellpose3%3A+one-click+image+restoration+for+improved+cellular+segmentation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Cellpose3: one-click image restoration for improved cellular segmentation.</a> Nat Methods. 22 (3), 592-599 (2025).</li>
<li>Talari, A. C. S., Movasaghi, Z., Rehman, S., Umapathy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy+of+biological+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Spectrosc+Rev%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy of biological tissues.</a> Appl Spectrosc Rev. 50 (1), 46-111 (2015).</li>
<li>Hobro, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+and+Raman+optical+activity+%28ROA%29+analysis+of+RNA+structural+motifs+in+Domain+I+of+the+EMCV+IRES%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Raman and Raman optical activity (ROA) analysis of RNA structural motifs in Domain I of the EMCV IRES.</a> Nucleic Acids Res. 35 (4), 1169-1177 (2007).</li>
<li>Samuel, A. Z., Sugiyama, K., Ando, M., Takeyama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+imaging+of+intracellular+RNA%2C+DNA%2C+and+liquid-liquid+phase+separated+membraneless+organelles+with+Raman+microspectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Direct imaging of intracellular RNA, DNA, and liquid-liquid phase separated membraneless organelles with Raman microspectroscopy.</a> Commun Biol. 5 (1), 1-9 (2022).</li>
<li>Kuhar, N., Sil, S., Umapathy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+Raman+spectroscopic+techniques+to+study+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Spectrochim+Acta+A+Mol+Biomol+Spectrosc%22%5BJournal%5D)">Potential of Raman spectroscopic techniques to study proteins.</a> Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc. 258, 119712(2021).</li>
<li>Park, C., Shin, S., Park, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generalized+quantification+of+three-dimensional+resolution+in+optical+diffraction+tomography+using+the+projection+of+maximal+spatial+bandwidths%5BTitle%5D)+AND+%22JOSA+A%22%5BJournal%5D)">Generalized quantification of three-dimensional resolution in optical diffraction tomography using the projection of maximal spatial bandwidths.</a> JOSA A. 35 (11), 1891-1898 (2018).</li>
<li>Bresci, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+monitoring+of+embryonic+development+in+living+colonies+by+combining+Raman+spectroscopy+and+tomographic+phase+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Multiscale+Imaging+Spectrosc+VI%22%5BJournal%5D)">Label-free monitoring of embryonic development in living colonies by combining Raman spectroscopy and tomographic phase microscopy.</a> Multiscale Imaging Spectrosc VI. PC13327, PC1332703(2025).</li>
<li>Baczewska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refractive+index+changes+of+cells+and+cellular+compartments+upon+paraformaldehyde+fixation+acquired+by+tomographic+phase+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Refractive index changes of cells and cellular compartments upon paraformaldehyde fixation acquired by tomographic phase microscopy.</a> Cytometry A. 99 (4), 388-398 (2021).</li>
<li>Movasaghi, Z., Rehman, S., Umapathy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy+of+biological+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Spectrosc+Rev%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy of biological tissues.</a> Appl Spectrosc Rev. 42 (5), 493-541 (2007).</li>
<li>Butler, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+Raman+spectroscopy+to+characterize+biological+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Using Raman spectroscopy to characterize biological materials.</a> Nat Protoc. 11 (4), 664-687 (2016).</li>
<li>Allakhverdiev, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy+and+its+modifications+applied+to+biological+and+medical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy and its modifications applied to biological and medical research.</a> Cells. 11 (3), 386(2022).</li>
<li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unveiling+cancer+metabolism+through+spontaneous+and+coherent+Raman+spectroscopy+and+stable+isotope+probing%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Unveiling cancer metabolism through spontaneous and coherent Raman spectroscopy and stable isotope probing.</a> Cancers. 13 (7), 1718(2021).</li>
<li>Swain, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cell+line+models+of+primary+human+cells+by+Raman+spectral+phenotyping%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Assessment of cell line models of primary human cells by Raman spectral phenotyping.</a> Biophys J. 98 (8), 1703-1711 (2010).</li>
<li>Smith, R., Wright, K., Ashton, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy%3A+an+evolving+technique+for+live+cell+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy: an evolving technique for live cell studies.</a> Analyst. 141 (12), 3590-3600 (2016).</li>
<li>Du, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman-guided+subcellular+pharmaco-metabolomics+for+metastatic+melanoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Raman-guided subcellular pharmaco-metabolomics for metastatic melanoma cells.</a> Nat Commun. 11 (1), 4830(2020).</li>
<li>Jones, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+techniques%3A+fundamentals+and+frontiers%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale+Res+Lett%22%5BJournal%5D)">Raman techniques: fundamentals and frontiers.</a> Nanoscale Res Lett. 14, 231(2019).</li>
<li>Shirokova, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Possibilities+of+holotomographic+microscopy+for+studying+primary+cell+cultures+of+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+IEEE+CNN%22%5BJournal%5D)">Possibilities of holotomographic microscopy for studying primary cell cultures of the brain.</a> Proc IEEE CNN. 208 (211), 208-211 (2024).</li>
<li>Choi, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tomographic+phase+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Tomographic phase microscopy.</a> Nat Methods. 4 (9), 717-719 (2007).</li>
<li>Park, Y., Depeursinge, C., Popescu, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+phase+imaging+in+biomedicine%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Photonics%22%5BJournal%5D)">Quantitative phase imaging in biomedicine.</a> Nat Photonics. 12 (10), 578-589 (2018).</li>
<li>Jung, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+non-invasive+quantitative+measurement+of+lipid+contents+in+individual+microalgal+cells+using+refractive+index+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Label-free non-invasive quantitative measurement of lipid contents in individual microalgal cells using refractive index tomography.</a> Sci Rep. 8 (1), 6524(2018).</li>
<li>Debnath, S. K., Park, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+quantitative+phase+imaging+with+a+spatial+phase-shifting+algorithm%5BTitle%5D)+AND+%22Opt+Lett%22%5BJournal%5D)">Real-time quantitative phase imaging with a spatial phase-shifting algorithm.</a> Opt Lett. 36 (23), 4677-4679 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Câmera CCD</td><td>Instrumentos de Princeton</td><td>PIXIS 100BR eXcelon</td><td>Detector para sinal de dispersão Raman.</td></tr><tr><td>Software de controle de câmera CCD</td><td>Instrumentos de Princeton</td><td>Campo de luz</td><td></td></tr><tr><td>Laser Ti-Sapphire de onda contínua (comprimento de onda: 785 nm)</td><td>Espectro-Física</td><td>3900 S</td><td>É usado para excitação de microscopia Raman.</td></tr><tr><td>Espelho dicróico</td><td>ThorLabs</td><td>DMSP750B</td><td>Espelho dicróico de 749 nm, desvia a excitação Raman de 785 nm para amostrar, filtra sinais de fluorescência e campo claro.</td></tr><tr><td>Soro fetal bovino</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>Corpo do microscópio de fluorescência</td><td>Olimpo</td><td>IX83</td><td></td></tr><tr><td>Laser (comprimento de onda: 532 nm)</td><td>Espectro-Física</td><td>Milênios eV</td><td>Laser de bomba para sistema de laser Ti-Sapphire de 785 nm.</td></tr><tr><td>Software MATLAB</td><td>Obras de Matemática</td><td>2023uma</td><td></td></tr><tr><td>Linha celular MDA-MB-231</td><td>ATCC</td><td>HTB-26</td><td></td></tr><tr><td>Espectrógrafo NIR</td><td>Andror</td><td>Holospec HS-HSG-785-LF</td><td>É usado para análise espectral de luz retroespalhada.</td></tr><tr><td>Lente objetiva (60 vezes; imersão em água de 1,2 NA)</td><td>Olimpo</td><td>UPLSAPO60&vezes;</td><td></td></tr><tr><td>Câmara de incubação no palco</td><td>Sucesso de Tokai</td><td>conjunto stxg-welsx</td><td></td></tr><tr><td>Software de controle de microscópio de código aberto</td><td>&micro; Gerente</td><td>Micro-Manager-2.0</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina-estreptomicina (10.000 U/mL)</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12 livre de fenol</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>21041025</td><td></td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato</td><td>Gibco</td><td>10-010-023</td><td></td></tr><tr><td>Placas de Petri com fundo de vidro de quartzo</td><td>Tecnologia Waken B</td><td>SF-S-D12</td><td></td></tr><tr><td>Software de análise de dados Raman</td><td>Aplicativo RamApp</td><td></td><td>Ferramenta baseada na Web para processamento de dados hiperespectrais Raman.</td></tr><tr><td>Câmera sCMOS</td><td>Fotônica de Hamamatsu</td><td>Orca Flash 4.0 v2</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de seringa</td><td>Chemyx</td><td>Fusão 720</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio de fase tomográfica</td><td>Tomocube, Inc.</td><td>HT-2H</td><td>Sistema comercial para obtenção de imagens de fase quantitativa.</td></tr><tr><td>Software de análise de dados TPM</td><td>Tomocube, Inc.</td><td>TomoStudio</td><td>Software utilizado para análise de dados de microscopia de fase tomográfica (TPM).</td></tr></tbody></table>

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A Multimodal Imaging Framework to Advance Phenotyping of Living Label-free Breast Cancer Cells

Descrevemos um fluxo de trabalho para a caracterização morfoquímica sem marcação de células vivas com base em RS e TPM confocais. Testamos a capacidade do fluxo de trabalho proposto para atingir a composição molecular e os parâmetros morfológicos da linhagem celular de câncer de mama humano MDA-MB-231 (Figura 1).
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We present multimodal confocal Raman micro-spectroscopy (RS) and tomographic phase microscopy (TPM) for quick morpho-chemical phenotyping of human breast ...

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Research

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Viver de imagem de Respostas de drogas no microambiente tumoral em modelos do rato do cancro da mama

Massas de tecido complexos, a partir de órgãos de tumores, são compostas de vários elementos celulares. Nós elucidada a contribuição de fenótipos celulares dentro de um tecido utilizando ratinhos transgénicos fluorescentes multi-marcados em combinação com coloração de imunofluorescência multiparamï seguido de separação espectral para decifrar origem celular, bem como características de células com base na expressão da proteína.

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Descreve-se um método para rotulagem de xenoenxertos estável derivado do doente (PDXs) com partículas lentivirais que expressam a proteína e repórteres de luciferase fluorescente verde. Este método permite acompanhar o crescimento de PDXs no sítio primário, bem como a detecção de metástases espontâneas e experimentais que utilizam em sistemas de imagem in vivo.

Rotulagem de cancro da mama xenoenxertos derivados do paciente com rastreáveis ​​Repórteres para o crescimento de tumores e metástases Estudos

Desenvolvemos um novo protocolo para estudar a dinâmica da população heterocelular em resposta a perturbações. Este manuscrito descreve uma plataforma baseada em imagens que produz conjuntos de dados quantitativos para a caracterização simultânea de múltiplos fenótipos celulares de populações heterocelulares de maneira robusta.

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O método de imagem intravital descrito aqui utiliza colágeno segunda geração harmônica e fluorescência endógena do cofator metabólico NAD(P)H para segmentar não invasivamente um microambiente tumoral não rotulado em compartimentos tumorais, estromaéreos e vasculares para análise aprofundada de imagens intravital 4D.

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Na era da imunoterapia contra o câncer, o interesse em elucidar a dinâmica do microambiente tumoral aumentou de forma impressionante. Este protocolo detalha uma técnica de imagem de espectrometria de massa em relação às suas etapas de coloração e imagem, que permitem uma análise espacial altamente multiplexada.

Expandindo a compreensão do microambiente tumoral usando imagens de espectrometria de massa de amostras de tecido fixo e parafina

Este protocolo descreve um método semi-automatizado para rastreios de drogas organoides de médio a alto rendimento e software de análise de imagem automatizado e agnóstico ao microscópio para quantificar e visualizar respostas multiparamétricas de drogas organoides únicas para capturar a heterogeneidade intratumoral.

Triagem de Drogas Organoides Tumorais Multiparamétricas Usando Imagem de Células Vivas de Campo Amplo para Análise a Granel e Organoide Único

A análise de imagens multiplexadas com código de barras tem melhorado recentemente a caracterização do microambiente tumoral, permitindo estudos abrangentes da composição celular, estado funcional e interações célula-célula. Neste artigo, descrevemos um protocolo de coloração e imagem usando o código de barras de anticorpos conjugados a oligonucleotídeos e imagens cíclicas, que permite o uso de uma técnica de análise de imagens de alta dimensão.

Análise de Imagem de Código de Barras Multiplexado para Caracterização de Imunoprofiling e Mapeamento Espacial na Análise Unicelular de Amostras de Parafina

Utilizando uma plataforma multimodal que combina modalidades de imagem óptica sem rótulo, desenvolvemos um protocolo para visualizar e quantificar a dinâmica e o metabolismo celular. Por meio de imagens via fluorescência multifotônica, geração de segundo harmônico e microscopia de espalhamento Raman estimulada, podemos gerar uma visão holística do ambiente celular e molecular.

Plataforma de imagem óptica multimodal para estudar o metabolismo celular

Este protocolo fornece um guia passo a passo para projetar um painel de anticorpos de imunofluorescência multiplex para imagens baseadas em código de barras de DNA de tecidos murinos de melanoma FFPE. Também descrevemos um pipeline de análise de imagem usando ferramentas de código aberto para gerar insights proteômicos espaciais sobre o microambiente imunológico do tumor de melanoma murino.

Imagem de imunofluorescência multiplex baseada em código de barras de DNA para analisar amostras FFPE de melanoma murino geneticamente reprogramado

Este protocolo detalha uma metodologia para detecção de mRNA multiplex com citometria de massa de imagem de proteína em seções de tecido embebidas em parafina fixada em formalina.

Cartografia Molecular de Modalidade Dupla: Integrando a Detecção de RNA Multiplex com a Citometria de Massa por Imagem de Proteínas

Aprenda a realizar fenotipagem morfoquímica sem rótulos de células de câncer de mama usando microespectroscopia Raman confocal e microscopia de fase tomográfica. Esta abordagem não invasiva fornece análises bioquímicas e morfológicas detalhadas.

Uma estrutura de imagem multimodal para avançar a fenotipagem de células vivas de câncer de mama sem rótulos

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