Name: Linfodenectomia Renal Bilateral Murina (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-30T12:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 31 s
Description: Aprenda a realizar linfodenectomia renal bilateral em camundongos para estudar o tráfego de células imunes e respostas imunológicas renais. Este protocolo cirúrgico permite a remoção seletiva dos linfonodos renais com preservação de outros tecidos linfáticos.

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<ol><li>Amador-Patarroyo, M. J., Peñaranda, A. C., Bernal, M. T. Autoimmunity. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAmador-Patarroyo%2C+MJ+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. Colombia. (2013).</li>
<li>Echeverri, A. F., Tobón, G. J. Systemic autoimmune diseases. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aEcheverri%2C+AF+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. Colombia. (2013).</li>
<li>García-Carrasco, M., et al. Autoimmune disorders and pathogenesis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGarc%C3%ADa-Carrasco%2C+M+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. Colombia. (2013).</li>
<li>Sarmiento-Monroy, J. C., Mantilla, R. D., Rojas-Villarraga, A., Anaya, J. -M., et al. Lupus and immunological profiling. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSarmiento-Monroy%2C+JC+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. In: Anaya, J.-M. (2013).</li>
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<li>Rouiz-Argüelles, A., et al. Hematologic autoimmune conditions. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRouiz-Arg%C3%BCelles%2C+A+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. Colombia. (2013).</li>
<li>Venanzi, E. S., Benoist, C., Mathis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Good+riddance%3A+Thymocyte+clonal+deletion+prevents+autoimmunity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Good riddance: Thymocyte clonal deletion prevents autoimmunity.</a> Curr Opin Immunol. 16 (2), 197-202 (2004).</li>
<li>Meng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunological+mechanisms+of+tolerance%3A+Central%2C+peripheral+and+the+role+of+T+and+B+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Asia+Pac+Allergy%22%5BJournal%5D)">Immunological mechanisms of tolerance: Central, peripheral and the role of T and B cells.</a> Asia Pac Allergy. 13 (4), 175-186 (2023).</li>
<li>Swartz, M. A., Hubbell, J. A., Reddy, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+drainage+function+and+its+immunological+implications%3A+From+dendritic+cell+homing+to+vaccine+design%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Lymphatic drainage function and its immunological implications: From dendritic cell homing to vaccine design.</a> Semin Immunol. 20 (2), 147-156 (2008).</li>
<li>O'Byrne, A. M., Van Baarsen, L. G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+nodes+as+gatekeepers+of+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22RMD+Open%22%5BJournal%5D)">Lymph nodes as gatekeepers of autoimmune diseases.</a> RMD Open. 10 (4), e004097(2024).</li>
<li>Hampton, H. R., Chtanova, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+migration+of+immune+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Lymphatic migration of immune cells.</a> Front Immunol. 10, 1168(2019).</li>
<li>Fortuna, G., Brennan, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+lupus+erythematosus%3A+Epidemiology%2C+pathophysiology%2C+manifestations%2C+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Dent+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Systemic lupus erythematosus: Epidemiology, pathophysiology, manifestations, and management.</a> Dent Clin North Am. 57 (4), 631-655 (2013).</li>
<li>Hanly, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+frequency+and+outcome+of+lupus+nephritis%3A+Results+from+an+international+inception+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Rheumatology%22%5BJournal%5D)">The frequency and outcome of lupus nephritis: Results from an international inception cohort study.</a> Rheumatology. 55 (2), 252-262 (2016).</li>
<li>Andrews, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+murine+lupus-like+syndromes%3A+Clinical+and+immunopathological%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Spontaneous murine lupus-like syndromes: Clinical and immunopathological.</a> J Exp Med. 148, 1198-1215 (1978).</li>
<li>Harrell, M. I., Iritani, B. M., Ruddell, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+node+mapping+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Lymph node mapping in the mouse.</a> J Immunol Methods. 332 (1-2), 170-174 (2008).</li>
<li>Morse, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormalities+induced+by+the+mutant+gene%2C+lpr.+Patterns+of+disease+and+expression+of+murine+leukemia+viruses+in+SJL%2FJ+mice+homozygous+and+heterozygous+for+lpr%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Abnormalities induced by the mutant gene, lpr. Patterns of disease and expression of murine leukemia viruses in SJL/J mice homozygous and heterozygous for lpr.</a> J Exp Med. 161 (3), 602-616 (1985).</li>
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<li>Dong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antigen+presentation+by+dendritic+cells+in+renal+lymph+nodes+is+linked+to+systemic+and+local+injury+to+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Antigen presentation by dendritic cells in renal lymph nodes is linked to systemic and local injury to the kidney.</a> Kidney Int. 68 (3), 1096-1108 (2005).</li>
<li>Lan, H. Y., Nikolic-Paterson, D. J., Atkins, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trafficking+of+inflammatory+macrophages+from+the+kidney+lymph+nodes+during+experimental+glomerulonephritis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Immunol%22%5BJournal%5D)">Trafficking of inflammatory macrophages from the kidney lymph nodes during experimental glomerulonephritis.</a> Clin Exp Immunol. 92, 336-341 (1993).</li>
<li>Karmali, R. J., Suami, H., Wood, C. G., Karam, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+drainage+in+renal+cell+carcinoma%3A+Back+to+the+basics%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">Lymphatic drainage in renal cell carcinoma: Back to the basics.</a> BJU Int. 114 (6), 806-817 (2014).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Circuito anestésico</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Ou anestésico injetável</td></tr><tr><td>Citômetro de fluxo BD LSRII (ou equivalente)</td><td>BD em Biociências</td><td></td><td>Equipado com o Software FACS Diva</td></tr><tr><td>Buprenorfina XR</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Para analgesia</td></tr><tr><td>Mídia de cultura celular &nbsp;</td><td>Qualquer</td><td></td><td>(para técnicas de células vivas; ou seja, DMEM ou RPMI)</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Biolenda</td><td>422801</td><td>Concentração de trabalho: 15 ug/mL</td></tr><tr><td>Luzes LED duplas/duplas de microscópio de pescoço de ganso</td><td>Qualquer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Etanol (70% em água)</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Para limpeza</td></tr><tr><td>CD45.2 (104) conjugado com FITC anti-mouse</td><td>Biolenda</td><td>109806</td><td>Concentração de trabalho: 5 ug/mL</td></tr><tr><td>Pinça: Pinça de ponta fina e angular (x2)</td><td>Roboz</td><td>RS-5058</td><td>Material: Dumoxel; Padrão #5, ângulo de 45 graus; Tamanho da ponta 0,1 x 0,06mm</td></tr><tr><td>Pinça: Pinças de ponta fina</td><td>Roboz</td><td>RS-4960</td><td>Material: Dumostar; Padrão #1; Tamanho da ponta: 0,20 x 0,12mm</td></tr><tr><td>Pinça: Pinças de ponta fina</td><td>Roboz</td><td>RS-4966</td><td>Material: Dumostar, ponta de Biologie; Padrão #3; Tamanho da ponta: 0,08 x 0,04mm</td></tr><tr><td>Lidocaína</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Para analgesia</td></tr><tr><td>Ratos</td><td>Jax</td><td></td><td>Para a cepa C57BL/6, camundongos selvagens do tipo selvagem: The Jackson laboratories #000664</td></tr><tr><td>Condutores de agulha</td><td>Roboz</td><td>RS-6410</td><td>Suporte de agulhas Castroviejo; Reto</td></tr><tr><td>Microscópio operador</td><td>Leica</td><td>MZ9.5</td><td>Microscópio operador de cabeça estéreo Leica Mz9.5</td></tr><tr><td>OPCIONAL: Evans Blue dye</td><td>Sigma</td><td>E2129-10G</td><td>Para rastreamento linfático.</td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato (PBS)</td><td>Qualquer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solução de povidona/iodo</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Para preparação/esterilização da pele</td></tr><tr><td>Tesoura: Tesoura de ponta extra fina</td><td>Roboz</td><td>RS-5605</td><td>McPherson-Vannas; Aresta de corte de 3mm; curva</td></tr><tr><td>Tesoura: Tesoura média</td><td>Roboz</td><td>RS-5676</td><td>Noyes; Borda de corte de 13mm; Direto</td></tr><tr><td>Cola cirúrgica</td><td>Qualquer</td><td></td><td>por exemplo, adesivo de tecido 3M Vetbond</td></tr><tr><td>Sutura: polipropileno monofilamento azul 6-0</td><td>Qualquer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fixador tecidular</td><td>Qualquer</td><td></td><td>(para histologia planejada; ou seja, formalina tamponada com 10% neutro ou 4% paraformaldeído)</td></tr><tr><td>Bolsa térmica de circulação de água morna</td><td>Qualquer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ratos&nbsp;</td><td>&nbsp; Os laboratórios Jackson</td><td></td><td>Para a cepa Balb/c, camundongos propensos ao lúpus (MRL/MpJ-Fas-lpr/J): #000485</td></tr></tbody></table>

linfodenectomia renal bilateral murina

Murine Bilateral Renal Lymphadenectomy

Linfodenectomia Renal Bilateral Murina

Autoimmune diseases are the result of immune cells inappropriately targeting self-tissue, leading to pathology and damage to vital organs. Secondary ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Imunologia e Infecção

Para seguir a progressão de uma resposta imune ao longo do tempo dentro do mesmo rato, gânglios linfáticos pode ser sequencialmente removido por cirurgia. Aqui, nós descrevemos como esta técnica pode ser realizada.

Cirurgia Nó murino superficial linfático

Este vídeo demonstra o procedimento de isolamento cirúrgico do linfonodo de drenagem inguinal de um modelo de camundongo. A incisão da região abdominal fornece acesso ao linfonodo inguinal, que é colhido cirurgicamente. O linfonodo inguinal translúcido colhido pode ser usado para estudos imunológicos.

Colhendo um linfonodo de drenagem inguinal de um modelo murino

Este vídeo demonstra uma técnica para canular o ducto linfático mesentérico em ratos. Este método permite o acesso direto a todo o volume de componentes presentes no fluido linfático.

Canulação do Ducto Linfático Mesentérico em Modelo de Rato para Colheita de Fluido Linfático

Todos os modelos de metástase espontânea do carcinoma de células renais (RCC), a progressão da doença podem ser utilizados para avaliar os tratamentos em um ambiente clinicamente relevante. Este protocolo demonstra procedimentos diferentes para a implantação de células tumorais renal ortotópico, nefrectomia adequada, e, finalmente, apresenta um guia de necropsia para avaliação visual e bioluminescente de carga metastático e localização.

Modelagem espontânea metastático carcinoma de células renais (mRCC) em ratos após nefrectomia

Aqui descrevemos uma técnica para canular o ducto linfático mesentérico em ratos que permite a quantificação do transporte de lipídios e drogas através do sistema linfático após a administração intestinal. A técnica pode ser adaptada para avaliar as concentrações de linfa mesentérica e/ou transporte de fluidos, células imunes, peptídeos, proteínas e moléculas lipofílicas.

A linfa mesentérica Duct canulada Rat Modelo: Aplicação para a Avaliação de Intestinal Linfática transporte da droga

O objetivo deste manuscrito é descrever as etapas necessárias para realizar um transplante renal em um camundongo, prestando atenção especial aos detalhes da anastomose arterial.

Rim murino técnica de transplante

Engenharia de tecido renais construções oferecem uma solução para a escassez de órgãos e os efeitos deletérios da diálise. Aqui, descrevemos um protocolo para micro dissecar murino rins para isolamento dos segmentos córtico-medular. Esses segmentos são implantados livre de andaime celular construções, formando organoids renal.

Microdissection de segmentos de tecido Renal primária e incorporação com tecnologia de construção romance livre de andaime

Este manuscrito apresenta um protocolo padronizado para uma nefrectomia 5/6 por bipolectomia aguda via laparotomia mediana em modelo de rato, com o objetivo de induzir um estado de insuficiência renal via redução do parênquima renal com grande grau de precisão metódica e baixo risco de erro técnico.

Nefrectomia 5/6 usando bipolectomia afiada via laparotomia de linha média em ratos

Este protocolo descreve um método para induzir obstrução ureteral unilateral (UUO) em camundongos para estudar a progressão da fibrose tecidual na nefropatia obstrutiva. Inclui procedimentos cirúrgicos, cuidados pós-operatórios e métodos para avaliação da fibrose.

Modelo de obstrução ureteral unilateral para investigação de fibrose intersticial renal

Este artigo fornece instruções detalhadas para permitir que os investigadores realizem obstrução ureteral unilateral reversível em camundongos usando um modelo padronizado que permite a análise dos resultados estruturais e funcionais de longo prazo após a reversão da obstrução ureteral prolongada.

Um modelo de camundongo para avaliar os resultados estruturais e funcionais de longo prazo após a reversão da obstrução ureteral unilateral prolongada

Este protocolo descreve um procedimento de sobrevivência para linfadenectomia mesentérica murina segura e bem tolerada em cada uma das quatro estações ao longo da cadeia do linfonodo mesentérico. Esse procedimento é adaptável para permitir a interrupção seletiva da comunicação linfática com o cólon distal, cólon proximal e/ou intestino delgado.

Linfodenectomia mesentérica murina para interrupção seletiva da comunicação linfática com intestino específico de região

Aprenda a realizar linfodenectomia renal bilateral em camundongos para estudar o tráfego de células imunes e respostas imunológicas renais. Este protocolo cirúrgico permite a remoção seletiva dos linfonodos renais com preservação de outros tecidos linfáticos.

Linfodenectomia Renal Bilateral Murina

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