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DOI: 10.3791/68529-v
Jimin Cho1, Mahn Jae Lee2, Juyeon Park3,4, Jaehyeok Lee5, Sumin Lee5, Chaeuk Chung2, Bon-Kyoung Koo6, YongKeun Park3,4,5
1Graduate School of Stem Cell and Regenerative Biology,Korea Advanced Institute of Science and Technology (KAIST), 2Division of Pulmonary and Allergy Medicine, Department of Internal Medicine,Chungnam National University Hospital, 3Department of Physics,KAIST, 4KAIST Institute for Health Science and Technology,KAIST, 5Tomocube Inc., 6Center for Genome Engineering,Institute for Basic Science
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a protocol for high-resolution, label-free, three-dimensional imaging of organoids, facilitating real-time visualization of structural dynamics and drug responses. The approach utilizes low-coherence holotomography, enhancing the ability to monitor biophysical changes during organoid development.
Apresentamos um protocolo passo a passo para imagens tridimensionais de alta resolução, sem rótulos e tridimensionais usando holotomografia de baixa coerência. Este protocolo detalha a preparação da cultura de organoides, aquisição de imagens e análise computacional de imagens, permitindo a visualização em tempo real da dinâmica estrutural e respostas a medicamentos em organoides vivos.
Nosso objetivo é estabelecer métodos de imagem em tempo real e sem rótulos ao monitorar mudanças biofísicas em organoides vivos durante o desenvolvimento e em resposta a medicamentos. Este protocolo facilita a escala simplificada de imagens e testes de drogas não invasivos em organoides vivos apoiados por mutação orientada por IA e seleção quantitativa de textura para pesquisa biomédica. Planejamos integrar ainda mais imagens 3D sem rótulos e uma análise de um ano para estudos de organoides não invasivos de alta resolução em modelagem de doenças e medicina precisa.
Para começar, aspire o meio gasto de cada poço de uma placa de 48 poços contendo a matriz extracelular. Adicione 200 microlitros de solução de recuperação celular a cada poço e incube a quatro graus Celsius por 30 minutos. Usando uma pipeta, colete suavemente a suspensão organoide e transfira-a para um tubo de microcentrífuga.
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